Лс расшифровка: Что значит ЛС?

Содержание

3. Термины и определения, сокращения и условные обозначения / КонсультантПлюс

Определение

Расшифровка определения

иммунобиологические лекарственные препараты

лекарственные препараты, предназначенные для формирования активного или пассивного иммунитета либо диагностики наличия иммунитета или диагностики специфического приобретенного изменения иммунологического ответа на аллергизирующие вещества. К иммунобиологическим лекарственным препаратам относятся вакцины, в том числе вакцина для профилактики новой коронавирусной инфекции COVID-19, анатоксины, токсины, сыворотки, иммуноглобулины и аллергены

«пассивный» термоконтейнер

термоконтейнер изотермического типа, где в качестве хладагентов используются хладоэлементы

стандартная операционная процедура

документ, содержащий описание обязательных для выполнения стандартных действий и/или операций, выполняемых в организации

термоконтейнер

емкость для хранения и перевозки термолабильных лекарственных средств, предназначенная для их защиты от воздействия высоких или низких температур окружающей среды

терморегистратор

средство измерения температуры, предназначенное для измерения, автоматической записи, хранения и воспроизведения на электронном и/или бумажном носителе значений температуры (в пределах установленной погрешности) с привязкой к реальной шкале времени

термоиндикатор

средство для выявления нарушений температурного режима, предназначенное для однозначного установления и отображения факта нарушения конкретного температурного интервала в течение определенного времени или факта отсутствия такого нарушения

ответственное лицо

лицо, ответственное за внедрение и обеспечение системы качества, осуществляющее мониторинг эффективности системы качества и актуализацию стандартных операционных процедур

ЭпиВакКорона

Вакцина на основе пептидных антигенов для профилактики COVID-19

первый уровень «холодовой цепи»

доставка ИЛП от организации-изготовителя до организаций оптовой торговли лекарственными средствами, включая этап таможенного оформления

второй уровень «холодовой цепи»

хранение ИЛП организациями оптовой торговли лекарственными средствами и доставка ИЛП до других организаций оптовой торговли лекарственными средствами, городских и районных (сельских) аптечных организаций, медицинских организаций, индивидуальных предпринимателей, имеющих лицензию на фармацевтическую или медицинскую деятельность.

третий уровень «холодовой цепи»

Хранение ИЛП городскими и районными (сельскими) аптечными организациями, медицинскими организациями, индивидуальными предпринимателями, имеющими лицензию на фармацевтическую или медицинскую деятельность, и доставка ИЛП до медицинских организаций или их обособленных подразделений (например, участковых больниц, амбулаторий, поликлиник, родильных домов) или иных организаций (например, медицинских кабинетов образовательных и других организаций), использующих ИЛП, а также розничная реализация ИЛП

четвертый уровень «холодовой цепи»

хранение ИЛП в медицинских организациях или их обособленных подразделениях (например, участковых больницах, амбулаториях, поликлиниках, родильных домах), иных организациях (медицинских кабинетах образовательных и других организаций), где используются ИЛП

Базовая ставка, стоимость по новым тарифам

Чтобы корректно посчитать ОСАГО, необходимо учитывать следующие параметры:

Предельные размеры базовых ставок страховых тарифов (их минимальные и максимальные значения, выраженные в рублях) устанавливаются Банком России в зависимости от технических характеристик, конструктивных особенностей транспортного средства, собственника транспортного средства (физическое или юридическое лицо), а также от назначения и (или) цели использования транспортного средства (транспортное средство специального назначения, транспортное средство оперативных служб, транспортное средство, используемое для бытовых и семейных нужд либо для осуществления предпринимательской деятельности (такси).

В границах минимальных и максимальных значений базовых ставок страховых тарифов страховщики с учётом используемых у них факторов применяемых для установления базовых ставок страховых тарифов, устанавливают значения базовых ставок страховых тарифов применяемых при расчете страховой премии по договору ОСАГО.

Мощность двигателя ТС. Чем больше показатель, тем выше расчетный коэффициент мощности (КМ). Так, если для транспортных средств с двигателями до 50 л. с. он составит 0,6, то для авто мощностью более 150 л. с. КМ увеличивается до 1,6.

Территория преимущественного использования (КТ). Водители в крупных городах чаще попадают в аварии, чем жители сельской местности. Поэтому для мегаполисов коэффициент выше, чем для регионов. Например, страховые тарифы ОСАГО в 2019 году для автовладельцев из Москвы включают территориальный коэффициент 1,99, а для подмосковных водителей — уже 1,63.

Возраст и стаж водителя (КВС). Чем меньше возраст и стаж автовладельца, тем выше будет стоимость полиса. Если он оформляется на несколько водителей, коэффициент КВС будет определяться по самому младшему и неопытному из них. А при открытом полисе полисе (это т.н. неограниченный список) коэффициент составит 1,94.

Число водителей, допущенных к управлению ТС (КО). При неограниченном списке базовый страховой тариф ОСАГО умножают на коэффициент КО=1,94. При отражении в полисе ограниченного перечня лиц — на 1,0, при условии, что эти водители имеют достаточный возраст и стаж.

Аварии в прошлом (бонус-малус, или КБМ). Безаварийная езда дает право на скидку. При аккуратном вождении в течение года стоимость полиса снижается на 5 %, в течение двух лет подряд — на 10 % и так далее. Максимально страховые тарифы ОСАГО могут быть снижены на 50 % в течение 10 лет.

Период использования транспортного средства (КС). Он отражает период времени в течение календарного года, на протяжении которого будет использоваться авто. Минимальный период использования в договорах с физлицами составляет 3 месяца.

