Схема подключения рнпп 311: Габаритные размеры и схема подключения реле РНПП-311

Содержание

Габаритные размеры и схема подключения реле РНПП-311

Реле через входные контакты (L1, L2, L3,) включается параллельно нагрузке. К клемме N подключается ноль. Если ноль подключить технически невозможно, либо реле работает в сетях с изолированной нейтралью, погрешность измерения перекоса фаз и погрешность определения порога срабатывания по напряжению увеличиваются до 5 %.

Реле на выходе имеет две группы независимых выходных перекидных контактов (1-2-3, 4-5-6). В «холодном» состоянии (реле без напряжения, не подключено) контакты  1-2(4-5) замкнуты, а контакты 5-6(2-3) разомкнуты. После подключения реле параллельно нагрузке и при наличии напряжения в сети и отсутствии причин срабатывания& реле, контакты 1-2(4-5) размыкаются, а контакты 5-6(2-3) замыкаются.

Контакты 5-6(2-3) рекомендуется включать в разрыв питания катушки пускателя.

При срабатывании реле отключение нагрузки производится путем разрыва цепи питания катушки магнитного пускателя через размыкающие контакты 5-6(2-3).

Характеристика выходных контактов 1-2-3, 4-5-6

Макс. ток

при U~250В

Макс. мощн.

Макс. напр.~

Макс. ток при
Uпост=30В

Cosφ=0,4-1,0

(АС 3) 2 А 2000 ВА 440 В 3 А

При срабатывании реле на лицевой панели загорается красный светодиод «авария».

Красный светодиод горит всегда при разомкнутом состоянии контактов 5-6(2-3).

Три зеленых светодиода на лицевой панели сигнализируют наличие напряжения на каждой фазе соответственно: при обрыве одной из фаз соответствующий светодиод гаснет (при этом также загорится красный светодиод, реле сработает по обрыву фазы).

Реле имеет одну совмещенную регулируемую уставку срабатывания по максимальному/минимальному напряжению, к примеру, в положении 10% реле будет срабатывать при повышении/понижении напряжения на 10% от номинального.

Регулируемая уставка выставляется потребителем. Рекомендуется выставлять уставку до включения в сеть или при отключенном МП. При включении в сеть нагрузка включается с задержкой 5 (0, 10, 60, 100, 150, 200, 250 — под заказ) сек.

Лицевая панель и габаритные размеры реле РНПП-311 приведены на рисунке 1, схема подключения — на рисунке 2.

1 — Регулировка срабатывания по Umax / Umin;
2 — Красный светодиод «авария»;
3 — Три зелёных светодиода, наличие напряжения на каждой фазе;
4 — Входные контакты;
5 — Выходные контакты.

Рисунок 1 — Лицевая панель и габаритные размеры РНПП-311

Рисунок 2 — Схема подключения реле РНПП-311

Трехфазное реле напряжения РНПП-311. Особенности. Цена.

РНПП-311

 

 Реле напряжения РНПП-311 предназначено для защиты электроустановок, электроприборов и т. п., от недопустимых колебаний напряжения с продолжительностью не менее 0,02 с в трехфазной сети 380 В/ 50 Гц, последствий обрыва фаз, перекоса, чередования и  слипания. Защита осуществляется путем отключения  потребителя от сети питания.

 Реле РНПП-311 выполнено в 3-х модульном корпусе для крепления на DIN-рейку 35мм. На передней панели расположены 3 светодиодных индикатора наличия фаз, индикатор срабатывания реле, регулятор нижнего/верхнего порога отключения.

 

Особенности реле напряжения РНПП-311.

Сохраняет работоспособность при напряжении до 500 В.

Независимое питание внутренней схемы реле от каждой из 3-х фаз.

Регулируемые верхний/нижний порог напряжения.

Индикация наличия напряжения на каждой фазе.

Контроль  чередования и отсутствия слипания фаз.

Контроль перекоса фаз.

Контроль обрыва фаз.

 

  Рис. Передняя панель трехфазного реле напряжения РНПП-311.

 

 

1 – Регулировка срабатывания по Umax / Umin;

2 – Красный светодиод «авария»;

3 – Три зелёных светодиода, наличие напряжения на каждой фазе;

4 – Входные контакты L1, L2, L3, N ;

5 – Выходные контакты.

 

 

 

 

 

Работа устройства.

 

   Рис. Схема подключения трехфазного реле напряжения РНПП-311.

 

 К клемме N подключается ноль. Если ноль подключить технически невозможно, либо реле работает в сетях с изолированной нейтралью, погрешность измерения перекоса фаз и погрешность определения порога срабатывания по напряжению увеличиваются до 5 %.

РНПП-311 имеет одну совмещенную регулируемую уставку срабатывания по максимальному/минимальному напряжению.

 При срабатывании реле на лицевой панели загорается красный светодиод AВ. ОТКЛ. Красный светодиод горит всегда при разомкнутом состоянии контактов 5-6(2-3).

 Три зеленых светодиода на лицевой панели сигнализируют наличие напряжения на каждой фазе соответственно: при обрыве одной из фаз соответствующий светодиод гаснет (при этом также загорится красный светодиод, реле сработает по обрыву фазы).

  Если при подключении оборудования фазировка не проверялась, то с помощью РНПП-311 можно определить правильное вращение фаз. Если реле не включается (горит красный светодиод АВ.ОТКЛ, отсутствуют другие запрещающие факторы: недопустимые колебания напряжения сети, нарушение амплитудной симметрии (перекос фаз), слипание фаз, обрыв фаз), рекомендуется поменять порядок подключения фаз на входе.

 

Технические характеристики.

Наименование

Значение

Номинальное напряжение, В

380

Частота сети, Гц

45 – 55

Диапазон регулирования порога срабатывания по максимальному / минимальному напряжению питания, в % от номинального напряжения

5 – 25

Время автоматического повторного включения после восстановления

параметров U, АПВ, с

5

Фиксированная задержка срабатывания по Umах, с

1,5

Фиксированная задержка срабатывания по Umin, с

12

Время срабатывания при обрыве одной из фаз, с

1,5

Величина определения перекоса фаз, В

60

Гистерезис по напряжению, В

6 – 7

Точность определения порога срабатывания по напряжению, В, не более

3

Напряжение, при котором сохраняется работоспособность, В

80 – 500

Кратковременно допустимое максимальное напряжение, при котором сохраняется работоспособность, В

700

Суммарный ток потребления от сети, мА

35

Максимальный коммутируемый ток выходных контактов, А

5

Коммутационный ресурс выходных контактов:

под нагрузкой 5 А (cos φ = 1,0), раз, не менее

 

100 тыс.

Напряжение катушки пускателя, В, АС

110-380

Напряжение катушки пускателя, В, DC

12-36

Климатическое исполнение

УХЛ 4

Температура эксплуатации, °С

-25… +40

Габаритные размеры, B*H* L, мм

52х90х65

Гарантия, лет

3

 

Габаритные размеры.

 

Цена (Прайс).

Наименование

Цена

Заказать

Реле контроля напряжения РНПП-311

1599-00

 

 

Трехфазное реле напряжения и контроля фаз РНПП-311M

Номинальное линейное/фазное напряжение питания сети, В 380/220,400/230
Частота сети, Гц 45 –65
Гармонический состав (несинусоидальность) напряжения питания ГОСТ 32144-2013
Диапазон регулирования порога срабатывания по максимальному/минимальному напряжению питания, в процентах от номинального напряжения 5–50
Диапазон регулирования времени срабатывания защиты, с 0–10
Диапазон регулирования времени АПВ, с 0-600
Фиксированная задержка срабатывания по минимальному напряжению, с 12*
Время срабатывания при обрыве одной из фаз,с,не более 0,2
Время АПВ, мин 1−600
Задержка отключения, с 1–300
Время готовности при подаче напряжения питания, с, не более 0,2**
Величина определения перекоса фаз, В 60
Гистерезис по напряжению, В 5-6
Гистерезис по перекосу фаз, В 5-6
Точность определения порога срабатывания по напряжению, В, не более 3
Точность определения перекоса фаз,%, не более 2
Напряжение, при котором сохраняется работоспособность:
— по одной фазе, В
— по трем фазам, В

140–450
95–450
Потребляемая мощность (под нагрузкой), Вт, не более 1,2
Максимальный коммутируемый ток входных контактов,  А 5
Фиксированное время срабатывания при снижении напряжения более 60В от
уставки по Umin или при снижении напряжения ниже 145В, с
0,12
Коммутационный ресурс выходных контактов:
— под нагрузкой 5А (cos φ = 1,0), раз, не менее
— под нагрузкой 1А (cos φ = 1,0), раз, не менее

100 тыс.
1 млн.
Назначение изделия аппаратура управления и распределения
Номинальный режим работы продолжительный
Степень защиты лицевой панели IP40
Степень защиты клеммника IP20
Класс защиты от поражения электрическим током II
Климатическое исполнение УХЛ 3.1
Допустимая степень загрязнения II
Категория перенапряжения II
Номинальное напряжение  изоляции, В 450
Номинальное импульсное выдерживаемое напряжение, кВ 2,5
Сечение проводов для подключения к клеммам, мм² 0,5 — 1,5
Момент затяжки винтов клемм, Н*м 0,4
Материал корпуса самозатухающий пластик
Установка (монтаж) изделия стандартная DIN-рейка 35 мм

Реле напряжения, перекоса и последовательности фаз РНПП-311

Реле напряжения, перекоса и последовательности фаз РНПП-311

Реле напряжения РНПП-311 предназначено для отключения нагрузки 380В/50 Гц при недопустимых колебаниях напряжения в сети с продолжительностью не менее 0,02 сек, нарушении амплитудной симметрии сетевого напряжения (перекосе фаз), обрыве и нарушении последовательности фаз. Эффективно используется для защиты холодильного,  кондиционерного, компрессорного и другого оборудования,  имеющего электродвигательную нагрузку. Также используются в устройствах, где необходимо осуществлять постоянный контроль наличия, качества и полнофазности сетевого напряжения, например в схемах АВР. Заменяет реле типа ЕЛ-11, ЕЛ-13, РКФ, РН.

ПАСПОРТ
РЕЛЕ НАПРЯЖЕНИЯ РНПП-311

Сертификат соответствия № РОСС RU.AE25.H00601 №0517372

Москва

1 НАЗНАЧЕНИЕ

Реле напряжения РНПП-311 (в дальнейшем именуется – реле) предназначено для защиты энергопотребителей от аварийных режимов в сети электроснабжения с напряжением 3 ~ 50 Гц 380 В. Реле выдает сигнал на отключение энергопотребителя от сети при недопустимом снижении (повышении) напряжения в любой из фаз, амплитудной асимметрии фазных напряжений («перекосе фаз»), обрыве одной либо двух фаз, нарушении последовательности чередования фаз.

2 ТЕХНИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ

Номинальное фазное напряжение, В———————————————————————- 220
Номинальное межфазное напряжение, В—————————————————————- 380
Частота сети, Гц————————————————————————————————— 45?55
Диапазон регулирования:
-срабатывания no Umax/ Umln, % от номинального ————————————————— 5?25
Фиксированная величина межфазной асимметрии напряжений, В ————————— 50?55
Фиксированная задержка срабатывания по Umln, сек————————————————- 10
Фиксированное время срабатывания no Umax, сек—————————————————— 0,1
Фиксированное время срабатывания при снижении напряжения более,
чем на 30В от выставленной уставки no Umin———————————————————— 0,1
Фиксированное время срабатывания при недопустимой асимметрии напряжений
между фазами, при обрыве одной либо двух фаз, сек ———————————————- 0,1
Время автоматического, повторного включения после восстановления
параметров напряжения, сек———————————————————————————- 10
Напряжение катушки пускателя, В переменного——————————————————— ~110?380
Напряжение катушки пускателя, В постоянного——————————————————— =12?36
Точность определения порога срабатывания по U, В————————————————- до 3
Точность определения амплитудного перекоса фаз,%———————————————— 1,5
Напряжение, при котором сохраняется работоспособность, В————————————- 120?550
Кратковр. допустимое максимальное напряжение, при котором
сохраняется работоспособность, В—————————————————————————- 750
Диапазон рабочих температур, оС———————————————————————— минус 25?+55
Температура хранения, оС——————————————————————————— минус 45?+70
Суммарный ток потребления от сети, мА——————————————————————- до 30

Диапазон уставок срабатывания и их фиксированные значения могут быть изменены по желанию заказчика.

3 КОМПЛЕКТ ПОСТАВКИ

Комплект поставки приведен в таблице 1.

Таблица 1

1. Реле напряжения РНПП-311 1 шт.
2. Паспорт 1 экз.

4 УСТРОЙСТВО И ПРИНЦИП РАБОТЫ

Реле через входные контакты (L1, L2, L3, N) включается в сеть параллельно нагрузке и контролирует действующее значение сетевого напряжения. Репе на выходе имеет две группы переключающих контактов (1-2-3, 4-5-6). В начальном состоянии (напряжение на реле не подано), контакты 1-2, 4-5 замкнуты, а контакты 2-3, 5-6 разомкнуты. В рабочем состоянии (сетевое напряжение подано на реле, параметры сети в норме) контакты 2-3, 5-6 замыкаются, а контакты 1-2, 4-5 размыкаются. Переключение контактов происходит с задержкой 5-6 секунд.

Контакты 2-3, 5-6 рекомендуется включать в разрыв питания катушки пускателя, коммутирующего нагрузку (смотри схему подключения реле).

При возникновении аварийных режимов в сети реле отключает нагрузку путем разрыва цепи питания катушки магнитного пускателя через размыкающие контакты 2-3, 5-6.

Характеристика выходных контактов 1-2-3, 4-5-6 приведена в таблице 2.

Таблица 2

  Максимальный ток при U~250B Максимальная мощность
Соs j 0,4¸1. 0 500 ВА

Реле обеспечивает световую индикацию режимов работы.

Три зеленых светодиода «А В С-Наличие фаз» на лицевой панели сигнализируют наличие напряжения в каждой из фаз.

В случае обрыва одной (двух) фаз гаснет соответствующий светодиод (светодиоды) зеленого цвета.

При любой аварии в контролируемой сети, вызвавшей срабатывание реле, загорается светодиод красного цвета «Авария».

5 ПОДГОТОВКА К РАБОТЕ

1 Установить реле на 35 мм монтажную DIN-рейку и закрепить с помощью зажима-защелки, который расположен на задней стенке корпуса реле.
Рабочее положение – вертикальное.
2 Выполнить настройку уставки срабатывания по максимальному и минимальному напряжению при помощи потенциометра «?U(%)», размещенного на лицевой панели реле. Шкала потенциометра «?U(%)» проградуирована в процентах (5?25% с дискретностью 2.5 В) от номинального напряжения в фазе (220 В). Для правильного понимания работы уставки «?U(%)» рассмотрим пример:
Потенциометр уставки «?U(%)» установлен в положение 10%.
10% от 220 В составляет 22 В
Реле отключит нагрузку при снижении напряжения в любой из фаз ниже 220-22=198 В
Реле отключит нагрузку при повышении напряжения в любой из фаз выше 220+22=242 В
Регулируемая уставка настраивается потребителем. Рекомендуется выставлять уставку до включения реле в сеть.
Реле подключается параллельно нагрузке согласно приведенной схеме на рисунке 1.


Рисунок 1 — Схема подключения реле напряжения РНПП-311

6 ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ

По способу защиты человека от поражения электрическим током реле соответствует классу защиты 0 по ГОСТ 12.2.007.0-75.

Категорически запрещается:

  • эксплуатировать реле со снятой крышкой;
  • эксплуатировать реле с механическими повреждениями;
  • устранять неисправности при поданном на реле электропитании.

7 ОТЛИЧИТЕЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ

1. Независимое питание внутренней схемы реле от каждой из 3-х фаз.
2. Цифровая обработка сигнала напряжения
3. Реле не требует дополнительной отладки и настройки потребителем, т.к. выставленная регулируемая и зафиксированные уставки достаточно точно выверены и не зависят от внешних факторов.
4. Наличие точной регулировки по напряжению в широком диапазоне.
5. Возможность изменения по желанию заказчика диапазона регулируемой уставки и величин зафиксированных уставок.
6. Исключение временной задержки на отключение при глубоком понижении напряжения более ЗОВ от выставленной уставки по Umin.
7. Гальванически развязанная цель питания катушки пускателя с силовыми цепями.
8. Коммутационный ресурс составляет не менее 100 тыс. раз.
9. Индикация наличия напряжения по каждой фазе, наличие индикации аварийного срабатывания.
10. Коэффициент возврата (гистерезис) по отключению/включению как по Umax, так и no Umin в пределах 3?4 В.
11. Реле сохраняет работоспособность при наличии 30% от номинального напряжения хотя бы в одной из фаз.
12. Крепление на стандартную DIN- рейку.
13. Малогабаритность и небольшой вес изделия.

8 ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА

Изготовитель гарантирует соответствие изделия техническим требованиям при соблюдении потребителем условий эксплуатации, транспортирования и хранения. Гарантийный срок эксплуатации – 12 месяцев со дня отгрузки изделия потребителю. Гарантии не распространяются при отсутствии паспорта на изделие, при несоблюдении потребителем условий эксплуатации, установленных настоящим паспортом и вмешательства в схему изделия без согласования с Изготовителем.

9 СВИДЕТЕЛЬСТВО О ПРИЕМКЕ

Реле напряжения РНПП-311 заводской номер № соответствует техническим требованиям и признано годным для эксплуатации.

Реле напряжения РНПП-311М

Реле напряжения РНПП-311М

РЕЛЕ НАПРЯЖЕНИЯ, ПЕРЕКОСА И ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ ФАЗ РНПП-311

 

НАЗНАЧЕНИЕ

Реле напряжения РНПП-311предназначено для отключения нагрузки 380 В/ 50 Гц при: недопустимых
колебаниях напряжения в сети с продолжительностью не менее 0,02 с, нарушении амплитудной
симметрии сетевого напряжения (перекосе фаз), обрыве, нарушении последовательности и слипании
фаз.

ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ
Реле через входные контакты (L1, L2, L3, N) включается параллельно нагрузке.
К клемме N подключается ноль. Если ноль подключить технически невозможно, либо реле работает
в сетях с изолированной нейтралью, погрешность измерения перекоса фаз и погрешность определения
порога срабатывания по напряжению увеличиваются до 5 %.
Реле на выходе имеет две группы независимых выходных перекидных контактов (1-2-3, 4-5-6). В
«холодном» состоянии (реле без напряжения, не подключено) контакты 1-2(4-5) замкнуты, а контакты
5-6(2-3) разомкнуты. После подключения реле параллельно нагрузке и при наличии напряжения в
сети и отсутствии причин срабатывания реле, контакты 1-2(4-5) размыкаются, а контакты 5-6(2-3)
замыкаются.
Контакты 5-6(2-3) рекомендуется включать в разрыв питания катушки пускателя.
При срабатывании реле отключение нагрузки производится путем разрыва цепи питания катушки
магнитного пускателя через размыкающие контакты 5-6(2-3).
При срабатывании реле на лицевой панели загорается красный светодиод AВ. ОТКЛ. Красный
светодиод горит всегда при разомкнутом состоянии контактов 5-6(2-3).
Три зеленых светодиода на лицевой панели сигнализируют наличие напряжения на каждой фазе
соответственно: при обрыве одной из фаз соответствующий светодиод гаснет (при этом также
загорится красный светодиод, реле сработает по обрыву фазы).
Реле имеет одну совмещенную регулируемую уставку срабатывания по максимально-
му/минимальному напряжению. Например: в положении 10% реле будет срабатывать при
повышении/понижении напряжения на 10% от номинального.
Регулируемая уставка выставляется потребителем.


ВНИМАНИЕ! РЕКОМЕНДУЕТСЯ ВЫСТАВЛЯТЬ УСТАВКУ ДО ВКЛЮЧЕНИЯ В СЕТЬ ИЛИ ПРИ
ОТКЛЮЧЕННОМ МП.

При включении в сеть нагрузка включается с задержкой 5 (0, 10, 60, 100, 150, 200, 250 – под заказ) секунд.
Рекомендация: если при подключении оборудования фазировка (направление вращения фаз) не
проверялась, то с помощью РНПП-311 можно определить правильное вращение фаз.
Если прибор не включается (горит красный светодиод АВ.ОТКЛ, отсутствуют другие запрещающие
факторы: недопустимые колебания напряжения сети, нарушение амплитудной симметрии (перекос фаз),
слипание фаз, обрыв фаз), рекомендуется поменять порядок подключения фаз на входе схемы.
Помните, что первое включение прибора, при подаче на него питания, произойдет через
время АПВ, выставленное при заказе прибора.
Диапазон уставок срабатывания и их фиксированные значения могут быть изменены по
желанию заказчика.

 


ТЕХНИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ


Номинальное напряжение, В ——————————————————————— 380
Частота сети, Гц ————————————————————————————— 45 — 55
Диапазон регулирования:
-срабатывания по Umах/ Umin, % от ном. ————————————————— 5 — 25
Фиксированная задержка срабатывания по Umin, с ————————————— 12
Величина амплитудного перекоса фаз, В —————————————————- 60
Фиксированное время срабатывания по Umах, с —————————————— 1,5 (0,1– как опция)
Фиксированное время срабатывания при обрыве одной из фаз, с 1,5 (0,1– как опция)
Время автоматического повторного включения после восстановления
параметров U, с —————————————————————————————
(0, 10, 60, 100, 150, 200, 250 – под заказ)
5
Напряжение катушки пускателя, В, переменного —————————————— 110 – 380
Напряжение катушки пускателя, В, постоянного —————————————— 12 – 36

 

 

 

Защита от аварийных режимов, связанных с обрывом «нуля» (нулевых питающих проводов) в 3-фазной распределенной сети 220/380 В.

Обрыв нуля, т. е. отключение нулевого проводника на вводном щите в дом от глухозаземленной нейтрали трансформаторной подстанции, может произойти: в случае его отгорания при сильной перегрузке по фазам, при коротких замыканиях, при плохом контакте в месте подключения проводника; при его обрыве в результате действия стихии (ветер, упавшее дерево), при краже нулевого проводника, при старой электропроводке, из-за ошибки обслуживающего персонала или злого умысла, пр.

Если такое произойдет в симметричной 3-фазной сети, то на нагрузке это никак не отразится. Примером этого может служить асинхронный трехфазный электродвигатель, для работы которого, ноль, в общем случае, не требуется. Это объясняется тем, что обмотка трехфазного двигателя симметричная и каждая фаза нагружена одинаково.

Но в однофазных распределенных сетях нагрузки по фазам практически никогда не совпадают. Разные нагрузки по фазам, приводят к перекосу фазных напряжений. Причем, чем больше отличаются нагрузки по фазам, тем больше перекос. Для выравнивания фазных напряжений, необходимо заземлять нулевой провод. В этом случае возникает уравнительный ток, который приводит к принудительному выравниванию фазных потенциалов относительно нуля.

В таких сетях, в случае обрыва нуля, в общей точке 3-фазной сети формируется суммарный потенциал, определяемый сопротивлением нагрузки каждой из фаз. Имеет место сильный перекос фаз, вызванный «смещением нуля». В этом случае, к одним потребителям , запитанным, например, от фазы С, будет приложено фазное напряжение значительно меньшее чем 220 В, а к другим, запитанным от фазы А и В – значительно большее чем 220 В. Линейное же напряжение, при этом, останется неизменным. Самая критическая ситуация может наступить тогда, когда одна из фаз может оказаться не нагруженнной вовсе (не включен ни один потребитель). Тогда на этой фазе может формироваться напряжение близкое по своему значению к линейному, т. е. 380 В, а на самой нагруженной фазе, напряжение будет близким к нулю. Если, в случае приложенного высокого напряжения, в одной из фаз случится короткое замыкание, ко всем потребителям других фаз может быть приложено линейное напряжение 380 В.

Для защиты от последствий обрыва нуля, рекомендуем использовать микропроцессорные релейные устройства компании Новатек-Электро. Для 1-фазной сети можно использовать реле напряжения РН-101, РН-116, РН-117, РН-111М, РН-113, РН-102, РН-104, РН-106, РН-118, РН-119 : они сработают по уставкам минимального или максимального напряжения. В 3-фазной сети можно использовать реле напряжения РНПП-311, РНПП-311М, РНПП-301, РНПП-302, РНПП-312 которые сработают по уставкам перекоса фаз.

Реле контроля фаз: устройство и подключение | СамЭлектрик.ру

В этой статье посмотрим, какие бывают модели реле контроля фаз, как они устроены, и как подключаются. Все фото в статье сделаны Автором. Все реле я «щупал» — либо подключал, либо менял, либо ремонтировал, либо настраивал.

Первая часть статьи, теоретическая, опубликована на Дзене пару дней назад.

Zamel CKM-01

Пойдём от простого к сложному. В качестве примера рассмотрим сначала реле СКМ-01 производства польской фирмы Zamel.

CKM-01 от Zamel. Краткие характеристики на упаковке

CKM-01 от Zamel. Краткие характеристики на упаковке

У реле на вход подаётся три фазы (L1, L2, L3) и ноль (N), питание внутренней схемы – от фазы L1. Выходное реле — с одним переключающим контактом. Также имеются два индикатора, которые показывают чередование и асимметрию фаз.

Вот как это реле выглядит вживую:

Реле контроля фаз Замель CKM-01. Внешний вид

Реле контроля фаз Замель CKM-01. Внешний вид

Электрическая схема реле CKM-01 Zamel очень простая, собрана всего на двух транзисторах. Внутренности  CKM-01 Zamel можно рассмотреть ниже на фото.

Честно говоря, никогда бы не поверил, что такое сравнительно сложное устройство можно собрать всего на 2-х транзисторах!
Zamel CKM-01. Внутреннее устройство

Zamel CKM-01. Внутреннее устройство

Zamel CKM-01. Внутреннее устройство

Zamel CKM-01. Внутреннее устройство

Инструкцию от производителя можно будет скачать в конце статьи.

РНПП-311

Теперь рассмотрим популярную отечественную модель – РНПП-311. Полное название – Реле напряжения, перекоса и последовательности фаз. Отсюда и аббревиатурное название. Подробнее – в инструкции в конце статьи.

Недавно появилось реле РНПП-311М, у него более современный и компактный корпус и больше настроек.

Реле напряжения, перекоса и последовательности фаз РНПП-311М

Далее, по степени увеличения функциональности.

OMRON K8AB

Более навороченная модель — OMRON K8AB:

Omron K8AB-PA. Внешний вид

Omron K8AB-PA. Внешний вид

Тут уже есть дополнительный регулятор времени срабатывания (реагирования). Также это реле реагирует не только на понижение, но и превышение напряжения на одной из фаз.

Схема собрана на микроконтроллере, как и все модели, которые рассмотрю ниже.

Временная диаграмма и схема, расположенная на боковой стенке этого реле:

Omron K8AB – временные диаграммы, настройка и схема

Omron K8AB – временные диаграммы, настройка и схема

В линейку реле Omron K8AB входят 4 модели, и они обеспечивают очень расширенные настройки, на любой вкус. Инструкция – там же.

Carlo Gavazzi DPC01

Ещё одно реле контроля напряжения, из тех, что мне попадались – Carlo Gavazzi DPC01. Оно участвует в схеме промышленного компрессора-холодильника, про который я писал в статье про применение Устройства Бесперебойного питания (ИПБ, UPS) или про то, как я спас молоко от прокисания.

Кстати, если Вам вообще интересно то, о чем я пишу, подписывайтесь на получение новых статей и вступайте в группу в ВК!
Реле контроля фаз Carlo Gavazzi DPC01

Реле контроля фаз Carlo Gavazzi DPC01

На входе – три фазы, на выходе – два реле, контакты которых в данном случае подключались в схему последовательно и рубили цепь питания схемы управления. Кроме четырех регуляторов настроек, под крышкой с сорванной пломбой – ещё переключатели режимов работы.

В той статье я не написал, что пытался запустить этот холодильник, исключив это реле из схемы. Но Carlo Gavazzi оказался прав – компрессор не хотел запускаться при таком плохом качестве напряжения.

Евроавтоматика ФиФ CKF-318-1

Устройство трехфазного реле контроля и наличия фаз белорусского производителя F&F приведена в этой статье на Дзене. Показано устройство и реальный пример подключения и установки в компрессоре.

Схема подключения реле контроля фаз

Если в оборудовании используются для подключении электродвигателей только частотные преобразователи, то реле контроля фаз не нужно — для частотника всё равно, в каком порядке на него приходят фазы, он всё равно выпрямляет переменное трехфазное напряжение и преобразует его в постоянное.

Однако, я рекомендую ставить такое реле в любой промышленной аппаратуре с двигателями стоимостью от 1000 долл с трехфазным питанием. Ведь само реле стоит чуть более 1500 руб (отечественные модели), а в случае проблем с питанием сразу даст об этом знать.

Итак, вот несколько схем подключения, которые рекомендуют производители. В принципе, отличий мало.

Схема подключения реле контроля трехфазного напряжения РНПП-311

Схема подключения реле контроля трехфазного напряжения РНПП-311

В любой схеме подключения на входы реле подается три фазы, и (если необходимо) нейтраль.

Также в любой схеме реле контроля фаз имеется встроенное реле (одно или два), которое выдает сигнал в аварийную цепь и/или на индикацию.

Схема подключения реле контроля напряжения от OMRON

Схема подключения реле контроля напряжения от OMRON

Схема подключения РКФ ФиФ

Схема подключения РКФ ФиФ

Схема подключения реле контроля напряжения от Carlo Gavazzi

Схема подключения реле контроля напряжения от Carlo Gavazzi

Последняя схема ценна и тем, что дано условное графическое обозначение реле контроля напряжения. И контакты реле показаны с задержкой включения, как и должно быть!

«Программное» реле контроля фаз

Справедливости ради стоит сказать, что в современном оборудовании на контроллерах реле контроля фаз как отдельный блок иногда не применяется, а реализовано непосредственно на контроллере.

Вот пример электрошкафа компрессора, в котором всё реализовано на контроллере:

Электрошкаф компрессора Новатек

Электрошкаф компрессора Новатек

Три фазы подаются прямо на входы контроллера, и далее идёт только программная обработка.

Расскажите в комментариях, часто ли приходится иметь дело с подобными реле, и где они у вас установлены?

Источник статьи

Некоторые мои статьи на Дзене про электродвигатели и пром.оборудование:

Если интересны темы канала, заходите также на мой сайт — https://samelectric.ru/ и в группу ВК — https://vk.com/samelectric

Не забываем подписываться и ставить лайки, впереди много интересного!