Департамент лекарственных средств — Регистрация ЛС и МИ

Регистрация ЛС и МИ

Лекарственные средства

 

Нормативные правовые акты:

 

Закон Кыргызской Республики от 2 августа 2017 года № 165 «Об обращении лекарственных средств».

 

Порядок государственной регистрации лекарственных средств для медицинского применения, утвержденный Постановлением Правительства
КР «О некоторых вопросах, связанных с государственной регистрацией в  сфере обращения лекарственных средств»  №405 от 28 августа 2018.


Лекарственные средства ввозятся, производятся, реализуются и используются на территории Кыргызской Республики если они прошли процедуру государственной регистрации (Закон Кыргызской Республики от 2 августа 2017 года № 165 «Об обращении лекарственных средств» ст. 9.).

 

 

Обращение лекарственных средств — разработка, доклинические и клинические исследования (испытания), экспертиза, регистрация, фармаконадзор, контроль качества, производство, изготовление, транспортировка, хранение, отпуск, реализация, передача, применение, уничтожение лекарственных средств, а также ввоз на территорию Кыргызской Республики и вывоз с территории Кыргызской Республики.

 

Государственная регистрация лекарственного средства — процесс получения разрешения для медицинского применения лекарственного средства на территории Кыргызской Республики.

 

Держатель регистрационного удостоверения — юридическое лицо, на имя которого выдано регистрационное удостоверение о государственной регистрации лекарственного средства.

 

Заявитель — юридическое лицо, правомочное подавать заявление на государственную регистрацию, подтверждение регистрации, внесение изменений в регистрационное досье лекарственных препаратов, иные процедуры, связанные с регистрацией.

 

Лекарственное средство — средство, представляющее собой или содержащее вещество или комбинацию веществ, вступающее в контакт с организмом человека, предназначенное для профилактики заболеваний человека, лечения или восстановления, коррекции или изменения его физиологической функции посредством фармакологического, иммунологического либо метаболического воздействия или для диагностики заболеваний и состояний человека.

 

Регистрационное досье лекарственного препарата — комплект документов, представляемых для проведения процедур регистрации лекарственного средства, подтверждения регистрации лекарственного средства.

 

Экспертиза — комплексная, всесторонняя, междисциплинарная оценка регистрационного досье лекарственного препарата, направленная на обеспечение соответствия его научным и доказательным стандартам безопасности, эффективности и качества

 

Регистрационное удостоверение о государственной регистрации лекарственного средства — документ единой формы, выдаваемый уполномоченным государственным органом Кыргызской Республики в области здравоохранения, подтверждающий факт регистрации и являющийся разрешением для медицинского применения лекарственного средства на территории Кыргызской Республики.

 

Регистрационный номер — кодовое обозначение, присваиваемое лекарственному средству при регистрации, под которым оно вносится в Государственный реестр лекарственных средств Кыргызской Республики и сохраняется неизменным в течение всего периода пребывания лекарственного средства на территории Кыргызской Республики.

 

Государственная регистрация лекарственных средств проводится уполномоченным органом в течение 180 календарных дней с даты приема заявления и документов регистрационного досье лекарственного препарата.

 

Ускоренная экспертиза лекарственного средства проводится уполномоченным органом в течение 45 календарных дней со дня подачи заявителем заявления о проведении государственной регистрации.

 

Подтверждение государственной регистрации лекарственного средства осуществляется на основании переоценки соотношения «польза — риск», проводимой уполномоченным органом в течение 90 календарных дней со дня подачи заявителем заявления.

 

 

 1. Заявление на регистрацию/подтверждение регистрации лекарственного средства

 

2. Перечни документов:

 

1) Перечень документов, необходимый для регистрации оригинального лекарственного средства.

2) Перечень документов, необходимый для регистрации биоаналогичного лекарственного средства (биосимиляр).

3) Перечень документов, необходимый для регистрации генерического лекарственного средства.

4) Перечень документов, необходимый для регистрации гибридного лекарственного средства.

5) Перечень документов, необходимый для регистрации растительного лекарственного средства.

6) Перечень документов, необходимый для регистрации гомеопатического лекарственного средства.

7) Перечень документов, необходимый для регистрации вакцин 

3. Образец оформления НД по качеству: 

Образец НД ГП КР

Медицинские изделия

Порядок государственной регистрации лекарственных средств для медицинского применения, утвержденный Постановлением Правительства
КР «О некоторых вопросах, связанных с регистрацией медицинских изделий » №311 от 05 июля 2018.

 

Перечни документов:

1.Перечень документов, необходимых для регистрации медицинского изделия

2.Перечень изменений, вносимых в регистрационное досье медицинского изделия в период действия регистрационного удостоверения и не требующих новой регистрации

3.Заявление о внесении изменений в регистрационное досье медицинского изделия

4.Заявление о проведении регистрации медицинского изделия

 

 

Об утверждении общих требований безопасности и эфективности медицинских изделий, требований к их маркеровке и эксплуатационной документации на них №27 от 12 февраля 2016 года

 

 

Личный кабинет

Личный кабинет абонента МУП «Сочитеплоэнерго» позволяет Вам:
  • просмотреть состояние своего лицевого счета
  • ввести показания счетчиков
  • распечатать квитанцию
  • просмотреть расшифровку начислений и оплат

Личный кабинет доступен по адресу: https://abonent.sochi-teplo.ru  

Для расшифровки необходимо щёлкнуть на соответствующей сумме в таблице, и внизу экрана появится дополнительная информация. Для начислений это потребленные объемы и суммы, а для оплат — дата платежа, сумма, учреждение, через которое прошла оплата, и переданные абонентом показания.

Чтобы воспользоваться услугами Личного кабинета, необходимо пройти процедуру регистрации в системе.

Для регистрации Вам потребуется указать пароль, номер мобильного телефона и адрес Вашего электронного почтового ящика, на который придёт ссылка для подтверждения электронной почты.

Название Вашего электронного почтового ящика является логином к личному кабинету!

Для регистрации Вам необходимо знать номер своего лицевого счета в МУП «Сочитеплоэнерго» и пин-код лицевого счета.
Не следует вводить:

  • Единый лицевой счет МУП г. Сочи «ГорИВЦ». Единый лицевой счет является числом от 500.000 до 690.000. Лицевые счета МУП «Сочитеплоэнерго» в большинстве случаев — это числа в пределах от 1 до 100.000;
  • лицевой счет других поставщиков услуг. МУП «Сочитеплоэнерго» предоставляет услуги горячего водоснабжения и отопления и не предоставляет услуги газоснабжения и снабжения электроэнергией. Если Вы пытаетесь ввести номер лицевого счета длинной 8-11 символов, Вы, скорее всего, ошиблись.

Как узнать номер Вашего лицевого счета МУП «Сочитеплоэнерго»:

1. Номер ЛС указан на «Единой квитанции» МУП г. Сочи «ГорИВЦ»

Номер ЛС указан в нижней части квитанции, в списке поставщиков услуг:

2. Номер ЛС и пин-код лицевого счета указаны на квитанции МУП «Сочитеплоэнерго»:

3. Вы можете узнать Ваши лицевой счет и пин-код к лицевому счету по телефону 862-251-11-10 или через Форму обратной связи.

ВНИМАНИЕ!!! При продаже квартиры или смене места жительства просьба сообщить об этом через Форму обратной связи, чтобы мы могли удалить Вашу регистрацию в личном кабинете.

Федеральная служба по надзору в сфере здравоохранения

Маркировка лекарственных препаратов

Пунктом 5 Перечня поручений Президента Российской Федерации по итогам совещания с членами Правительства Российской Федерации от 04.02.2015 дано поручение  обеспечить разработку и поэтапное внедрение автоматизированной системы мониторинга движения лекарственных препаратов от производителя до конечного потребителя с использованием маркировки (кодификации) и идентификации упаковок лекарственных средств  в целях обеспечения эффективного контроля качества ЛС, находящихся в обращении, и борьбы с их фальсификацией.

Основные цели маркировки и мониторинга движения лекарственных препаратов.

Для государства:

— профилактика поступления в оборот и одномоментное изъятие из оборота в автоматизированном режиме на всей территории Российской Федерации недоброкачественных, а также фальсифицированных и контрафактных лекарственных препаратов на любом из этапов их обращения от производителя до конечного потребителя;

— профилактика неэффективных расходов и экономия бюджетных средств за счет невозможности реализации схем «повторного вброса» лекарственных препаратов, невозможности легальной реализации лекарственных препаратов, подлежащих предметно-количественному учету, а также не предназначенных для розничной продажи;

— контроль адресности движения препаратов, закупаемых за счет бюджета, расходов на их приобретение; мониторинг ценообразования и предельных розничных цен на лекарственные препараты из списка ЖНВЛП;

— оперативное планирование и управление запасами и резервами препаратов на всех уровнях, включая стратегический.

Для населения:

— возможность с помощью персонального мобильного устройства лично проверить легальность приобретаемого (получаемого) лекарственного препарата.

Для бизнеса:

— снижение издержек за счет более эффективного управления логистикой; уменьшение упущенной выгоды, обусловленной контрафактной и фальсифицированной продукцией; соответствие требованиям для поставок продукции на международные рынки.

Информация по внедрению системы мониторинга размещена и регулярно обновляется на официальном сайте Росздравнадзора в разделе «Система маркировки лекарственных препаратов»  и на официальном сайте оператора системы ООО «Оператор-ЦРПТ» по ссылке:  https://честныйзнак.рф/business/projects/medicines/ 

X7 или X9 — Какая линейка моторных масел подойдет именно тебе?

X7 или X9 — Какая линейка моторных масел подойдет именно тебе?

Как у любого производителя, у ZIC есть моторные масла, предназначенные для самых разных потребителей — от масс-маркета до премиального класса. Все линейки включают в себя сразу несколько типов продукта. Самый простой способ сориентироваться, посмотреть на цифру на упаковке — чем она выше, тем выше класс масла. На полках российских автомагазинов вы можете увидеть канистры с маркировками Х5, Х7 и Х9, а также масло серии ТОР — продукт высшей градации. Эти линейки отличаются прежде всего типом используемого базового масла, а также качеством и количеством присадок, которые включены в состав конечного продукта. Все эти параметры определяют свойства масла, его ресурс и стоимость.

Практически все базовые масла производятся из нефти, это позволяет считать их одновременно произведенными из минерального сырья, и синтетическими продуктами, так как получаются они посредством синтеза. Поэтому эксперты ориентируются прежде всего на индекс вязкости, а также возможность использовать конкретное масло в конкретном двигателе согласно рекомендациям или допускам производителя. Но рядовому покупателю проще, когда используются устоявшиеся понятия — «минералка», «синтетика», «полусинтетика». Такую классификацию используют все производители, в том числе и ZIC, причем в разных странах маркировка одной и той же серии может отличаться.