ООО «НОВАТЭК-ЭЛЕКТРО». МНОГОФУНКЦИОНАЛЬНОЕ ТРЕХФАЗНОЕ РЕЛЕ КОНТРОЛЯ НАПРЯЖЕНИЯ РНПП-311М. РУКОВОДСТВО ПО ЭКСПЛУАТАЦИИ

Приводы заслонок ABB i-bus EIB JA / S 2.230.1, JA / S 4.230.1, JA / S 8.230.1, JA / S 4.230.1M, JA / S 8.230.1M, JA / S 4.24.1

Руководство по продукции ABB i-bus EIB Shutter Actuators JA / S 2.230.1, JA / S 4.230.1, JA / S 8.230.1, JA / S 4.230.1M, JA / S 8.230.1M, JA / S 4.24.1 Интеллектуальные системы установки Содержание Страница 1 Введение ……. …………………………..

Дополнительная информация

Трехфазное реле контроля CM-PFE

Техническое описание Трехфазное контрольное реле CM-PFE CM-PFE — это трехфазное контрольное реле, которое контролирует фазовый параметр, последовательность фаз и обрыв фазы в трехфазной сети.2CDC 251005 S0012 Характеристики

Дополнительная информация

Трехступенчатый релейный модуль IO-RM3

Стр. 1 из 6 Трехступенчатый релейный модуль IO-RM3 Характеристики: Преимущества: Возможность выбора режима связи: двоичный, нагрев / охлаждение, поэтапное или последовательное включение / выключение / автоматическое соединение для упрощения ввода в эксплуатацию Монтаж на DIN-рейку Диагностика Светодиод

Дополнительная информация

Приводы ГЕРЦ-Тепловые

Приводы ГЕРЦ-Термал Лист данных 7708-7990, выпуск 1011 Размеры в мм 1 7710 00 1 7710 01 1 7711 18 1 7710 80 1 7710 81 1 7711 80 1 7711 81 1 7990 00 1 7980 00 1 7708 11 1 7708 10 1 7708 23 1 7709 01

Дополнительная информация

SKR — промышленное реле

SKR — промышленное реле универсальное реле SKR модуль времени STM розетка Сильные стороны промышленных реле SKR заключаются в продуманной и продуманной конструкции.Безопасность и срок службы контактов выше среднего,

Дополнительная информация

ACS-30-EU-EMDR-10-MOD

Многофункциональный обогреватель Управление и мониторинг в коммерческих и жилых зданиях Модуль датчика защиты от обледенения крыш и водостоков Техническая информация Сертификаты Модуль Класс защиты IP Рабочая температура окружающей среды

Дополнительная информация

Быстрый старт: Energy Switch EU

Технические характеристики Нормальное рабочее напряжение Быстрый запуск: Energy Switch EU 230 В перем. Тока / 50 Гц Рекомендуемая макс.нагрузка 3000 Вт 600 Вт Диапазон частот Диапазон беспроводной связи Измерение энергии 868,42 МГц 30 ~ 100 метров в

Дополнительная информация

Описание продукта и функции

Описание продукта и функциональное описание Шлюз KNX / DALI N 141/02 представляет собой устройство KNX шириной 4 MU, установленное на DIN-рейку, с одним интерфейсом DALI, к которому можно подключить до 64 приводов DALI (например, балласты DALI)

Дополнительная информация

Датчик влажности в воздуховоде

Особенности датчика влажности для воздуховодов SDC-H Сменный чувствительный элемент Измерение влажности для воздуховодов Память минимальных и максимальных значений 0 0 В, 0 0 мА или 0 В, 4 0 мА измерительные сигналы, выбираемые с помощью перемычек

Дополнительная информация

Измеритель мощности серии 700

Блоки контроля мощности PowerLogic Power Meter Series 700 Технический паспорт 2007 Функции и характеристики E

PowerLogic Power Meter Series 700 предлагает все необходимые измерительные возможности

Дополнительная информация

Реле безопасности ESM / ESM-F

Реле безопасности ESM / ESM-F Больше, чем просто безопасность.Безопасность Больше, чем безопасность. Эмиль Юхнер, основатель компании и изобретатель многопозиционного концевого выключателя, около 1928 года. Швабские специалисты по всему миру в

Дополнительная информация

Логический модуль ABB i-bus EIB LM / S 1.1

Руководство по продукту ABB i-bus EIB Logic Module LM / S 1.1 Интеллектуальная система установки Содержание стр. 1 Общие сведения … 3 1.1 Об этом руководстве … 3 1.2 Обзор продукта и функций … 3 2 Технология устройства…

Дополнительная информация

Реле контроля скорости SX2

SX2 Файл 850 Описание CONENS ……………………………………… …….. Страница Общая информация ………………………………… ……… 2-3 Общая информация о SX2DV …………………………….. ……..

Дополнительная информация

* .ppt 02.11.2009 12:48 1

Цифровой контроллер компрессора *.ppt 11/2/2009 12:48 PM 1 Цифровой контроллер Copeland Scroll Простой контроллер, который позволяет производителям оборудования использовать цифровые прокрутки, освобождает OEM от разработки специальных контроллеров

Дополнительная информация

Приложение NC-12 Modbus

NC-12 Modbus Application NC-12 1 Содержание 1 Содержание … 2 2 Глоссарий … 3 SCADA … 3 3 NC-12 Modbus в целом … 3 4 Система в целом … 4 4.1 Варианты подключения PFC к ПК…4 4.1.1

Дополнительная информация

Многофункциональные устройства

устройства устройства устройства электронные Тип Страница Многофункциональные светодиодные индикаторы импульсов, частоты, времени (DC) Codix 524 240 импульсов, частоты, времени (AC + DC) Codix 544 243 Многофункциональные ЖК-индикаторы предустановленных счетчиков 1 или 2

Дополнительная информация

Руководство по эксплуатации серии UWAPS-TINY

Руководство по эксплуатации UWAPS-TINY Series Powecon Oy WWW.POWECON.FI 1/9 Содержание 1 Гарантия … 3 2 Информация о безопасности … 3 3 Сокращения и терминология … 3 4 Список приложений … 4 5 Введение … 4

Дополнительная информация

Миниатюрные промышленные реле RY2

6 RY2 Реле общего назначения Для вставных розеток, монтаж на рейку 35 мм в соотв. согласно PN-EN 60715 или на панели Плоские вставные соединители — faston x 0,5 мм Признания, сертификаты, директивы: RoHS,

Дополнительная информация

Принадлежности серии Vario

Принадлежности и запасные части для аналоговых панельных измерителей и контроллеров GMW Трансформаторы тока стр. 2-9 Шунтирующие резисторы 10-11 Делители напряжения 12 Источник питания для индикаторов / контроллеров 13 Заглушки

Дополнительная информация

Контроллеры обнаружения воды WD-AMX

Страница 1 из 5 Контроллеры обнаружения воды WD-AMX Характеристики: Преимущество: Светодиод Состояние утечки Выход VFC Звуковой сигнал Выход аварийного сигнала с автоматическим или ручным сбросом Использует изолированный сигнал переменного тока, предотвращающий окисление

Дополнительная информация

Реле измерения тока и напряжения

Реле измерения тока и напряжения RXIK 1, RXEEB 1 и Страница 1 Выпущено в июне 1999 г. Изменено с июля 1998 г. Данные могут быть изменены без предварительного уведомления RXIK 1 RXEEB 1 (SE980082) (SE980081) (SE970869) Функции Применение

Дополнительная информация

Программирование логических контроллеров

Программирование логических контроллеров Программируемый логический контроллер (ПЛК) — это система на основе микропроцессора, которая использует программируемую память для хранения инструкций и реализации таких функций, как логика, последовательность,

Дополнительная информация

9 цепей для правильного подключения реле напряжения

Реле контроля напряжения на фазах позволяет мгновенно отключить электричество после счетчика при возникновении аварийной ситуации — скачке напряжения в сети.Это устройство используется как в однофазной, так и в трехфазной сети электроснабжения для защиты потребителей от выхода из строя. Далее мы рассмотрим типовые схемы подключения реле напряжения в квартирном щитке.

Итак, простейшая схема разводки от вводного выключателя в квартире до реле контроля напряжения следующая:

В данном случае однофазная (220 В) сеть и нагрузка не более 7 кВт, поэтому, кроме того, нет необходимости подключать магнитный пускатель или контактор к dynrail.При нагрузке более 7 кВт рекомендуется производить подключение через пускатель, как показано на второй схеме подключения реле РН-113:

Сразу обращаем ваше внимание на то, что помимо устройства для для защиты сети от перенапряжения в распределительном щите должно быть УЗО или диф. Для защиты жителей дома от токов утечки, которые могут стать причиной поражения человека электрическим током. Принципиальная схема подключения реле напряжения и УЗО (или дифа-автомата) выглядит так:

При наличии в частном доме трехфазной сети 380 В можно подключить защитное устройство по одной из двух схем. :

Первый рекомендуется, если в доме нет трехфазных потребителей — мощная электроплита или бойлер на 380 В.При использовании трехфазных электродвигателей необходимо защитить их соответствующим реле напряжения, например, РНПП-311 или РКН 3-14-08, схемы которых мы предоставляем:

Дополнительно рекомендуем ознакомиться сами с видеоуроками, в которых наглядно объясняется весь процесс установки:

Правильное подключение устройства к сети

. Использование кросс-модуля

Как видите, обе версии дополнительно имеют магнитный пускатель, позволяющий коммутировать большие нагрузки (более 7 кВт).Кроме того, пускатель позволяет дистанционно управлять защитой, что делает данную схему подключения реле напряжения очень удобной!

Структура рибонуклеопротеидных комплексов вируса гриппа и их упаковка в вирионы

Rev Med Virol. Авторская рукопись; доступно в PMC 2018 3 июля.

Опубликован в окончательной отредактированной форме как:

PMCID: PMC6029254

NIHMSID: NIHMS

5

Takeshi Noda

1 Отделение особых патогенов, Международный исследовательский центр инфекционных заболеваний, Институт медицинских наук, Токийский университет, Токио 108-8639, Япония

Йошихиро Каваока

1 Отдел специальных патогенов, Международный исследовательский центр инфекционных заболеваний, Институт медицинских наук, Токийский университет, Токио 108-8639, Япония

2 Отдел вирусологии, Отдел микробиологии и иммунологии, Институт медицинских наук, Токийский университет, Токио 108-8639, Япония

3 ERATO Проект ответов хозяев, вызванных инфекциями, Японское агентство науки и технологий, Сайтама 332-0012, Япония

4 Департамент патобиологических наук, Университет Висконсин-Мэдисон, Мэдисон, Висконсин 53711, США

1 Отдел специальных патогенов, Международный исследовательский центр инфекционных заболеваний, Институт медицинских наук, Токийский университет, Токио 108-8639, Япония

2 Отдел вирусологии, Отдел микробиологии и иммунологии, Институт медицинских наук, Токийский университет, Токио 108-8639, Япония

3 ERATO Проект ответов хозяев, вызванных инфекциями, Японское агентство науки и технологий, Сайтама 332-0012, Япония

4 Департамент патобиологических наук, Университет Висконсин-Мэдисон, Мэдисон, Висконсин 53711, США

* Автор, ответственный за переписку : Y.Каваока, Отдел специальных патогенов, Международный исследовательский центр инфекционных заболеваний, Институт медицинских наук, Токийский университет, Токио, Япония. [email protected]Финальная отредактированная версия этой статьи издателем доступна на Rev Med Virol. См. другие статьи в PMC, в которых цитируется опубликованная статья.

Резюме

Геном вируса гриппа A состоит из восьми сегментированных одноцепочечных РНК с отрицательным смыслом. Каждый сегмент вирусной РНК (вРНК) образует рибонуклеопротеидный комплекс (РНП) вместе с нуклеопротеинами и полимеразным комплексом, который является фундаментальной единицей для транскрипции и репликации вирусного генома.Хотя точная структура интактной RNP остается плохо изученной, недавние электронно-микроскопические исследования выявили определенные структурные характеристики RNP. В этом обзоре основное внимание уделяется результатам различных электронно-микроскопических анализов РНП, выделенных из вирионов, и РНП внутри вирионов. Основываясь на морфологических и структурных наблюдениях, мы представляем архитектуру РНП в вирионе и обсуждаем механизм упаковки генома, с помощью которого сегменты вРНК включаются в вирионы.

Ключевые слова: вирус гриппа , рибонуклеопротеиновый комплекс, электронная микроскопия

Введение

Вирусы гриппа A, B и C являются членами Orthomyxoviridae , которое представляет собой семейство оболочечных вирусов с сегментированными одноцепочечными отрицательными -смысловые геномы РНК (1). Они классифицируются по антигенным различиям в их нуклеопротеинах (NP) и матриксном белке (M1), которые присутствуют в вирионах. Вирусы гриппа A далее классифицируются на 16 подтипов гемагглютинина (HA) (h2 – h26) и 9 подтипов нейраминидазы (N1 – N9) на основе антигенности их HA и NA (2).Все подтипы можно найти в естественных резервуарах диких водных птиц, но они также могут инфицировать такие виды млекопитающих, как люди, свиньи и лошади. Вирусы гриппа A вызывают ежегодные эпидемии среди людей и случайные пандемии, которые распространяются в глобальном масштабе с серьезными последствиями для здоровья человека. Вирусы гриппа B естественным образом инфицируют людей, а иногда и тюленей, и вызывают более ограниченные эпидемии, чем вирусы гриппа A, у людей каждые несколько лет (3). Вирусы гриппа C поражают людей и свиней (4).Сероэпидемиологические исследования позволяют предположить, что вирус гриппа С распространен во всем мире, хотя клинически благоприятен для людей (5).

Вирионы гриппа A обладают липидной оболочкой, которая приобретается из апикальной плазматической мембраны инфицированных клеток во время процесса почкования. Вирионы, высвобождаемые из инфицированных клеток, обычно имеют сферическую форму, приблизительно от 80 до 120 нм в диаметре (). С другой стороны, почкующиеся вирионы на поверхности инфицированных клеток представлены в основном удлиненными частицами, а иногда и нитевидными частицами одинакового диаметра.Эти вирионы покрыты выступами, называемыми шипами. В оболочку вставлено большое количество двух гликопротеинов, НА и NA, а также небольшое количество белка ионного канала (M2). Два гликопротеина образуют шипы на вирусной поверхности. Шипы HA имеют форму стержня, а шипы NA имеют форму гриба с коробчатой ​​головкой, которая соединяется с липидной мембраной ножкой. M1, белок периферической мембраны, является одним из наиболее распространенных вирусных белков вириона. Он связывается с липидной оболочкой и, как полагают, образует слой под ней, чтобы поддерживать сферическую или нитевидную структуру вириона.Вирусный геном заключен в оболочку, в основном состоящую из слоя белка M1, шипов НА и NA и липидной оболочки.

Очищенные вирионы гриппа, визуализированные с помощью электронной микроскопии с отрицательным окрашиванием. Сферические вирионы диаметром около 120 нм покрыты шипами, состоящими из HA и NA. Бар; 100 нм.

Геномы вирусов гриппа A и B состоят из восьми одноцепочечных сегментов РНК с отрицательным смыслом, а геномы вируса гриппа C состоят из семи сегментов РНК.Каждый сегмент вирусной РНК (вРНК) образует комплекс рибонуклеопротеидов (РНП), который создает скрученную стержнеобразную структуру, которая загибается назад и наматывается на себя (6–10). РНП, но не только геномная РНК, транскрипционно активны. В комплексах РНП вРНК связана с NP и комплексом гетеротримерной РНК-зависимой РНК-полимеразы, который состоит из основного белка полимеразы 1 (PB1), основного белка полимеразы 2 (PB2) и белка кислой полимеразы (PA). PB1 образует ядро ​​структуры комплекса гетеротримерной РНК-полимеразы.N-концевой участок PB1 связывается с C-концевым участком PA, а C-концевой участок PB1 связывается с N-концевым участком PB2 (11,12).

В отличие от большинства вирусов с отрицательной РНК, транскрипция и репликация генома вируса гриппа происходит в ядре инфицированных клеток. После синтеза геномных РНК и вирусных белков, РНП синтезируются в ядре и экспортируются в цитоплазму через два вирусных белка, M1 (13,14) и ядерный экспортный белок (NEP / NS2) (15-17), через клеточные клетки. белок-зависимый путь поддержания 1 области хромосомы (Crm1) (18–23).РНП внутриклеточно транспортируются к участку почкования (то есть к липидным рафтам на апикальной плазматической мембране поляризованных клеток (24,25), в то время как трансмембранные белки HA, NA и M2 переносятся на поверхность клетки стандартным экзоцитарным путем. Предполагается, что RNP взаимодействуют с белками M1 и / или цитоплазматическими хвостами HA, NA и M2 на плазматической мембране, чтобы упаковывать их в вирусные частицы (26, 27). Наконец, все вирусные компоненты собираются в вирионы потомства, приводящие к отпочкованию апикальной плазматической мембраны путем деления мембраны.

RNP является основной единицей для синтеза вРНК и, таким образом, играет важную роль в жизненном цикле вируса. Хотя подробная структура интактной RNP все еще отсутствует, недавний электронно-микроскопический анализ выявил важные структурные характеристики RNP. Здесь мы будем использовать результаты этих различных электронно-микроскопических анализов, чтобы описать архитектуру RNPs внутри вирионов, а также структуру RNPs, выделенных из вирионов. Мы также обсуждаем механизм, с помощью которого сегменты вРНК упаковываются в вирионы с морфологической точки зрения.

Структура очищенных РНП из вирионов

Восемь сегментов вРНК генома вируса гриппа А имеют размер от 890 до 2341 основание. Все восемь сегментов содержат консервативные последовательности на 3 ’и 5’ концах, которые частично комплементарны друг другу (28–30). Комплементарный конец является коровым промотором, который важен для регуляции синтеза вРНК; он образует пары оснований, необходимые для образования структуры штопора (31,32). Гетеротримерная РНК-полимераза связана с дополнительным концом на 3 ’и 5’ концах вРНК (33).Каждый сегмент вРНК по отдельности инкапсидируется множеством копий молекул NP, образующих скрученную стержнеобразную структуру. Каждая молекула NP связана с 20-25 нуклеотидами вРНК (6,8,34) через свой фосфатно-сахарный остов (35). ВРНК в форме РНП является чувствительной к РНКазе (35,36) и может быть заменена отрицательно заряженным поливинилсульфатом (37), что позволяет предположить, что нуклеотидные основания вРНК выставлены снаружи РНП и что между ними существуют зарядовые взаимодействия. молекулы NP и фосфатный остов вРНК.Это согласуется с недавними данными о кристаллической структуре NP, которые показывают, что возможный сайт связывания РНК состоит из многих основных остатков и расположен снаружи олигомеров NP (38,39). NP имеет два сайта для взаимодействия NP-NP и обладает внутренней способностью образовывать RNP-подобные структуры даже в отсутствие вирусной РНК (10), что указывает на то, что NP является основным детерминантом стержнеобразной структуры RNP и вРНК обернута вокруг каркаса NP. Иммуноэлектронная микроскопия изолированных РНП показывает, что одна копия или небольшое количество гетеротримерных РНК-полимераз располагается на конце каждой палочковидной РНП или очень близко к нему (40).Взятые вместе, РНК-полимераза, вероятно, расположена на конце палочкообразной РНП, где она связана с комплементарным концом вРНК.

Мономер NP, наблюдаемый с помощью электронной микроскопии с отрицательным окрашиванием, образует небольшие стержни длиной примерно 6,2 нм и шириной 3,5 нм (10). Отрицательно окрашенные РНП, выделенные из вирионов, демонстрируют скрученные стержневидные структуры, и каждый РНП, по-видимому, состоит из одной цепи мономеров NP, которая загибается сама на себя, образуя петлю на одном конце, и наматывается на себя, образуя двухцепочечный расположение кроме петли (6, 8, 37).Учитывая, что комплекс РНК-полимеразы связан с комплементарным концом вРНК, которая существует в виде двухцепочечной РНК (33), полимеразный комплекс будет располагаться на противоположной стороне одноцепочечной петли в РНП, хотя полимеразный комплекс не обнаруживается напрямую с помощью электронной микроскопии с отрицательным окрашиванием. Диаметр одиночной нити, видимой в петле на конце RNP, составляет приблизительно 7,5 нм (37), что близко к размеру мономера NP (10). RNP имеют большие канавки с периодичностью примерно 15 нм и малые канавки с периодичностью примерно 7.5 нм в их среднем сечении (6,41), подтверждая идею о том, что RNP представляет собой одну нить сополимера NP, свернутую назад и намотанную на себя (). Однако количество мономеров NP на виток спирали все еще остается неопределенным. Ее можно решить с помощью трехмерного структурного анализа интактных RNP с помощью электронной томографии, но такой анализ еще не проводился.

Принципиальная схема извлеченного RNP. RNP состоит из нити мономеров NP, загнутых на себя, образуя петлю на конце, и намотанной на себя, образуя двухцепочечное спиральное тело, за исключением петли.Мономеры NP и вРНК изображены в виде серых сфер и синей ленты, соответственно. Полимеразный комплекс изображен желтой рамкой, красным конусом и зеленым стержнем.

РНП, экстрагированные из вирионов обработкой эфиром или детергентом, разделяются на классы разного размера по скорости осаждения в градиентах глицерина. Изолированные RNP, которые обладают скрученными стержнеобразными структурами, имеют диаметр около 13 нм, но изменяются по длине от примерно 30 до 110 нм (6,37). Они в целом классифицируются на три класса размеров, в которых большие RNP имеют пик длина от 90 до 110 нм, промежуточная — от 60 до 90 нм и малая — от 30 до 50 нм (6).Длина RNP коррелирует с длиной каждого сегмента вРНК (6), предполагая, что большие RNP будут содержать большие сегменты вРНК, такие как PB2, PB1 и PA, промежуточные RNP будут содержать промежуточные сегменты вРНК, такие как HA, NP, и NA, а маленькие RNP будут содержать небольшие сегменты vRNA, такие как M и NS.

Хотя общая морфология изолированного RNP была хорошо охарактеризована при низком разрешении с помощью электронной микроскопии с отрицательным окрашиванием, как описано выше, гибкость и гетерогенность структур RNP препятствовали проведению структурного анализа с высоким разрешением с помощью электронной микроскопии и обработки изображений на основе усреднения. много одинаковых структур.Чтобы получить образцы с достаточной структурной жесткостью для структурного анализа, рекомбинантные RNPs искусственно генерируются из NP, трех субъединиц полимеразы и короткого vRNA-подобного генома (34,42–45). Электронная микроскопия с отрицательным окрашиванием рекомбинантных РНП показывает круговые или эллиптические структуры, в зависимости от длины модельного генома, подобного вРНК. Каждый мономер NP связан примерно с 24 нуклеотидами в рекомбинантных RNP (34), что согласуется с предыдущими сообщениями о NP в аутентичных RNP (6,8).Рекомбинантный РНП с вРНК-подобным геномом из 248 нуклеотидов, который дает гомогенную структуру и дает хорошее среднее изображение, имеет круглую форму и содержит девять мономеров НП, два из которых связаны с комплексом РНК-полимеразы (42). Каждый мономер NP имеет структуру кривизны и состоит из двух доменов, верхнего головного домена и центрированного тела (42,44). Мономеры NP плотно соединены друг с другом внизу, что может свидетельствовать о наличии модельной вРНК, связанной с мономерами NP (42).

Комплекс гетеротримерной РНК-полимеразы в рекомбинантных РНП показывает очень компактную структуру без видимых границ между субъединицами PB1, PB2 и PA (43). Положения PB1, PB2 и PA в гетеротримерном комплексе определяют на основе комплексов RNP-моноклональное антитело или меченых RNP, которые показывают, что N-концевой участок PB2 и C-концевой участок PA расположены напротив полимеразы-NP. стороны взаимодействия и что C-концевой участок PB1 расположен на стороне взаимодействия полимераза-NP (43,44).В трехмерной модели RNP полимеразный комплекс связан со средней частью двух мономеров NP через PB1 и PB2 (42,44), что согласуется с биохимическими данными, указывающими на то, что NP взаимодействует как с PB1, так и с PB2 (46– 48). С другой стороны, трехмерная модель, воссозданная из растворимого гетеротримерного комплекса РНК-полимеразы, демонстрирует более открытую конформацию, хотя есть сходства в общих структурных особенностях между растворимой формой и формой, связанной с РНП (45).Конформационные различия более очевидны в области, участвующей во взаимодействиях между мономерами NP в рекомбинантных RNP (42), и существенное смещение PB2, по-видимому, происходит в результате образования RNP, что позволяет предположить, что взаимодействие полимеразного комплекса с NP или РНК будет запускать конформационные изменения для активации различных функций (42). Дальнейшие структурные исследования необходимы для понимания конформационных изменений полимеразного комплекса во время образования комплекса РНП, а также во время транскрипции и репликации сегментов вРНК.

Структура РНП внутри вирионов

Конформация РНП внутри вирионов была источником значительных разногласий. При исследовании методом отрицательного окрашивания непрерывная нить диаметром 7–8 нм располагается в виде спирали внутри разрушенных вирионов (49–54). Спирали значительно различаются от вириона к вириону по количеству витков и общему диаметру (49,50,52,55). Поскольку непрерывная цепь была единственной структурой, наблюдаемой в вирионах при отрицательном окрашивании, считалось, что она представляет собой естественную организацию вирусной РНП.Таким образом, было высказано предположение, что вирусная RNP существует в виде единой непрерывной спирали внутри вирионов и что непрерывная спираль будет фрагментирована на несколько RNP в процессе очистки (51,52). Однако трудно морфологически согласовать единую непрерывную спираль со скрученными стержневидными структурами, наблюдаемыми при экстракции RNP из вирионов. Кроме того, нет никаких доказательств того, что непрерывные спирали на самом деле состоят из молекул НЧ. Позже Ruigrok et al (1989) с помощью электронной микроскопии с отрицательным окрашиванием обнаружили, что большое количество непрерывных спиралей внутри вирионов состоит из одних и тех же единиц, которые имеют размер 4 на 4 нм (56).Они также продемонстрировали, что изолированный белок M1 образует регулярные нити на липосомах, когда он повторно ассоциируется с липидами in vitro . Поскольку вирус гриппа имеет два основных внутренних белка, NP и M1, а мономер NP имеет размеры 6,2 на 3,5 нм (10), они пришли к выводу, что блок 4 × 4 нм представляет собой молекулу M1. Таким образом, непрерывные спирали диаметром 7-8 нм, видимые в отрицательно окрашенных разрушенных вирионах, вероятно, представляют собой пары нитей M1, представляющие слой белков M1 под липидной оболочкой (56).Возможно, что аналогичные непрерывные спирали, наблюдаемые в очищенных вирионах с помощью криоэлектронной микроскопии, также представляют собой слой молекул M1 (57,58).

Внутренняя структура очищенных вирионов, наблюдаемая с помощью электронной микроскопии с отрицательным окрашиванием. (а) В разрушенном вирионе наблюдается непрерывная спираль диаметром примерно 8 нм. (б) Неправильно сжатые стержневидные структуры диаметром около 12 нм. Видны две стержневидные структуры, выступающие из вириона. Эти электронные микрофотографии воспроизведены с разрешения авторов, опубликованных в Schulze (1972) (54).Бары; 100 нм.

Одно из объяснений трудности выяснения внутренней структуры вирионов гриппа с помощью электронной микроскопии с отрицательным окрашиванием может быть связано с плохим проникновением красителей. Чтобы наблюдать РНП внутри вирионов с помощью электронной микроскопии с отрицательным окрашиванием, очищенные вирионы кратковременно обрабатывали трипсином для частичного удаления гликопротеинов с оболочки (54). Вирионы, обработанные трипсином, были инфекционными и обладали активностью НА, но были лишены нейраминидазной активности.Внутри этих обработанных трипсином вирионов наблюдались нерегулярно сжатые стержневидные структуры с диаметрами, подобными диаметрам RNP с промежуточными срезами, выделенными из вирионов (54). Кроме того, скрученные стержневидные структуры, которые были морфологически идентичны очищенным РНП, «высыпались» из некоторых обработанных трипсином вирионов () (54). Такие скрученные стержневидные структуры также выступали из вирионов, разрушенных сублимационной сушкой, и вступали в реакцию с моноклональными антителами против NP (59), предполагая, что РНП существуют внутри вирионов как фрагментированные стержневидные структуры.Тонкая электронная микроскопия очищенных вирионов также подтверждает это мнение. Электронная микроскопия очищенных вирионов с помощью тонкого среза показала внутри вирионов несколько сжатых стержневидных структур диаметром 10–13 нм (54), которые были морфологически сходны как с очищенными РНП, так и с РНП, обнаруженными в обработанных трипсином вирионах при отрицательном окрашивании. электронная микроскопия (54). Хорошее соответствие между изображениями, полученными при отрицательном окрашивании очищенных вирионов, и изображениями, полученными при тонком срезе гранулированных вирионов, предполагает, что РНП присутствуют в виде отдельных стержневидных структур внутри интактных вирионов.

Расположение RNP внутри вириона

Остается неясным, как фрагментированные RNP организованы внутри вирионов. Как только эта проблема будет решена, мы, наконец, сможем выяснить механизм упаковки генома, с помощью которого сегменты вРНК включаются в каждый вирион. В ранних предложениях было предсказано, что сегменты vRNA связаны с одной основной цепью для совместной упаковки сегментированных vRNAs (37,50-52). Однако, поскольку эта идея основана на электронно-микроскопических наблюдениях за единственной непрерывной спиралью, наблюдаемой в отрицательно окрашенных разрушенных вирионах (), которая, как было показано, представляет слой молекул M1 (56), это маловероятный сценарий.Информация об организации фрагментированных палочкообразных RNP внутри вирионов ограничена. Таким образом, остается много вопросов относительно механизмов упаковки фрагментированных RNP: сколько RNP включено в каждый вирион? Как устроены RNP в каждом вирионе? Взаимодействуют ли RNP друг с другом внутри вирионов? Существуют ли какие-либо конкретные механизмы для привлечения полного компонента из восьми RNP в вирион? Чтобы ответить на эти вопросы, необходимо детально раскрыть организацию RNP внутри вирионов.