Так, в Южной Корее масло серии Х5 — обозначают как «синтетик», Х7 — как «фулли-синтетик», Х9 — «100% синтетик», а TOP — «ПАО 100% синтетик». В России мы придерживаемся привычной для рынка классификации. Так, линейка Х5, сделанная на синтетической основе Yubase III группы API, обозначается как «полусинтетика» — в ассортименте любого производителя смазочных материалов, работающего в нашей стране, обязательно должна быть линейка полусинтетических масел. Это самые продаваемые масла — массовый продукт по доступной цене.

В России принята следующая классификация:

TOP — PAO Fully Synthetic. Основа масел этой серии — Yubase Plus, с добавлением ПАО до 30%.
X9 — Fully Synthetic. Основа — Yubase Plus.
X7 — Synthetic. Основа — Yubase.
X5 — Semisynthetic. Основа — Yubase.

В чем же принципиальное отличие всех этих линеек моторных масел? Их два. Во-первых, это состав масла — речь о качестве и количестве базовых масел, а также присадок и добавок. Состав масла, в свою очередь, обеспечивает уровень его эксплуатационных свойств и запас качества. Во-вторых, надо понимать, что масла разных линеек отличаются наличием официальных одобрений автопроизводителей или соответствием этим требованиям.

Низкозольные и «экономичные» масла

Одним из ключевых параметров масла является его зольность. Мы выпускаем масла двух типов зольности — полнозольные (так называемая «классика») и низкозольные (класс LS).

LS — это сокращение от low-SAPS, Low-Sulphated Ash, Phosphorus and Sulphur, в переводе на русский — «с пониженным содержанием сульфатной золы, фосфора и серы».

Масла LS позволяют сохранить ресурс систем нейтрализации отработанных газов, в частности, трехкомпонентных катализаторов и сажевых фильтров как на бензиновых, так и на дизельных двигателях. Такие системы установлены на современных автомобилях, соответствующих четвертому, пятому и шестому экологическим классам, то есть, фактически, речь идет обо всех автомобилях, выпускаемых с 2010 года. И всем этим автомобилям нужны низкозольные масла.

И полнозольные, и низкозольные масла одинаково хорошо защищают от износа. Но в полнозольных используются проверенные временем и недорогие AW-присадки — как правило, дитиофосфат цинка. В состав низкозольных масел же, из-за ограничений на использование фосфора, входят более дорогие вещества. Поэтому такое масло особенно популярно в регионах, где порой встречается топливо ниже четвертого экологического класса, в то время как в Москве и области давно заправляют только топливом Евро-5.

Существует мнение, что полнозольные масла нельзя заливать в современные двигатели, но это не совсем так. Допускается использование таких масел и на современных автомобилях, если сам производитель это разрешает наряду с применением масел «low-SAPS».

Теперь про экономичные масла класса FE (от Fuel Economy, в переводе на русский — топливная экономичность). Такие масла при рабочих температурах чуть более жидкие, таким образом снижается толщина масляной пленки в пятне контакта поршневого кольца и стенки цилиндра. Благодаря этому потери на трение снижаются на 1-3%, что ведет к соответствующей топливной экономии.

Считается, что при больших нагрузках, «классические» масла работают лучше, чем «экономичные». Но некоторые производители, в том числе уже упомянутый Ford, а также Jaguar Land Rover, изначально разрабатывают свои двигатели под масла такого типа.

Производителями автомобилей провели испытания, которые подтвердили, что ресурс двигателя не снижается при использовании масел класса FE. Получается, что при использовании рекомендуемых типов масел, производители гарантируют сохранение надежности двигателя. Такие масла заливаются как в бензиновые, так и в дизельные двигатели.

В любом случае, необходимо следовать рекомендациям автопроизводителя и проверять соответствие масел минимальным требованиям, указанным в инструкции по эксплуатации двигателя.

Масла ZIC серии TOP

Линейка TOP — наиболее совершенные и дорогие масла ZIC. В серии два продукта. Оба созданы на основе премиального базового масла Yubase Plus, в которое добавлено до 30% полиальфаолефинов и пакет высококачественных присадок.

Первый продукт — «экстремальное» масло 0W-40, которое может использоваться в любых климатических условиях, во всех широтах и поясах. Под «экстремальностью» мы понимаем сохранение своих свойств как при сверхнизких, так и при сверхвысоких температурах. Это масло имеет допуски API SN, ACEA A3/B3, A3/B4, Volkswagen/AUDI/Skoda 502.00/505.00, а также соответствует требованиям MB 229.5, BMW LL-01, Renault RN 0700/0710, Ford WSS M2C937-A, Porsche A-40.

Второй продукт — имеет популярную у автовладельцев вязкость 5W-30. Это масло имеет допуски API SN, ACEA C3, Volkswagen/AUDI/Skoda 504.00/507.00, MB-Approval 229.51, Porsche C-30, а также соответствует требованиям BMW LL-04. Основное, на что стоит обратить внимание — допуск от VAG. Это значит, что масло сохраняет свои свойства на протяжении сервисного интервала до 30 тысяч километров.

Масла ZIC серии X9

Масла ZIC серии Х9 делятся на три класса: LS, FE и так называемая «классика».

В этой серии мы предлагаем два продукта класса LS. Это полностью синтетические моторные масла ZIC X9 LS 5W-30 и ZIC X9 LS Diesel 5W-40, имеющие допуски API SN, ACEA C3, Volkswagen/AUDI/Skoda 505.00/505.01, MB-Approval 229.52, 229.51 и GM dexos2, и соответствующие требованиям BMW LL-04.