Мы продемонстрировали с помощью электронной микроскопии тонких срезов, что удлиненные вирионы, выходящие из плазматической мембраны инфицированных клеток, содержат внутри отчетливое расположение RNPs (59). Когда удлиненные почкующиеся вирионы были разрезаны в продольном направлении, почти все они содержали палочковидные РНП, которые всегда были подвешены изнутри вирусной оболочки на дистальном конце удлиненных вирионов и были ориентированы перпендикулярно отрастающему кончику. Они были около 12 нм в ширину и до 130 нм в длину, что соответствовало размеру очищенных РНП (6, 37).RNPs подобным образом наблюдались не только в отпочкованных вирионах, но также и вирионах в ходе отпочкования (59), предполагая, что включение фрагментированных RNPs координируется с ростом почки. В поперечно разрезанных почкующихся вирионах наблюдались электронно-плотные точки диаметром около 12 нм, подтвержденные как РНП с помощью иммуноэлектронной микроскопии с моноклональными антителами против нуклеопротеидов (59). Эти точки представляют собой поперечные сечения стержневидных RNP и видны внутри каждого почкующегося вириона. Интересно, что мы обнаружили, что многие из поперечно разделенных почкующихся вирионов содержат регулярное расположение из восьми RNPs, в которых центральный RNP окружен семью другими [(7 + 1) конфигурация] ().В нашем исследовании в вирионе наблюдали не более восьми РНП. Примечательно, что серийные поперечные срезы целых почкующихся вирионов показали, что все почкующиеся вирионы содержат максимум восемь RNP, но различаются по длине. Поскольку длина РНП коррелирует с длиной каждого сегмента вРНК (6), эти результаты предполагают, что каждый вирион содержит высокоорганизованный набор из восьми РНП, состоящих из различных видов сегментов вРНК. Конфигурация (7 + 1) восьми RNP также наблюдалась в огромных нитчатых вирионах, а также в различных вирусах, выделенных от людей, свиней и птиц (59).Некоторые поперечно разрезанные нитчатые вирионы показали типичную конфигурацию восьми RNP, хотя большинство из них были пустыми. На продольных срезах RNP были ограничены дистальным концом каждого нитчатого вириона, а оставшаяся часть нитевидного вириона была пустой (), что согласуется с очевидным отсутствием внутренних компонентов в большинстве нитчатых вирионов, разделенных на поперечные срезы (59). Таким образом, вполне вероятно, что огромные нитчатые вирионы также включают набор из восьми RNP. Эти результаты предполагают, что все отпочковывающиеся вирионы, независимо от формы вириона, включают организованный набор из восьми фрагментированных RNP, которые связаны с внутренней оболочкой на дистальном конце вириона.

Внутреннее строение почкующихся вирионов, выявленное методом электронной микроскопии тонких срезов. Поперечно разрезанные почкующиеся вирионы показывают хорошо организованное расположение восьми RNP внутри вирионов. Некоторые вирионы содержат менее восьми RNP, потому что RNP различаются по длине. Таким образом, количество RNP, обнаруживаемых в вирионах, варьируется в зависимости от того, где вирионы отростки разделены поперечно. Бар; 100 нм.

Продольный разрез нитевидных вирионов, отрастающих от поверхности клетки.Палочковидные RNP связаны с оболочкой на дистальном конце отпочковывающегося вириона. Обратите внимание, что РНП присутствуют только на дистальном конце вириона. Бар; 100 нм.

Напротив, изолированные вирионы, выпущенные в раствор окружающей среды и очищенные ультрацентрифугированием, показали несколько иную организацию RNP внутри вирионов. В более раннем сообщении внутренние структуры очищенных вирионов, которые имели однородную сферическую форму диаметром примерно 100 нм, были исследованы с помощью электронной микроскопии тонких срезов (54).Тонкие срезы гранул вириона показали широкий спектр структур организации сжатых палочкообразных РНП в большинстве очищенных вирионов, хотя некоторые вирионы демонстрировали (7 + 1) конфигурацию РНП. Теоретически, когда стержневые РНП перпендикулярны электронному пучку, в вирионах наблюдаются стержневидные структуры. С другой стороны, когда стержневые РНП параллельны электронному пучку, в вирионах наблюдаются круглые точки. Поскольку очищенные вирионы беспорядочно ориентированы относительно электронного пучка в таблетках, естественно, что только некоторые частицы демонстрируют конфигурацию (7 + 1) из восьми RNP.Кроме того, поскольку некоторые RNP (примерно от 30 до 120 нм в длину) больше, чем типичные сферические вирионы (примерно от 80 до 120 нм в диаметре, включая поверхностные шипы), возможно, что некоторые RNP сжаты, и их конфигурации во время бутонизации частично разрушаются внутри сферических вирионов. Следовательно, можно предположить, что сферические вирионы после очистки демонстрируют неупорядоченное расположение RNP, а также регулярное расположение восьми RNP (54), в то время как удлиненные почкующиеся вирионы на поверхности клетки демонстрируют конфигурацию (7 + 1) внутри вирионов, когда они имеют поперечное сечение (59).Взятые вместе, оказывается, что восемь фрагментированных RNPs сохраняют хорошо организованную конфигурацию, когда вирионы отпочковываются, но эта конфигурация становится частично искаженной или полностью разрушенной внутри сферических вирионов при отрыве от поверхности клетки.

Недавно Харрис и др. (2006) и Наяк и др. (2009) детально определили внутренние структуры очищенных вирионов с помощью криоэлектронной томографии (58,61). Хотя они также обнаружили конфигурацию (7 + 1) восьми RNP в очищенных вирионах, восемь RNP не были так хорошо выровнены в большинстве вирионов, и конфигурация (7 + 1) наблюдалась только на низкой частоте.Такое неупорядоченное расположение восьми RNP, а также ограниченное наблюдение конфигурации (7 + 1) предполагает, что очищенные вирионы были случайно ориентированы на электронный пучок и что некоторые RNP были сжаты в сферические вирионы, как описано выше. Nayal et al (2009) также отметили, что в их эксперименте очищенные вирионы были существенно плеоморфными, различались по размеру и форме, и что большинство вирионов содержали менее восьми RNP (61). Они пришли к выводу, что включение полного набора из восьми RNP не может происходить в каждом вирионе и что расположение фрагментированных RNP внутри вирионов может быть неоднородным от вириона к вириону.Эти расхождения между отпочковавшимися вирионами и очищенными вирионами могут возникать из-за различий в морфологии вирионов, которые сопровождают обработку образцов для очистки вирионов. Почкующиеся вирионы на плазматической мембране инфицированных клеток показывают относительно правильную структуру, такую ​​как удлиненные или огромные нитевидные частицы с одинаковым диаметром, и не являются плеоморфными (59, 60, 62). С другой стороны, очищенные вирионы демонстрируют не только типичные сферические структуры, но также плеоморфные структуры различных размеров, о которых никогда не сообщалось при тонком срезе или сканирующей электронной микроскопии отпочковавшихся вирионов на плазматической мембране.Поскольку в высвобожденных вирионах легко происходят морфологические изменения, даже если они хранятся в течение нескольких дней при 4 ° C во время процесса очистки (54), эти плеоморфные частицы, наблюдаемые только в очищенных образцах, могут быть артефактами, появившимися во время очистки. Эти плеоморфные частицы, следовательно, не могут отражать естественную структуру вирионов, поскольку расположение RNP в этих частицах может измениться.

Возможный механизм упаковки генома

К настоящему времени были предложены две модели для объяснения механизма, с помощью которого сегменты вРНК упаковываются в вирионы: модели случайной упаковки (63,64) и модели выборочной упаковки (65,66).Первая модель предполагает общий сигнал упаковки во всех сегментах вРНК, который различает вРНК и клеточные РНК, но не вРНК, что позволяет произвольно включать в вирионы любое количество и комбинацию вРНК. Модель избирательной упаковки предсказывает наличие специфических сигналов упаковки для каждого сегмента вРНК, которые различают не только вРНК и клеточные РНК, но также и отдельные вРНК, что приводит к включению полного набора из восьми сегментов вРНК в вирионы.Убедительных доказательств в поддержку любой модели не хватает, и возникают разногласия по поводу механизма упаковки генома. Недавно мы (67–72) и др. (73–80) с помощью обратной генетики обнаружили, что все восемь сегментов вРНК обладают специфичными для сегментов сигналами упаковки для эффективного включения в вирионы. Эти сигналы упаковки включают двудольные последовательности на 5 ’и 3’ концах вРНК, которые содержат не только консервативные промоторные последовательности, но также кодирующие и специфичные для сегментов некодирующие области, прилегающие к промоторной области.Эти данные вместе с электронно-микроскопическими наблюдениями внутренней части вириона гриппа подтверждают модель выборочной упаковки и опровергают модель случайной упаковки.

Конфигурация (7 + 1) восьми RNPs, наблюдаемая в вирионах, вероятно, требует специфических взаимодействий между vRNAs (RNPs) для стабильного сохранения конфигурации. Исследования обратной генетики показали, что мутации или делеции в сигнале упаковки сегмента вРНК снижают включение других сегментов вРНК в вирионы, предполагая, что включение восьми сегментов вРНК вряд ли будет независимым, но скорее скоординированным событием, включающим межсегментные взаимодействия ( 70,76,77,79,80).Однако остается неясным, существуют ли специфические взаимодействия между восемью RNP в вирионах. Физические контакты между восемью RNPs, наблюдаемые на томограммах поперечно разделенных почкующихся вирионов, предоставляют потенциальные морфологические доказательства, подтверждающие наличие взаимодействий между RNPs (54). Поскольку вРНК обернута вокруг каркаса NP (35–37), такие контакты могут представлять взаимодействия вРНК-вРНК посредством сигналов упаковки в соответствующих сегментах вРНК, которые необходимы для эффективного включения в вирионы (67–80).Хотя это предположительно, взаимодействия между RNP через сигналы упаковки могут способствовать привлечению полного набора из восьми RNP, а также конфигурации (7 + 1). Выяснение тонкой структуры RNPs внутри вирионов, а также трехмерного положения сигналов упаковки на RNPs может предоставить недостающие детали механизма упаковки генома вируса гриппа.

Схематическая диаграмма RNP в вирионе

Наконец, на основе предыдущих электронно-микроскопических анализов, схематическая диаграмма RNP в вирионах во время процесса почкования показана на.Липидный бислой оболочки изображен двойной линией. HA, NA и M2, встроенные в конверт, опущены в этом схематическом представлении для ясности. Белок M1 изображен в виде белых точек под липидной оболочкой. Каждая RNP изображена в виде скрученной стержневой структуры разного цвета (6,8,37). Восемь RNP, которые различаются по длине, расположены по определенной схеме, при этом показано, что семь периферийных RNP окружают основной RNP (59). Однако соответствующие RNP в конфигурации (7 + 1) изображаются произвольно из-за отсутствия информации об их выравнивании.Выяснение выравнивания восьми РНП поможет нам понять механизм (ы), в котором выбирается полный набор из восьми вРНК. Включение восьми RNP координируется с ростом почек () (59). Восемь хорошо организованных RNP заключены в удлиненный почкующийся вирион (). Они связаны с внутренней оболочкой на дистальном конце вириона и ориентированы перпендикулярно кончику почкования вириона () (59), что позволяет предположить, что между RNP и внутренней оболочкой на дистальном конце может быть «молекулярный клей». .Хотя комплекс гетеротримерной полимеразы должен быть связан с каждым RNP на любом конце стержнеобразной структуры (40), неясно, на каком конце RNP он расположен. Хотя NEP / NS2, вероятно, ассоциируется с RNP через M1 (81), его местоположение в вирионах остается нерешенным. Поскольку комплекс гетеротримерной полимеразы или NEP / NS2 на RNPs может функционировать как молекулярный клей для включения RNP в вирионы, важно выявить их локализацию внутри вирионов. Как только удлиненный вирион попадает в раствор окружающей среды, он принимает сферическую форму (59,60).Поскольку некоторые RNP, по-видимому, длиннее диаметра типичных сферических вирионов, за исключением шипов (6, 37), возможно, что эти RNP сжаты в сферических вирионах и что конфигурация (7 + 1) восьми RNP физически искажена ( ) (54).

Схематическая диаграмма RNP в почкующемся вирионе. (a – c) Включение восьми RNP координируется с ростом почек. В удлиненном почкующемся вирионе восемь RNP расположены в конфигурации (7 + 1). (d) В сферическом вирионе, высвобожденном из плазматической мембраны, RNP сжаты, и расположение восьми RNP нарушено.

Благодарности

Мы благодарим Сьюзан Уотсон за редактирование рукописи. Наше оригинальное исследование было поддержано грантами помощи для специально продвигаемых исследований и научных исследований, Фондом контрактных исследований в рамках Программы создания исследовательских центров по новым и вновь возникающим инфекционным заболеваниям, Исследовательскими исследованиями в области передовых технологий (Япония), специальные координационные фонды для развития науки и технологий Министерства образования, культуры, спорта, науки и технологий Японии, а также исследовательские гранты Государственного института аллергии и инфекционных заболеваний.Т. был поддержан грантом для молодых ученых от Японского общества содействия науке, грантом на научные исследования в приоритетных областях от Министерства образования, культуры, спорта, науки и технологий, а также Научным фондом Такеда.

Аббревиатуры

PA кислота
вРНК вирусная РНК
РНП рибонуклеопротеиновый комплекс
NP нуклеопротеин
нуклеопротеин
NA нейраминидаза
M2 белок ионного канала
PB1 основной полимеразный белок 1
PB2 основной полимеразный белок
NEP / NS2 ядерный экспортный белок
Crm1 поддержание области клеточной хромосомы 1

Ссылки

1.Palese P. Orthomyxoviridae. В: Книп Д.М., Хоули П.М., Гриффин Д.Е., Лэмб Р.А., Мартин М.А., Ройзман Б., Страус С.Е., редакторы. Области вирусологии. 5. Липпинкотт Уильямс и Уилкинс; Филадельфия: 2007. С. 1647–1689. [Google Scholar] 2. Фушье Р.А., Мюнстер В., Валленстен А. и др. Характеристика нового подтипа гемагглютинина вируса гриппа А (h26), полученного от черноголовых чаек. J Virol. 2005. 79: 2814–2822. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 3. Osterhaus AD, Rimmelzwaan GF, Martina BE и др.Вирус гриппа B тюленей. Наука. 2000; 288: 1051–1053. [PubMed] [Google Scholar] 4. Гуо Ю.Дж., Цзинь Ф.Г., Ван П. и др. Выделение вируса гриппа C от свиней и экспериментальное заражение свиней вирусом гриппа C. J Gen Virol. 1983; 64: 177–182. [PubMed] [Google Scholar] 5. Тейлор Р.М. Исследования выживаемости вируса гриппа между эпидемиями и антигенными вариантами вируса. Am J Public Health Nations Health. 1949; 39: 171–178. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 7. Heggeness MH, Smith PR, Ulmanen I, et al.Исследования спирального нуклеокапсида вируса гриппа. Вирусология. 1982; 118: 466–470. [PubMed] [Google Scholar] 8. Дженнингс П.А., Финч Дж. Т., Винтер Дж. И др. Управляет ли структура рибонуклеопротеина вируса гриппа более высоким порядком перестройки последовательности в РНК вируса гриппа? Клетка. 1983; 34: 619–627. [PubMed] [Google Scholar] 9. Oxford JS, Hockley DJ. Orthomyxoviridae. В: Нермут М.В., Стивен А.С., редакторы. Структура вируса животных. Эльзевир; Нью-Йорк: 1987. С. 213–232. [Google Scholar] 10. Руигрок Р.В., Бауден Ф.Структура рибонуклеопротеиновых частиц вируса гриппа. II. Очищенный без РНК рибонуклеопротеин вируса гриппа образует структуры, неотличимые от интактных рибонуклеопротеиновых частиц вируса гриппа. J Gen Virol. 1995; 76: 1009–1014. [PubMed] [Google Scholar] 11. Хэ Х, Чжоу Дж., Бартлам М. и др. Кристаллическая структура комплекса полимеразы PA (C) -PB1 (N) вируса птичьего гриппа H5N1. Природа. 2008. 454: 1123–1126. [PubMed] [Google Scholar] 12. Обаяси Э., Йошида Х., Каваи Ф. и др.Структурная основа взаимодействия основных субъединиц РНК-полимеразы вируса гриппа. Природа. 2008; 454: 1127–1131. [PubMed] [Google Scholar] 13. Буй М., Уиттакер Г., Хелениус А. Влияние белка M1 и низкого pH на ядерный транспорт рибонуклеопротеидов вируса гриппа. J Virol. 1996; 70: 8391–8401. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 14. Буй М., Уиллс Э. Г., Хелениус А. и др. Роль белка M1 вируса гриппа в ядерном экспорте вирусных рибонуклеопротеидов. J Virol. 2000; 74: 1781–1786.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 15. Baudin F, Petit I, Weissenhorn W. et al. Рассечение in vitro мембраны и активности связывания RNP белка M1 вируса гриппа. Вирусология. 2001. 281: 102–108. [PubMed] [Google Scholar] 16. O’Neill RE, Talon J, Palese P. NEP вируса гриппа (белок NS2) опосредует ядерный экспорт вирусных рибонуклеопротеидов. EMBO J. 1998; 17: 288–296. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 17. Е З, Лю Т., Оффринга Д. П. и др. Ассоциация матричного белка вируса гриппа с рибонуклеопротеинами.J Virol. 1999. 73: 7467–7473. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 18. Акарсу Х., Бурмейстер В.П., Петоса С. и др. Кристаллическая структура белок-связывающего домена M1 ядерного экспортного белка вируса гриппа A (NEP / NS2) EMBO J. 2003; 22: 4646–4655. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 19. Элтон Д., Симпсон-Холли М., Арчер К. и др. Взаимодействие нуклеопротеина вируса гриппа с клеточным CRM1-опосредованным путем ядерного экспорта. J Virol. 2001; 75: 408–419. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 20.Ивацуки-Хоримото К., Хоримото Т., Фуджи Ю. и др. Получение мутантов NS2 (NEP) вируса гриппа A с измененной сигнальной последовательностью ядерного экспорта. J Virol. 2004. 78: 10149–10155. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 21. Ма К., Рой А.М., Уиттакер Г.Р. Ядерный экспорт рибонуклеопротеидов вируса гриппа: идентификация промежуточного продукта экспорта на периферии ядра. Вирусология. 2001. 282: 215–220. [PubMed] [Google Scholar] 22. Neumann G, Hughes MT, Kawaoka Y. Белок NS2 вируса гриппа A опосредует ядерный экспорт vRNP посредством NES-независимого взаимодействия с hCRM1.EMBO J. 2000; 19: 6751–6758. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 23. Ватанабе К., Такидзава Н., Катох М. и др. Ингибирование ядерного экспорта рибонуклеопротеидных комплексов вируса гриппа лептомицином B. Virus Res. 2001; 77: 31–42. [PubMed] [Google Scholar] 24. Шайффеле П., Ритвельд А., Уилк Т. и др. Вирусы гриппа выбирают упорядоченные липидные домены во время отпочкования от плазматической мембраны. J Biol Chem. 1999; 274: 2038–2044. [PubMed] [Google Scholar] 25. Чжан Дж., Пекош А., Лэмб Р.А. Сборка вируса гриппа и микродомены липидного рафта: роль цитоплазматических хвостов гликопротеинов шипа.J Virol. 2000; 74: 4634–4644. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 26. Чжан Дж., Лезер Г.П., Пекош А. и др. Цитоплазматические хвосты гликопротеинов шипов вируса гриппа необходимы для нормальной упаковки генома. Вирусология. 2000. 269: 325–334. [PubMed] [Google Scholar] 27. McCown MF, Pekosz A. Цитоплазматический хвост M2 вируса гриппа A необходим для производства инфекционного вируса и эффективной упаковки генома. J Virol. 2005. 79: 3595–3605. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 28. Скехел Дж. Дж., Хэй А. Дж.Нуклеотидные последовательности на 5′-концах РНК вируса гриппа и их транскриптов. Nucleic Acids Res. 1978; 5: 1207–1219. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 29. Робертсон Дж. С.. 5 ‘и 3′ концевые нуклеотидные последовательности сегментов генома РНК вируса гриппа. Nucleic Acids Res. 1979; 6: 3745–3757. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 30. Desselberger U, Racaniello VR, Zazra JJ и др. 3′- и 5′-концевые последовательности сегментов РНК вируса гриппа A, B и C являются высококонсервативными и демонстрируют частичную обратную комплементарность.Ген. 1980; 8: 315–328. [PubMed] [Google Scholar] 31. Фодор Э., Притлов, округ Колумбия, Браунли Г.Г. Характеристика модели РНК-вилки РНК вириона в инициации транскрипции вируса гриппа А. J Virol. 1995; 69: 4012-4019. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 33. Klumpp K, Ruigrok RW, Baudin F. Роли полимеразы и нуклеопротеина вируса гриппа в формировании функциональной структуры RNP. EMBO J. 1997; 16: 1248–1257. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 34. Ортега Дж., Мартин-Бенито Дж., Цюрчер Т. и др.Ультраструктурные и функциональные анализы рекомбинантных рибонуклеопротеинов вируса гриппа позволяют предположить димеризацию нуклеопротеинов во время амплификации вируса. J Virol. 2000; 74: 156–163. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 35. Бауден Ф., Бах С., Кьюсак С. и др. Структура РНП вируса гриппа. I. Нуклеопротеин вируса гриппа плавит вторичную структуру в РНК-манипуляторе и подвергает основания действию растворителя. EMBO J. 1994; 13: 3158–3165. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 36. Дюсберг PH.Отчетливые субъединицы рибонуклеопротеина вируса гриппа. J Mol Biol. 1969; 42: 485–499. [PubMed] [Google Scholar] 37. Понс М.В., Шульце И.Т., Херст Г.К. и др. Выделение и характеристика рибонуклеопротеина вируса гриппа. Вирусология. 1969; 39: 250–259. [PubMed] [Google Scholar] 38. Йе Кью, Круг Р.М., Тао Й.Дж. Механизм, с помощью которого нуклеопротеин вируса гриппа А образует олигомеры и связывает РНК. Природа. 2006; 444: 1078–1082. [PubMed] [Google Scholar] 39. Нг АК, Чжан Х., Тан К. и др. Структура нуклеопротеина вируса гриппа A H5N1: значение для связывания РНК, олигомеризации и дизайна вакцины.FASEB J. 2008; 22: 3638–3647. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 40. Мурти К.Г., Вебстер Р.Г., Джонс И.М. Локализация РНК-полимераз на рибонуклеопротеинах вируса гриппа с помощью мечения иммунным золотом. Вирусология. 1988. 164: 562–566. [PubMed] [Google Scholar] 41. Schulze IT, Pons MW, Hirst GK. В кн .: Биология больших РНК-вирусов. Барри RD, Mahy BWJ, редакторы. Академическая пресса; Нью-Йорк: 1970. С. 324–346. [Google Scholar] 42. Мартин-Бенито Дж., Зона Е, Ортега Дж. И др. Трехмерная реконструкция рекомбинантной частицы рибонуклеопротеина вируса гриппа.EMBO Rep. 2001; 2: 313–317. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 43. Area E, Martín-Benito J, Gastaminza P, et al. Трехмерная структура полимеразного комплекса вируса гриппа: локализация субъединичных доменов. Proc Natl Acad Sci USA. 2004. 101: 308–313. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 44. Колома Р., Вальпуэста Дж. М., Арранц Р. и др. Структура биологически активного рибонуклеопротеидного комплекса вируса гриппа. PLoS Pathog. 2009; 5: e1000491. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 45.Торрейра Э., Шон Дж., Фернандес И. и др. Трехмерная модель изолированного гетеротримера рекомбинантной полимеразы вируса гриппа. Nucleic Acids Res. 2007. 35: 3773–3783. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 46. Бисвас СК, Бутц П.Л., Наяк Д.П. Мутационный анализ консервативных мотивов основного белка 1. полимеразы вируса гриппа А. J. ​​Virol. 1994; 68: 1819–1826. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 47. Медкалф Л., Пул Э., Элтон Д. и др. Температурно-чувствительные поражения у двух вирусов гриппа А, дефектных по репликативной транскрипции, нарушают связывание РНК нуклеопротеином.J Virol. 1999. 73: 7349–7356. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 48. Пул Э., Элтон Д., Медкалф Л. и др. Функциональные домены белка PB2 вируса гриппа A: идентификация сайтов связывания NP и PB1. Вирусология. 2004. 321: 120–133. [PubMed] [Google Scholar] 49. Хойл Л., Хорн Р. В., Уотерсон А. П.. Структура и состав миксовирусов. II. Компоненты, выделяемые из частицы вируса гриппа эфиром. Вирусология. 1961; 13: 448–459. [PubMed] [Google Scholar] 50. Апостолов К, Флюетт ТХ.Внутреннее строение вируса гриппа. Вирусология. 1965; 26: 506–508. [PubMed] [Google Scholar] 51. Алмейда Дж. Д., Бренд CM. Морфологическое исследование внутреннего компонента вируса гриппа. J Gen Virol. 1975. 27: 313–318. [PubMed] [Google Scholar] 52. Мурти К.Г., Бин В.Дж., младший, Вебстер Р.Г. Спиральные рибонуклеопротеины вируса гриппа: электронно-микроскопический анализ. Вирусология. 1980; 104: 224–229. [PubMed] [Google Scholar] 53. Мурти К.Г., Браун П.С., Бин В.Дж., младший и др. Состав спиральных внутренних компонентов вируса гриппа, выявленный с помощью мечения иммунным золотом / электронной микроскопии.Вирусология. 1992; 186: 294–299. [PubMed] [Google Scholar] 54. Schulze IT. Строение вируса гриппа. II. Модель, основанная на морфологии и составе субвирусных частиц. Вирусология. 1972; 47: 181–196. [PubMed] [Google Scholar] 55. Алмейда Дж. Д., Уотерсон А. П.. В кн .: Биология больших РНК-вирусов. Барри RD, Mahy BWJ, редакторы. Академическая пресса; Нью-Йорк: 1970. С. 27–51. [Google Scholar] 56. Руигрок Р.В., Колдер Л.Дж., Уортон С.А. Электронная микроскопия субмембранной структуры вируса гриппа. Вирусология.1989; 173: 311–316. [PubMed] [Google Scholar] 57. Буи Ф. П., Руигрок Р. В., ван Брюгген Э. Ф. Электронная микроскопия вируса гриппа. Сравнение отрицательно окрашенных и покрытых льдом частиц. J Mol Biol. 1985. 184: 667–676. [PubMed] [Google Scholar] 58. Харрис А., Кардон Г., Винклер, округ Колумбия. Плейоморфия вируса гриппа, охарактеризованная криоэлектронной томографией. Proc Natl Acad Sci USA. 2006; 103: 19123–19127. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 59. Нода Т., Сагара Х, Йен А. и др. Архитектура рибонуклеопротеидных комплексов в частицах вируса гриппа А.Природа. 2006; 439: 490–492. [PubMed] [Google Scholar] 60. Compans RW, Диммок, штат Нью-Джерси. Электронно-микроскопическое исследование одноцикловой инфекции фибробластов куриного эмбриона вирусом гриппа. Вирусология. 1969; 39: 499–515. [PubMed] [Google Scholar] 62. Эрреро-Урибе Л., Манн Г. Ф., Цукерман А. Дж. И др. Репликация вирусов гриппа A и B в диплоидных клетках человека. J Gen Virol. 1983; 64: 471–475. [PubMed] [Google Scholar] 63. Энами М., Шарма Дж., Бенхам С. и др. Вирус гриппа, содержащий девять различных сегментов РНК.Вирусология. 1991; 185: 291–298. [PubMed] [Google Scholar] 65. Duhaut SD, McCauley JW. Дефектные РНК ингибируют сборку сегментов генома вируса гриппа специфичным для сегментов образом. Вирусология. 1996; 216: 326–337. [PubMed] [Google Scholar] 66. Одагири Т., Таширо М. Сегмент-специфичные некодирующие последовательности РНК генома вируса гриппа участвуют в специфической конкуренции между дефектной интерферирующей РНК и ее сегментом РНК-предшественником на этапе сборки вириона. J Virol. 1997. 71: 2138–2145. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 67.Fujii Y, Goto H, Watanabe T. и др. Селективное включение сегментов РНК вируса гриппа в вирионы. Proc Natl Acad Sci USA. 2003; 100: 2002–2007. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 68. Ватанабе Т., Ватанабе С., Нода Т. и др. Использование сигналов упаковки нуклеиновых кислот для создания нового вектора на основе вируса гриппа, стабильно экспрессирующего два чужеродных гена. J Virol. 2003. 77: 10575–10583. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 69. Fujii K, Fujii Y, Noda T и др. Важность как кодирующих, так и сегмент-специфичных некодирующих областей NS-сегмента вируса гриппа A для его эффективного включения в вирионы.J Virol. 2005. 79: 3766–3774. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 70. Мурамото Ю., Такада А., Фуджи К. и др. Иерархия сегментов вирусной РНК (вРНК) в их роли во включении вРНК в вирионы гриппа А. J Virol. 2006; 80: 2318–2325. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 71. Одзава М., Маэда Дж., Ивацуки-Хоримото К. и др. Требования к нуклеотидной последовательности на 5’-конце сегмента М РНК вируса гриппа А для эффективной репликации вируса. J Virol. 2009; 83: 3384–3388. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 72.Фуджи К., Одзава М., Ивацуки-Хоримото К. и др. Включение сегментов генома вируса гриппа A не требует абсолютно последовательностей дикого типа. J Gen Virol. 2009; 90: 1734–1740. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 73. Лян И, Хонг И, Парслоу Т.Г. цис-действующие сигналы упаковки в сегментах геномной РНК вируса гриппа PB1, PB2 и PA. J Virol. 2005; 79: 10348–10355. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 74. де Вит Э., Спронкен М.И., Риммельцваан Г.Ф. и др. Доказательства специфической упаковки генома вируса гриппа А из условно дефектных вирусных частиц, лишенных гена полимеразы.Вакцина. 2006; 24: 6647–6650. [PubMed] [Google Scholar] 75. Гог Дж. Р., Афонсо Эдос С., Далтон Р. М. и др. Сохранение кодонов в геноме вируса гриппа А определяет сигналы упаковки РНК. Nucleic Acids Res. 2007; 35: 1897–1907. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 76. Marsh GA, Hatami R, Palese P. Специфические остатки вирусной РНК гемагглютинина вируса гриппа A важны для эффективной упаковки в зарождающиеся вирионы. J Virol. 2007. 81: 9727–9736. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 77. Марш Г.А., Рабадан Р., Левин А.Дж. и др.Высококонсервативные области сегментов гена полимеразы вируса гриппа A имеют решающее значение для эффективной упаковки вирусной РНК. J Virol. 2008. 82: 2295–2304. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 78. Лян И, Хуанг Т., Ли Х и др. Мутационный анализ сигналов упаковки в сегментах геномной РНК вируса гриппа PA, PB1 и PB2. J Virol. 2008. 82: 229–236. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 79. Hutchinson EC, Curran MD, Read EK, et al. Мутационный анализ цис-действующих сигналов РНК в сегменте 7 вируса гриппа А.J Virol. 2008. 82: 11869–11879. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 80. Хатчинсон EC, Wise HM, Кудрявцева К. и др. Характеристика вирусов гриппа А с мутациями в сегменте 5 пакетов сигналов. Вакцина. 2009. 27: 6270–6275. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 81. Ясуда Дж., Накада С., Като А. и др. Молекулярная сборка вируса гриппа: ассоциация белка NS2 с вирионным матриксом. Вирусология. 1993; 196: 249–255. [PubMed] [Google Scholar]