«Дизельное» масло, в свою очередь, дополнительно соответствует требованию Porsche A-40, но, по большому счету, нет никакой разницы между маслами для бензиновых и дизельных двигателей современных легковых автомобилей. Разница разве, что только в надписи на канистре: многим владельцам таких авто нравится, чтобы на упаковке было четко указано — «Дизель». Производители без проблем идут водителям навстречу, ZIC не исключение.

Продукция ZIC класса FE — масла с повышенной топливной экономичностью. В этой линейке в России продается масло ZIC X9 FE 5W-30 — API SL/CF, ACEA A1/B1, A5/B5, соответствие требованиям Ford WSS-M2C913-C/D, Jaguar-Land Rover STJLR 03.5003, Renault-Nissan RN 0710.

В «классической» линейке ZIC X9 на полках российских автомагазинов присутствует два масла с различной вязкостью — 5W-30 и 5W-40. «Классическая» — означает «full-SAPS», то есть это полнозольные масла. Сегодня это самый популярный товар из всей линейки, и предназначен он для автомобилей выпуска до 2012 года, на которых не установлены современные системы очистки выхлопных газов, продвинутые катализаторы, сажевые фильтры. Такое масло имеет допуски API SL/CF (5W-30) и API SN/CF (5W-40), ACEA A3/B3, A3/B4, Volkswagen/AUDI/Skoda 502.00/505.00, MB-Approval 229.5, Renault RN 0700/0710, а еще оно соответствует требованиям BMW LL-01 и Opel GM-LL-B-025.

Масла ZIC серии X7

Это синтетические масла, сделанные полностью на основе базовых масел Yubase, и имеющие отличное соотношение цены и качества. Как и в других сериях, тут есть несколько внутренних категорий: FE, LS, Diesel и LPG.

Класс FE — «экономичные» масла ZIC X7 FE 0W-20 и 0W-30 — API SN PLUS, SN-RC и ILSAC GF-5, а также соответствуют требованиям GM dexos1 Gen2. Этот продукт предназначен прежде всего для автомобилей японского и корейского производства, а также всего модельного ряда Chevrolet и Opel.

Нас часто спрашивают, «Почему у вас в линейке нет масла 5W-20?» Ответ прост: зачем 5W-20, когда есть 0W-20! По возможностям применения и рабочим температурам они одинаковы, при этом, масло 0W-20 гораздо лучше выдерживает низкотемпературные пуски, обеспечивая дополнительную экономию топлива на 0,5-1%. Масло 0W-30, кстати, очень хорошо подходит для снегоходов с четырехтактными двигателями. Оно обладает отличными низкотемпературными свойствами и соответствует требованиям производителей таких транспортных средств.

Класс LS — это наш главный бестселлер. Это самые продаваемые малозольные масла ZIC, одно из лучших предложение на российском рынке по уровню цена-качество. Линейка представлена несколькими вариантами продуктов, отличающихся вязкостью:
— 5W-30 — API SN/CF, ACEA C3, соответствие требованиям VW 502.00/505.00, MB 229.51, BMW Longlife-04, GM dexos2;
— 10W-40 — API SN/CF, ACEA C3, соответствие требованиям VW 502.00/505.00, MB 229.3, BMW Longlife-01, Renault-Nissan RN 0700;
— 10W-30 — API SN/CF, ACEA C3, соответствие требованиям VW 502.00/505.00, MB 229.1, BMW Longlife-01.

Масла серии X7, специально предназначенные для использования в дизельных двигателях, обозначены зеленым кружком с надписью Diesel. Важное требование для использования масел ZIC X7 Diesel — отсутствие сажевых фильтров. Для современных двигателей с сажевыми фильтрами необходимо применять масла серии LS с пониженной зольностью:
— 5W-30 — API CF/SL, ACEA A3/B3, A3/B4, соответствие требованиям VW 502.00/505.00, MB 229.3, Renault-Nissan RN 0710, Opel GM-LL-A-025, GM-LL-B-025;
— 10W-40 — API CI-4/SL, ACEA E7, A3/B3, A3/B4, соответствие требованиям MB 228.3, JASO DH-1.

Масло X7 LPG 5W-30 класса LPG предназначено для двигателей, переоборудованных на использование газового топлива — API SN, SN-RC, ILSAC GF-5.


Porsche Panamera Turbo S — Porsche Россия

Автоматический 4-зонный климат-контроль регулируется с передних и задних сидений. Для пассажиров возможна раздельная настройка температуры, скорости вращения вентилятора и распределения воздуха.
Встроенный фильтр с активированным углем
Автоматически поднимающаяся шторка на заднем окне
Лобовое стекло с серой полоской в верхней части
Многослойные стекла с тепло- и звукоизоляцией
4 индивидуальных сиденья с удлиненной центральной консолью и подлокотником сзади
14-позиционные комфортные передние сиденья с функцией памяти. Электрорегулировка: высоты, продольного положения сидения, угла наклона подушки и спинки, глубины сидения. 4-позиционная поддержка поясницы для водителя и переднего пассажира, электрорегулировка рулевой колонки. Карманы в спинках сидений.
Расширенная функция памяти положения передних сидений, рулевой колонки, боковых зеркал и других персональных настроек
Интегрированные подголовники (спереди и сзади), передние — с тиснением логотипа ‘turbo S’
Задние сиденья с откидывающимся центральным подлокотником и асимметричным складыванием спинок в пропорции 60/40
Подогрев передних и задних сидений
Кожаный салон стандартного цвета, отделка гладкой кожей, в комбинации с другими материалами
Центрально расположенный аналоговый тахометр с черным циферблатом и логотипом ‘turbo S’
Два цветных дисплея высокого разрешения на приборной панели
Подлокотник на центральной консоли спереди со встроенным отсеком для хранения
Спортивное многофункциональное рулевое колесо GT с лепестками переключения передач и с подогревом. Обод с отделкой гладкой кожей, крестообразной декоративной строчкой и упорами для больших пальцев. Декоративные вставки на спицах черного цвета, с винтами.
Рулевая колонка с электрорегулировкой по вылету и высоте
Потолок, включая солнцезащитные козырьки, накладки на стойках A, B (верхняя секция) и C, с отделкой алькантарой
Пакет отделки элементов салона темным ореховым деревом: накладка на передней панели и накладки на дверных панелях спереди и сзади. Примечание: вследствие того, что дерево – натуральный материал, возможна вариация оттенка и текстуры.
Накладки на пороги из матового алюминия, с логотипом модели спереди
Напольные коврики
Отсеки для хранения в салоне (могут варьироваться в зависимости от выбранной комплектации): перчаточный ящик, отсеки для хранения в передней центральной консоли, отсеки для хранения в передних и задних дверях, отсек для хранения в центральной консоли и в подлокотнике в задней части салона
2 встроенных подстаканника в переднем центральном подлокотнике
Крышки подстаканников (спереди)
2 встроенных подстаканника в задней центральной консоли
Выдвижная гибкая шторка багажника
Увеличенное число отсеков для хранения
Система Porsche Side Impact Protection (POSIP), включающая боковые защитные элементы в дверях и подушки безопасности для защиты грудной клетки, интегрированные в боковые валики каждого переднего сиденья
Полноразмерные подушки безопасности для водителя и переднего пассажира
Коленные подушки безопасности для водителя и переднего пассажира
Боковые подушки безопасности спереди
Подушки безопасности занавесочного типа, покрывающие боковые окна от стойки А до стойки С (справа и слева)
Комплект для установки детского сиденья с креплением стандарта ISOFIX на задних сиденьях
Противоугонная система с функцией контроля пространства салона
Система экстренного вызова (ЭРА-ГЛОНАСС)

%PDF-1.4 % 6 0 объект > эндообъект внешняя ссылка 6 135 0000000016 00000 н 0000003371 00000 н 0000003447 00000 н 0000003573 00000 н 0000004702 00000 н 0000004736 00000 н 0000004781 00000 н 0000004825 00000 н 0000004869 00000 н 0000004913 00000 н 0000004957 00000 н 0000005001 00000 н 0000005045 00000 н 0000005089 00000 н 0000005133 00000 н 0000005178 00000 н 0000005223 00000 н 0000005266 00000 н 0000005311 00000 н 0000005356 00000 н 0000005401 00000 н 0000005446 00000 н 0000005491 00000 н 0000005536 00000 н 0000005581 00000 н 0000005625 00000 н 0000005669 00000 н 0000005713 00000 н 0000005757 00000 н 0000005801 00000 н 0000005845 00000 н 0000005889 00000 н 0000005933 00000 н 0000005977 00000 н 0000006021 00000 н 0000006065 00000 н 0000006107 00000 н 0000006149 00000 н 0000006194 00000 н 0000006239 00000 н 0000006284 00000 н 0000006329 00000 н 0000006374 00000 н 0000006419 00000 н 0000006464 00000 н 0000006509 00000 н 0000006553 00000 н 0000006597 00000 н 0000007155 00000 н 0000009824 00000 н 0000010616 00000 н 0000012109 00000 н 0000012961 00000 н 0000029707 00000 н 0000030559 00000 н 0000038264 00000 н 0000039116 00000 н 0000062419 00000 н 0000063271 00000 н 0000067368 00000 н 0000068220 00000 н 0000093377 00000 н 0000094229 00000 н 0000101309 00000 н 0000102161 00000 н 0000130500 00000 н 0000131352 00000 н 0000137579 00000 н 0000138431 00000 н 0000164474 00000 н 0000165266 00000 н 0000166693 00000 н 0000166770 00000 н 0000167074 00000 н 0000167126 00000 н 0000167313 00000 н 0000168150 00000 н 0000170274 00000 н 0000171126 00000 н 0000182759 00000 н 0000183515 00000 н 0000184933 00000 н 0000185785 00000 н 0000200980 00000 н 0000201832 00000 н 0000207245 00000 н 0000208097 00000 н 0000228623 00000 н 0000229472 00000 н 0000232362 00000 н 0000233214 00000 н 0000246020 00000 н 0000246869 00000 н 0000250662 00000 н 0000251514 00000 н 0000255321 00000 н 0000256174 00000 н 0000264304 00000 н 0000265157 00000 н 0000269559 00000 н 0000270412 00000 н 0000279417 00000 н 0000280207 00000 н 0000281759 00000 н 0000282612 00000 н 0000293626 00000 н 0000294476 00000 н 0000297464 00000 н 0000298317 00000 н 0000310848 00000 н 0000311638 00000 н 0000313343 00000 н 0000314196 00000 н 0000322964 00000 н 0000323811 00000 н 0000326597 00000 н 0000327450 00000 н 0000334225 00000 н 0000334294 00000 н 0000334523 00000 н 0000335376 00000 н 0000349813 00000 н 0000350666 00000 н 0000356632 00000 н 0000357485 00000 н 0000375727 00000 н 0000376580 00000 н 0000380917 00000 н 0000381770 00000 н 0000397041 00000 н 0000397891 00000 н 0000401006 00000 н 0000401859 00000 н 0000412259 00000 н 0000002996 00000 н трейлер ]>> startxref 0 %%EOF 140 0 объект>поток xb«ha`a

Ключ к стенограмме академических записей

Приведенная ниже информация является кратким изложением информации на обратной стороне официальной стенограммы Канзасского университета.Полный PDF-файл сопроводительного документа доступен внизу этой страницы.