% PDF-1.4 % 1 0 объект >>> эндобдж 2 0 obj > поток uuid: c44e2170-dfca-7048-acd8-c988415bdeebadobe: docid: indd: 8eb85a51-7121-11de-bfed-e8c0f7103835xmp.Идентификатор: ea933695-6584-4913-8df3-cc241bf32bc0proof: pdfxmp.iid: 47cb185f-9f1e-40b5-9de9-5bd353c30052xmp.did: 07defda8-4187-4724-b405-3af92bdef701-11adobed: 8occ8docs-8doc e8c0f7103835по умолчанию

  • преобразовано из application / x-indesign в application / pdf Adobe InDesign CC 13.0 (Macintosh) / 2018-01-17T19: 12: 43-05: 00
  • 2018-01-17T19: 12: 43-05: 002018-01-17T19: 13: 03-05: 002018-01-17T19: 13: 03-05: 00 Приложение Adobe InDesign CC 13.0 (Macintosh) / pdf Библиотека Adobe PDF 15.0 Ложь
  • ArnhemFine-Нормальный
  • НовостиGothicBT-Bold
  • НовостиGothicBT-Italic
  • НовостиGothicBT-Roman
  • НовостиGothicBT-Light
  • НовостиGothicBT-BoldItalic
  • Times-Roman
  • НовостиGothicBT-Demi
  • НовостиGothicBT-DemiItalic
  • ArnhemFine-NormalItalic
  • 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 / A0ht4DAAAAAHhtZmYAAAAFAAACFl9fmRYAAAAAICBtYgAAAAUAAAAA ///// ///// wAAAAB0bmZuAAAABQAAAAD AAAAACBjbmUAAAAGAAAICi1 + 7ioAAAAAAAD // 25lcnAAAAAFAAAIV2wraD8AAAAAeWFsYQAAAAUAAA7ctJGrVQAAAABucmVrAAAABQAAAAD ///// AAAAAG5ya2YAAAAFAAANDD2CV2kAAAAAeWFsdwAAAAUAAAAIC1PI2gAAAAAgdG1mAAAAA09UVE8 =
  • 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 ///// ///// wAAAAB0bmZuAAAABQAAAAD AAAAACBjbmUAAAAGAAANLGqUJE8AAAAAAAD // 25lcnAAAAAFAAACW6 / Lg / kAAAAAeWFsYQAAAAUAAAAMD1240wAAAABucmVrAAAABQAADDxJR9CTAAAAAG5ya2YAAAAFAAAAAP //// 8AAAAAeWFsdwAAAAUAAAAAAAAAAAAAAAAgdG1mAAAAA3RydWU =
  • 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 ///// ///// wAAAAB0bmZuAAAABQAAAAD AAAAACBjbmUAAAAGAAANLGqUJE8AAAAAAAD // 25lcnAAAAAFAAACXU0BtQ8AAAAAeWFsYQAAAAUAAAAMD1240wAAAABucmVrAAAABQAADiJiLKl0AAAAAG5ya2YAAAAFAAAAAP //// 8AAAAAeWFsdwAAAAUAAAAAAAAAAAAAAAAgdG1mAAAAA3RydWU =
  • 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 //// ///// 8AAAAAdG5mbgAAAAUAAAAA wAAAAAgY25lAAAABgAADSxqlCRPAAAAAAAA // 9uZXJwAAAABQAAAlzXnkF8AAAAAHlhbGEAAAAFAAAADA9duNMAAAAAbnJlawAAAAUAAAvu36t6 / AAAAABucmtmAAAABQAAAAD ///// AAAAAHlhbHcAAAAFAAAAAAAAAAAAAAAAIHRtZgAAAAN0cnVl
  • 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 ///// AAAAAHRuZm4AAAAFAAAAAP //// 8AAAAAIGNuZQAAAAYAAA0sapQkTwAAAAAAAP // bmVycAAAAAUAAAJc1Le9BAAAAAB5YWxhAAAABQAAAAwPXbjTAAAAAG5yZWsAAAAFAAAM0uS2eSkAAAAAbnJrZgAAAAUAAAAA ///// wAAAAB5YWx3AAAABQAAAAAAAAAAAAAAACB0bWYAAAADdHJ1ZQ ==
  • 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 + AAAAACB4dG0AAAAFAAAEOEYRRvgAAAAAeG1mZgAAAAUAAAAAAAAAAAAAAAAgIG1iAAAABQAAAAD ///// AAAAAHRuZm4AAAAFAAAAAP //// 8AAAAAIGNuZQAAAAYAAA0sapQkTwAAAAAAAP // bmVycAAAAAUAAAJhsDmDUQAAAAB5YWxhAAAABQAAAAwPXbjTAAAAAG5yZWsAAAAFAAAMMMSZvckAAAAAbnJrZgAAAAUAAAAA ///// wAAAAB5YWx3AAAABQAAAAAAAAAAAAAAACB0bWYAAAADdHJ1ZQ ==
  • 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 / ukvAAAAACB4dG0AAAAFAABxOHd57wUAAAAAeG1mZgAAAAUAAAAQAb9R5AAAAAAgIG1iAAAABQAAAAD ///// AAAAAHRuZm4AAAAFAABlgoMEaEQAAAAAIGNuZQAAAAYAABtEgKMLnAAAAAAAHf // bmVycAAAAAUAAEdFzLiQrAAAAAB5YWxhAAAABQAAA / CrVA1dAAAAAG5yZWsAAAAFAAACxIJAIEYAAAAAbnJrZgAAAAUAAAHIequ8lwAAAAB5YWx3AAAABQAAAAAAAAAAAAAAACB0bWYAAAADdHJ1ZQ ==
  • AAACmAAAAALL9lbPAAAAAHJzbmYAAAKIMxwaMgAAAA1lbWFuAAAAYzNP + / 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 / rKlEAAAAAeG1mZgAAAAUAAAAAAAAAAAAAAAAgIG1iAAAABQAAAAD ///// AAAAAHRuZm4AAAAFAAAAAP //// 8AAAAAIGNuZQAAAAYAAA0sapQkTwAAAAAAAP // bmVycAAAAAUAAAJbe + vKGwAAAAB5YWxhAAAABQAAAAwPXbjTAAAAAG5yZWsAAAAFAAALRjmz47MAAAAAbnJrZgAAAAUAAAAA ///// wAAAAB5YWx3AAAABQAAAAAAAAAAAAAAACB0bWYAAAADdHJ1ZQ ==
  • 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 ///// AAAAAHRuZm4AAAAFAAAAAP //// 8AAAAAIGNuZQAAAAYAAA0sapQkTwAAAAAAAP // bmVycAAAAAUAAAJh3pu6BQAAAAB5YWxhAAAABQAAAAwPXbjTAAAAAG5yZWsAAAAFAAANDpXlQbEAAAAAbnJrZgAAAAUAAAAA ///// wAAAAB5YWx3AAAABQAAAAAAAAAAAAAAACB0bWYAAAADdHJ1ZQ ==
  • 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 + Ь / + osQAAAAAgeHRtAAAABQAAA + zul9kLAAAAAHhtZmYAAAAFAAACFlSJPO4AAAAAICBtYgAAAAUAAAAA ///// ///// wAAAAB0bmZuAAAABQAAAAD AAAAACBjbmUAAAAGAAAH7nhyDyQAAAAAAAD // 25lcnAAAAAFAAAIXlyfcV0AAAAAeWFsYQAAAAUAABZGP6FGYAAAAABucmVrAAAABQAAAAD ///// AAAAAG5ya2YAAAAFAAAT4NceeQQAAAAAeWFsdwAAAAUAAAAIC1PI2gAAAAAgdG1mAAAAA09UVE8 =
  • NewsGoth BT1.0100BitstreamOpenType — TT1667881507НовостиGothicBT-Bold1667881507
  • НовостиGoth BT1.0100BitstreamOpenType — TT8268
  • НовостиGothicBT-Roman8268
  • НовостиGoth BT1.0100BitstreamOpenType — TT4188982126NewsGothicBT-Italic4188982126
  • НовостиGoth Lt BT1.0100BitstreamOpenType — TT2284071398НовостиGothicBT-Light2284071398
  • ArnhemFine1.10100 — OpenType — PS3

    4007ArnhemFine-Normal3

    4007
  • раз 7.0063825 Apple ComputerTrueType3625632257Times-Roman3625632257
  • Minion Pro2.11200Adobe SystemsOpenType — PS2168896655MinionPro-Regular2168896655
  • НовостиGoth Dm BT1.0100BitstreamOpenType — TT3206322796НовостиGothicBT-Demi3206322796
  • НовостиGoth Dm BT1.0100BitstreamOpenType — TT681880289НовостиGothicBT-DemiItalic681880289
  • НовостиGoth Cn BT1.0100BitstreamOpenType — TT1356012699НовостиGothicBT-RomanCondensed1356012699
  • Times New Roman 3.05063763Монотип ТипографияTrueType3476578673ВремяНовыйРоманскоеPSMT3476578673
  • Zapf Dingbats6.100Galapagos Design GroupTrueType3734765074ZapfDingbatsITC3734765074
  • конечный поток эндобдж 3 0 obj > эндобдж 5 0 obj > эндобдж 6 0 obj > эндобдж 7 0 объект > эндобдж 18 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / TrimBox [0.0 0.0 648.0 792.0] / Type / Page >> эндобдж 19 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / TrimBox [0.0 0.0 648.0 792.0] / Тип / Страница >> эндобдж 20 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / TrimBox [0.0 0.0 648.0 792.0] / Type / Page >> эндобдж 21 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / TrimBox [0.0 0.0 648.0 792.0] / Type / Page >> эндобдж 22 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / TrimBox [0.0 0.0 648.0 792.0] / Type / Page >> эндобдж 23 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / TrimBox [0.0 0.0 648.0 792.0] / Тип / Страница >> эндобдж 24 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / TrimBox [0.0 0.0 648.0 792.0] / Type / Page >> эндобдж 25 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / TrimBox [0.0 0.0 648.0 792.0] / Type / Page >> эндобдж 26 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / TrimBox [0.0 0.0 648.0 792.0] / Type / Page >> эндобдж 27 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] / Properties> / Shading >>> / TrimBox [0., ‘(d, j> sqx \ / ~

    Анализ РНК-белковых сетей с помощью RNP-MaP определяет функциональные узлы на РНК

  • 1.

    Геринг, Н.Х., Уол, Э. и Фишер, У. Расшифровка кода мРНП : Связанные с РНК детерминанты посттранскрипционной регуляции генов. Trends Biochem. Sci. 42 , 369–382 (2017).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 2.

    Гуттман М. и Ринн Дж. Л. Принципы модульной регуляции больших некодирующих РНК. Природа 482 , 339–346 (2012).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 3.

    Anger, A. M. et al. Структуры человека и рибосомы дрозофилы 80S. Природа 497 , 80–85 (2013).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 4.

    Pomeranz Krummel, D. A., Oubridge, C., Леунг, А. К. В., Ли, Дж. И Нагаи, К. Кристаллическая структура сплайсосомного U1 snRNP человека при разрешении 5,5. Nature 458 , 475–480 (2009).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 5.

    Kondo, Y., Oubridge, C., van Roon, A.MM & Nagai, K. Кристаллическая структура человеческого U1 snRNP, небольшой ядерной частицы рибонуклеопротеина, раскрывает механизм распознавания 5′-сайта сплайсинга. eLife 4 , 1–19 (2015).

    Google ученый

  • 6.

    Wu, J. et al. Крио-ЭМ структура холофермента рибонуклеазы P. Ячейка 175 , 1393–1404.e11 (2018).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 7.

    Уле, Дж., Хванг, Х. В. и Дарнелл, Р. Б. Будущее перекрестного сшивания и иммунопреципитации (CLIP). Cold Spring Harb. Перспектива.Биол. 10 , а032243 (2018).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 8.

    Гарзия, А., Мейер, С., Морозов, П., Сайек, М. и Тушл, Т. Оптимизация PAR-CLIP для идентификации сайтов связывания РНК-связывающих белков в масштабе всего транскриптома. Методы 118–119 , 24–40 (2017).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 9.

    Уиллер, Э. К., Ван Ностранд, Э. Л. и Йео, Г. В. Достижения и проблемы в обнаружении межтранскриптомных взаимодействий белок-РНК. Wiley Interdiscip. Ред. РНК 9 , e1436 (2018).

    Google ученый

  • 10.

    Freeberg, M.A. et al. Первазивные и динамические сайты связывания с белками транскриптома мРНК в Saccharomyces cerevisiae . Genome Biol. 14 , R13 (2013).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 11.

    Schueler, M. et al. Дифференциальный профили белковой занятости транскриптома мРНК. Genome Biol. 15 , R15 (2014).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 12.

    Раманатан М., Портер Д. Ф. и Хавари П. А. Методы изучения взаимодействий РНК-белок. Нат.Методы 16 , 225–234 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 13.

    Mädler, S., Bich, C., Touboul, D. & Zenobi, R. Химическое сшивание с эфирами NHS: систематическое исследование реакционной способности аминокислот. J. Mass Spectrom. 44 , 694–706 (2009).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 14.

    Das, J. Алифатические диазирины как фотоаффинные зонды для белков: последние разработки. Chem. Ред. 111 , 4405–4417 (2011).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 15.

    Крюгер, Д. М., Нойбахер, С. и Гроссманн, Т. Н. Взаимодействия белок-РНК: структурные характеристики и горячие точки аминокислот. РНК 24 , 1457–1465 (2018).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 16.

    Смола, М. Дж., Райс, Г. М., Пусан, С., Зигфрид, Н. А. и Уикс, К. М. Селективное 2′-гидроксилацилирование проанализировано с помощью удлинения праймера и мутационного профилирования (SHAPE-MaP) для прямого, универсального и точного анализа структуры РНК. Нат. Protoc. 10 , 1643–1669 (2015).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 17.

    Smola, M. J. et al. SHAPE выявляет взаимодействия на уровне транскрипта, сложные структурные домены и взаимодействия белков через днРНК Xist в живых клетках. Proc. Natl Acad. Sci. США 113 , 10322–10327 (2016).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 18.

    Yang, T., Li, X. M., Bao, X., Fung, Y. M. E. & Li, X. D. Фотолизин захватывает белки, которые связывают посттрансляционные модификации лизина. Нат. Chem. Биол. 12 , 70–72 (2016).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 19.

    Kühn-Hölsken, E. et al. Картирование сайта связывания snurportin 1 на нативном u1 snRNP с помощью перекрестного связывания и масс-спектрометрии. Nucleic Acids Res. 38 , 5581–5593 (2010).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 20.

    Мустое, А. М., Лама, Н. Н., Ирвинг, П. С., Олсон, С. В. и Уикс, К. М. Сложность спаривания оснований РНК в живых клетках, визуализированная с помощью коррелированного химического исследования. Proc.Natl Acad. Sci. США 116 , 24574–24582 (2019).

    CAS Google ученый

  • 21.

    Так, B. R. et al. Специфичный для U1 snRNP путь сборки показывает, что комплекс SMN является универсальным концентратором для обмена RNP. Нат. Struct. Мол. Биол. 23 , 225–230 (2016).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 22.

    Уилл, К.Восстановление in vitro U1 snRNP млекопитающих, активных в сплайсинге: белок U1-C усиливает образование ранних (E) сплайсосомных комплексов. Nucleic Acids Res. 24 , 4614–4623 (1996).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 23.