Академический календарь

Календарь Канзасского университета основан на семестровой системе. Стандартный семестр включает не менее 16 недель обучения, включая выпускные экзамены. Летние сессии различаются по продолжительности.
Академические календари на этот семестр, будущие и прошлые семестры можно найти в Академическом календаре


Аккредитация

Канзасский университет аккредитован Высшей учебной комиссией в качестве учебного заведения, присуждающего степени бакалавра, магистра, специалиста и доктора наук.


Подлинность бумажных выписок

Канзасский университет применяет ряд мер безопасности для обеспечения подлинности стенограмм:

  1. Цвет фона лицевой стороны стенограммы должен содержать несколько повторений слов «The University of Kansas», напечатанных очень мелким шрифтом.
  2. При фотокопировании лицевой стороны слово «Копия» должно быть напечатано очень крупным шрифтом на лицевой стороне.
  3. Если на лицевую сторону нанесен жидкий отбеливатель, надпись «VOID» должна появиться на шести разных языках.
  4. На оборотной стороне имеется коричневое плетение, а также водяной знак, который появляется, если держать его под углом.
  5. Дальнейшую аутентификацию можно получить, позвонив по телефону 785-864-4423.

Любое изменение или модификация стенограммы или любой ее копии может представлять собой уголовное преступление и/или привести к дисциплинарным взысканиям учащихся.


Подлинность электронных (pdf) расшифровок

Мы применяем цифровую подпись к стенограмме PDF, которая автоматически проверяется.Мы внедряем сертифицированные службы обработки документов от Verisign®, чтобы помечать документ как подлинный, подтверждая, что он был создан и опубликован Канзасским университетом. Цифровая подпись представляет собой защищенную от подделки оболочку документа. Печать с синей лентой должна присутствовать как для подтверждения подлинности, так и для демонстрации целостности документа. Это автоматически проверяется, когда получатель просматривает подлинный документ с помощью бесплатной программы Adobe® Reader.

Если вы не видите сертификационную голубую ленту в Adobe® Acrobat или Adobe® Reader со словами «Этот документ был сертифицирован Канзасским университетом с действительным сертификатом, выданным GeoTrust CA для Adobe», этот PDF-файл не следует принимать .


Расположение кампуса

Регистратор университета — Канзасский университет
KU Visitor Center, 1502 Iowa St.
Lawrence, Kansas 66045-7535
ФАКС: 785-864-3900

ИЛИ (для студентов КУМС)

Медицинский центр Канзасского университета
Служба регистрации
Почтовый ящик 4005
3901 Rainbow Boulevard
Kansas City, KS 66160
ФАКС: 913-588-8841


Система нумерации курсов

Ниже представлена ​​система нумерации курсов, используемая с весны 1974 года в Канзасском университете:

.
1-99

Курсы, не применимые к любой степени

100-299

Курсы для первокурсников/второкурсников

300-499

Младшие/старшие курсы

500-699

Курсы, предназначенные в первую очередь для юниоров и пожилых людей.
Может также использоваться для зачета после получения степени бакалавра.

700-799

Курсы, предназначенные в первую очередь для студентов первого года обучения после получения степени бакалавра.
Доступно также для студентов бакалавриата.

800-899

Курсы, предназначенные в первую очередь для студентов первого года обучения после получения степени бакалавра.

900-999

Курсы, предназначенные в первую очередь для студентов после первого года обучения после получения степени бакалавра.


Система нумерации курсов: с осени 1929 г.** по осень 1973 г.

1-49

Курсы для первокурсников/второкурсников

50-99

Младшие/старшие курсы

100-199

Курсы для младших/старших/выпускников

200-299

Старшие/выпускные курсы

300-399

Высшие курсы

**До осени 1929 г. см. соответствующий каталог.


Знак отличия

Отличие присуждается школой или программой, в которой обучается учащийся.


Электронная заверенная выписка в формате PDF

Ответственность за подтверждение того, что получатель примет доставку электронной стенограммы в формате PDF, лежит на отправителе запроса стенограммы. Если вы заказываете электронную стенограмму в формате PDF, а получатель не принимает ее, все расходы не подлежат возврату.

  • 12 долларов США за регулярную обработку стенограммы.За приоритетную обработку стенограммы взимается дополнительная плата в размере 15 долларов США.
  • Электронные стенограммы в формате PDF доступны для загрузки на срок до 30 дней. После загрузки и сохранения он может быть доступен для просмотра в течение 90 дней с даты получения. По истечении 90 дней выписку необходимо будет заказать заново. Возврат средств за документы с истекшим сроком действия не производится.
  • Для просмотра всех электронных расшифровок требуется самая последняя версия Adobe Acrobat Reader.
  • Обратите внимание: стенограммы отправляются в электронном виде на адреса электронной почты с военными расширениями (например, us.Army.mil) может быть недоступен для просмотра получателем.

Средний балл успеваемости (GPA)

Средний балл — это частное, полученное путем деления количества заработанных баллов на количество отработанных часов. Академическая политика Университета Канзаса гласит, что средний балл может быть рассчитан для всей академической записи или для любого ее сегмента. Средний балл, отраженный в этой официальной стенограмме, сегментирован в соответствии с указанной студенческой карьерой.


Оценочные шкалы и оценки

Все школы, кроме медицины

Марка

Весы

А

4.0

А-

3,7

Б+

3,3

Б

3,0

Б-

2,7

С+

2.3

С

2,0

С-

1,7

Д+

1,3

Д

1,0

Д-

0.7

Ф

0,0


Шкала оценок для курсов, предлагаемых Медицинской школой

Единый номер

Улучшенный

4,0

ГС

Высокий Удовлетворительный

3,0

S или SA

Удовлетворительно

2.0

ЛС

Низкий Удовлетворительный

1,0

У или ООН

Неудовлетворительно

0,0

ВФ

Снято с ошибкой

0,0

Средний балл за курсы, пройденные в Канзасском университете до осени 1970 года, был основан на 3.0 шкала.


Шкала оценок до лета 1970 г.:

А  

3,0

Б

2,0

С

1,0

Д

0,0

Ф

-1.0

Отрицательные баллы начисляются только один раз за один и тот же курс и не снимаются при получении проходного балла. Недостаток оценок возникает, когда сумма оценок меньше суммы часов, по которым они рассчитываются.


Следующие оценки НЕ учитываются при расчете среднего балла, указанного в этом документе:


S/U Оценка:

С

Удовлетворительно (кроме медицины)

У

Неудовлетворительное (кроме медицины)


Класс CR/NC: (вступает в силу весной 2012 г.)

ЧР    

Кредит.Для школ права и медицины эта оценка означает успешное завершение курса. Для студентов бакалавриата эта оценка эквивалентна «C-» или выше. Для аспирантов эта оценка эквивалентна «C» или выше.

НЗ

Нет кредита. Для школ права и медицины эта оценка отражает неудачную попытку. Для студентов бакалавриата эта оценка эквивалентна «D +» или ниже. Для аспирантов эта оценка эквивалентна C- или ниже.


Высшее отличие

Отличие определяется школой/программой, в которую зачислен учащийся.


Вмещает

Офис регистратора университета не может опубликовать выписку(и), если на вашу запись наложено финансовое удержание. Стенограммы не будут предоставляться студентам, имеющим финансовые или иные обязательства перед Университетом. Пожалуйста, войдите в систему Enroll & Pay, чтобы проверить наличие задержек на вашем счете, или позвоните в офис Bursar’s Office по телефону (785) 864-3322.

 


Знаки отличия

Контракт на курс с отличием предназначен для того, чтобы позволить учащимся выполнять индивидуальную работу в рамках класса без отличия. Контракты на курсы с отличием должны быть одобрены преподавателем курса и университетской программой с отличием. Обозначение с отличием указано для курсов с утвержденными контрактами на курсы с отличием. В наградах используются следующие оценки:

.
С Удовлетворено
Н Не удовлетворен

Выдача академических справок

Официальные академические справки Университета Канзаса составляются и выдаются Офисом регистратора университета и Медицинским центром Университета Канзаса, Офисом регистратора.


Прочие сорта


Е
Отлично (только в аптеке)
I или IC Незавершенная работа со стороны студента
П Удовлетворительный прогресс: промежуточная оценка за курсовую работу, требующую двух или более семестров
ЛП Ограниченный прогресс: промежуточная оценка за часы диссертации и диссертации или утвержденные эквиваленты
СВ Курсовая работа НЕ подлежит оценке
НП Нет прогресса: промежуточная оценка за часы диссертации и диссертации или утвержденные эквиваленты
СП Удовлетворительный прогресс: промежуточная/итоговая оценка за диссертацию и часы работы над диссертацией или их утвержденные эквиваленты
Ш Изъято (использовалось до осени 2006 г. и начиная с осени 2008 г.)
WF Сбой при снятии средств (после осени 2006 г.)
Рабочий стол Снято Прохождение (после осени 2006 г.)
РГ Ожидается сбор класса

Доверенность

Если лицо выдало индивидуальную доверенность на ведение бизнеса от его или ее имени, мы можем принять от назначенного лица письменный запрос на стенограмму.Копия доверенности должна сопровождать письменный запрос на выписку. Доверенности только для медицинских целей будет недостаточно. Пожалуйста, свяжитесь с офисом регистратора университета для получения инструкций и соответствующей формы заказа.


Студенческая карьера

Студенческая карьера определяет тип присуждаемого кредита и назначается на основе академического статуса студента и уровня курсовой работы. Профессии перечислены ниже:
Непрерывное образование
Выпускник
Выпускник KUMC
Право
Медицина
История социального обеспечения (применяется к лету 2003 г. и ранее)
Бакалавриат
Бакалавриат KUMC


Студенческие планы и подпланы

План эквивалентен основному, а подплан представляет собой концентрированное изучение плана.


Студенческие программы

  • Программа – это школа, в которой учащийся получает степень. Программы перечислены следующим образом:
  • Здоровье союзников
  • Прикладной английский*
  • Архитектура и дизайн
  • Искусство
  • Бизнес
  • Образование
  • Машиностроение
  • Журналистика
  • Закон
  • Гуманитарные науки
  • Медицина
  • Музыка
  • Сестринское дело
  • Аптека
  • Социальное обеспечение
  • Специальное университетское образование (без получения степени в KU)

*Эта программа необходима для тех, чей родной язык не английский.Как только студент сдает экзамен на знание английского языка, он исключается из этой программы.


Повторные курсы

Курсы, пройденные до осени 2001 г.