    Есакова О., Красильников А.С. Белки и РНК: семейство РНКаз P / MRP. РНК 16 , 1725–1747 (2010).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 24.

    Передерина, А., Березин, И., Красильников, А. С. Восстановление in vitro и анализ РНП эукариотической РНКазы P. Nucleic Acids Res. 46 , 6857–6868 (2018).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 25.

    Саакян А., Янг Ю. и Плат К. Роль Xist в компенсации дозировки Х-хромосомы. Trends Cell Biol. 28 , 999–1013 (2018).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 26.

    Engreitz, J. M. et al. ДнРНК Xist использует трехмерную архитектуру генома для распространения по X-хромосоме. Наука 341 , 1237973 (2013).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 27.

    Wutz, A., Rasmussen, T. P. & Jaenisch, R. Хромосомное молчание и локализация опосредуются различными доменами Xist РНК. Нат. Genet. 30 , 167–174 (2002).

    CAS Google ученый

  • 28.

    Colognori, D., Sunwoo, H., Kriz, A.J., Wang, C.Y. & Lee, J. T. Делеционный анализ Xist выявляет взаимозависимость между Xist РНК и комплексами polycomb для распространения вдоль неактивного X. Mol. Ячейка 74 , 101–117 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 29.

    Ридингс-Фигероа, Р.и другие. Белок ядерного матрикса CIZ1 способствует локализации РНК Xist на неактивной территории Х-хромосомы. Genes Dev. 31 , 876–888 (2017).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 30.

    Sunwoo, H., Colognori, D., Froberg, J. E., Jeon, Y. & Lee, J. T. Повторение E закрепляет РНК Xist в неактивном хромосомном компартменте X через белок, взаимодействующий с CDKN1A (CIZ1). Proc.Natl Acad. Sci. США 114 , 10654–10659 (2017).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 31.

    Lee, H. J. et al. Енблочные и сегментные делеции XIST человека выявляют элементы РНК, связанные с инактивацией Х-хромосомы. Nucleic Acids Res. 47 , 3875–3887 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 32.

    Нестерова Т.Б. и соавт. Систематический аллельный анализ определяет взаимодействие ключевых путей инактивации Х-хромосомы. Нат. Commun. 10 , 3129 (2019).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 33.

    Brockdorff, N. Экспансия локальных тандемных повторов в Xist РНК как модель функционализации нкРНК. Некодирующая РНК 4 , 28 (2018).

    CAS Google ученый

  • 34.

    Davis, C.A. et al. Энциклопедия элементов ДНК (ENCODE): обновление информационного портала. Nucleic Acids Res. 46 , D794 – D801 (2018).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 35.

    Van Nostrand, E. L. et al. Крупномасштабная связывающая и функциональная карта белков, связывающих РНК человека. Природа 583 , 711–719 (2020).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 36.

    Moindrot, B. et al. Объединенный скрининг shRNA идентифицирует Rbm15, Spen и Wtap как факторы, необходимые для Xist РНК-опосредованного сайленсинга. Cell Rep. 12 , 562–572 (2015).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 37.

    Ciaudo, C. et al. Пути деградации ядерной мРНК участвуют в регуляции Xist и инактивации Х-хромосомы. PLoS Genet. 2 , e94 (2006).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 38.

    Sakaguchi, T. et al. Контроль хромосомной локализации Xist молекулами семейства hnRNP U. Dev. Ячейка 39 , 11–12 (2016).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 39.

    Patil, D. P. et al. Метилирование РНК M6A способствует репрессии транскрипции, опосредованной XIST. Природа 537 , 369–373 (2016).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 40.

    Xiao, R. et al. Проникающие взаимодействия хроматина и РНК-связывающих белков позволяют регулировать транскрипцию на основе РНК. Ячейка 178 , 107–121 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 41.

    Яп, К.и другие. Короткая тандемная РНК, обогащенная повторами, собирает ядерный компартмент, чтобы контролировать альтернативный сплайсинг и способствовать выживанию клеток. Мол. Ячейка 72 , 525–540 (2018).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 42.

    Rayman, J. B., Karl, K. A. & Kandel, E. R. Само-мультимеризация TIA-1, разделение фаз и рекрутирование в стрессовые гранулы динамически регулируются Zn 2. Cell Rep. 22 , 59–71 (2018).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 43.

    Gallego-Iradi, M.C. et al. N-концевые последовательности в matrin 3 опосредуют разделение фаз на каплевидные структуры, которые привлекают варианты TDP43, лишенные элементов связывания РНК. Lab. Расследование. 99 , 1030–1040 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 44.

    Attig, J. et al. Сборка гетеромерных RNP в LINEs контролирует процессинг РНК, специфичный для клонов. Ячейка 174 , 1067–1081 (2018).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 45.

    Лонг, Дж. К. и Касерес, Дж. Ф. Семейство белков SR факторов сплайсинга: главные регуляторы экспрессии генов. Biochem. J. 417 , 15–27 (2009).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 46.

    De, I. et al. РНК-геликаза Водолея проявляет структурные адаптации, опосредующие ее рекрутирование в сплайсосомы. Нат. Struct. Мол. Биол. 22 , 138–144 (2015).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 47.

    Rigo, F. et al. Синтетические олигонуклеотиды рекрутируют ILF2 / 3 в транскрипты РНК для модуляции сплайсинга. Нат. Chem. Биол. 8 , 555–561 (2012).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 48.

    Sugimoto, N. et al. Cdt1-связывающий белок GRWD1 представляет собой новый связывающий гистоны белок, который облегчает загрузку MCM за счет своего влияния на архитектуру хроматина. Nucleic Acids Res. 43 , 5898–5911 (2015).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 49.

    Hein, M. Y. et al. Человеческий интерактом в трех количественных измерениях, организованных стехиометрией и изобилием. Ячейка 163 , 712–723 (2015).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 50.

    Dominguez, D. et al. Предпочтения последовательности, структуры и контекста белков, связывающих РНК человека. Мол. Ячейка 70 , 854–867 (2018).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 51.

    Xue, Y. et al. Полногеномный анализ взаимодействий PTB-РНК выявляет стратегию, используемую общим репрессором сплайсинга для модуляции включения или пропуска экзонов. Мол. Ячейка 36 , 996–1006 (2009).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 52.

    Uemura, Y. et al. Matrin3 непосредственно связывается с интронными последовательностями, богатыми пиримидином, и контролирует альтернативный сплайсинг. Гены Клетки 22 , 785–798 (2017).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 53.

    Meyer, C. et al. Семейство РНК-связывающих белков TIA1 регулирует EIF2AK2-опосредованный стрессовый ответ и развитие клеточного цикла. Мол. Ячейка 69 , 622–635 (2018).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 54.

    Cerase, A. et al. Фазовое разделение приводит к инактивации Х-хромосомы: гипотеза. Нат. Struct. Мол. Биол. 26 , 331–334 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 55.

    Pandya-Jones, A. et al. Сборка белка опосредует локализацию и молчание Xist. Природа https://doi.org/10.1038/s41586-020-2703-0 (2020).

  • 56.

    Uszczynska-Ratajczak, B., Lagarde, J., Frankish, A., Guigó, R. & Johnson, R. К полной карте транскриптома длинной некодирующей РНК человека. Нат. Преподобный Жене. 19 , 535–548 (2018).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 57.

    Van Nostrand, E. L. et al. Надежное открытие сайтов связывания РНК-связывающих белков в масштабе всего транскриптома с улучшенным CLIP (eCLIP). Нат. Методы 13 , 508–514 (2016).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 58.

    Bastian, M., Heymann, S. & Jacomy, M. Gephi: программное обеспечение с открытым исходным кодом для исследования и управления визуализацией сетей и исследования больших графов. Внутр. AAAI Conf.Веблоги Соц. СМИ https://doi.org/10.13140/2.1.1341.1520 (2009).

  • 59.

    Блондель В. Д., Гийом Дж. Л., Ламбьотт Р. и Лефевр Э. Быстрое развертывание сообществ в большие сети. J. Stat. Мех. Теория Опыт . P10008 (2008).

  • 60.

    Бейли Т. и Элкан К. Подбор модели смеси путем максимизации ожидания для обнаружения мотивов в биополимерах. В Proc. Вторая международная конференция по интеллектуальным системам для молекулярной биологии 2 , 28–36 (1994).

    CAS Google ученый

  • 61.

    Busan, S., Weidmann, C. A., Sengupta, A. & Weeks, K. M. Рекомендации по выбору реагента SHAPE и стратегии обнаружения для исследований структуры РНК. Биохимия 58 , 2655–2664 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 62.

    Сенгупта, А., Райс, Г. М. и Уикс, К.М. Одномолекулярное коррелированное химическое зондирование выявляет крупномасштабную структурную связь в рибосоме и механизм действия антибиотика спектиномицина в живых клетках. PLoS Biol. 17 , e3000393 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 63.

    Busan, S. & Weeks, K. M. Точное обнаружение химических модификаций в РНК с помощью мутационного профилирования (MaP) с помощью ShapeMapper 2. РНК 24 , 143–148 (2018).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 64.

    Рейтер, Дж. С. и Мэтьюз, Д. Х. Структура РНК: программное обеспечение для предсказания и анализа вторичной структуры РНК. BMC Bioinformatics 11 , 129 (2010).

  • 65.

    Смола, М. Дж., Калабрезе, Дж. М. и Уикс, К. М. Обнаружение РНК-белковых взаимодействий в живых клетках с помощью SHAPE. Биохимия 54 , 6867–6875 (2015).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 66.

    Основная группа разработчиков R. R: язык и среда для статистических вычислений (Фонд R для статистических вычислений, 2011 г.).

  • 67.

    DeLano, W. Pymol: инструмент молекулярной графики с открытым исходным кодом. Информационный бюллетень CCP4 по кристаллографии белков 40 , 82–92 (2002).

  • 68.

    Дарти, К., Дениз, А. и Понти, Ю. Варна: интерактивное рисование и редактирование вторичной структуры РНК. Биоинформатика 25 , 1974–1975 (2009).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 69.

    Эдгар Р.С. МЫШЦЫ: множественное выравнивание последовательностей с высокой точностью и высокой пропускной способностью. Nucleic Acids Res. 32 , 1792–1797 (2004).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 70.

    Альтшул, С. Ф., Гиш, В., Миллер, В., Майерс, Э. В. и Липман, Д. Дж. Базовый инструмент поиска локального совмещения. J. Mol. Биол. 215 , 403–410 (1990).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 71.

    Грант, К. Э., Бейли, Т. Л. и Ноубл, У. С. FIMO: сканирование на наличие вхождений данного мотива. Биоинформатика 27 , 1017–1018 (2011).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • Моделирование эволюционного роста эктомикоризы в условиях подповерхностного выветривания и геохимического цикла углерода

    Реферат

    Считалось, что за последние два десятилетия распространение покрытосеменных растений в меловом периоде и палеогене привело к увеличению потоков силикатного выветривания Ca и Mg в океаны, тем самым поглощая атмосферный CO 2 и, в конечном итоге, поглощая его в морских карбонатных отложениях. .Однако рост покрытосеменных деревьев в меловом периоде совпал с эволюцией ассоциаций эктомикоризных грибов у покрытосеменных и голосеменных деревьев, которые все чаще вытесняли деревья с предковыми ассоциациями арбускулярно-микоризных. Это представляет собой наиболее глубокое изменение в функционировании корней, которое произошло в истории эволюции растений, с далеко идущими последствиями для выветривания и биогеохимии почвы, поскольку тонкие корни покрыты оболочкой грибов. Эктомикоризные грибы являются основным источником питательных веществ и водопоглощающих веществ с почвой, а также пути, по которому органические кислоты и протоны активно секретируются в масштабе отдельных минеральных зерен.Здесь мы проверяем гипотезу о том, что рост эктомикоризных деревьев был основным фактором снижения атмосферного CO 2 за последние 120 млн лет из-за усиленного силикатного выветривания. Мы разработали основанную на процессах модель химии почвы, включающую влияние растений с предковыми арбускулярными микоризами, и недавно разработали эктомикоризу на химический состав почвы через ее влияние на биологический цикл протонов, и интегрировали ее в ведущую модель долгосрочного углеродного цикла. (ГЕОКАРБСУЛЬФ).Наше механистическое моделирование, основанное на процессах, показывает, что рост эктомикоризных деревьев может объяснить сокращение выбросов CO 2 , ранее эмпирически приписываемое распространению покрытосеменных растений. Поэтому мы предполагаем, что эволюционный рост эктомикоризы представляет собой важную движущую силу долгосрочного углеродного цикла за счет усиления химического выветривания и поглощения атмосферного CO 2 морскими карбонатами.

    ZAP-антивирусный белок ZAP ингибирует ретротранспозицию LINE и Alu

    Рис 4.

    Влияние ZAP-S на экспрессию РНК L1 и белка L1.

    (A) Схема pJM101 / L1 . 3Δneo : жирные черные линии указывают приблизительное расположение зондов (5UTR99 и ORF2_5804), используемых в экспериментах с Нозерн-блоттингом. pJM101 / L1.3Δneo экспрессируется из вектора pCEP4. Промотор CMV увеличивает экспрессию L1, а сигнал полиаденилирования (pA) SV40 располагается ниже нативного сигнала полиаденилирования L1. (B) Результаты Нозерн-блоттинга : Верхняя панель: клетки HeLa котрансфицировали pJM101 / L1.3Δneo и либо указанные плазмиды экспрессии ZAP-S, либо пустой вектор pCEP4. Изображения нозерн-блоттинга отображают влияние сверхэкспрессии ZAP-S на уровни полиаденилированной РНК L1. Конструкции, трансфицированные в клетки HeLa, указаны над каждой полосой. UTF указывает на нетрансфицированные клетки HeLa и служит отрицательным контролем. Зонды (5UTR99 и ORF2_5804) указаны в верхнем левом углу соответствующих блотов. Черная стрелка указывает положение полноразмерной РНК L1. Синие и желтые стрелки указывают на более короткие виды РНК L1.Эксперимент повторили трижды с аналогичными результатами. Актин служил контролем загрузки. Стандарты размера РНК (~ kb) показаны справа от изображения блота. Нижняя панель: Количественная оценка полос нозерн-блоттинга. Ось X показывает конструкцию экспрессии кДНК, котрансфицированную pJM101 / L1.3Δneo. Ось Y показывает относительную интенсивность полосы, нормализованную для контролей pCEP4 (100%). Черные полосы представляют собой полноразмерную полосу L1. Синие и желтые полосы представляют меньшие полосы РНК L1, соответствующие цветным стрелкам, соответственно, на верхней панели.Результаты представляют собой среднее значение трех независимых экспериментов. Планки погрешностей представляют собой стандартные отклонения. (C) Схема pJBM2TE1 : Конструкция содержит метку эпитопа Т7 на карбоксильном конце ORF1p и метку TAP на карбоксильном конце ORF2p. Кассета индикатора ретротранспозиции mneoI находится в 3 ’UTR. pJMB2TE1 экспрессируется из остова pCEP4, который был модифицирован для содержания селектируемого маркера пуромицина. Промотор CMV увеличивает экспрессию L1, а сигнал полиаденилирования (pA) SV40 располагается ниже нативного сигнала полиаденилирования L1. (D) ZAP-S снижает накопление белков, кодируемых L1. : клетки HeLa котрансфицировали pJBM2TE1 и плазмидами, указанными над каждой полосой. UTF указывает на нетрансфицированные клетки HeLa и служит отрицательным контролем.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *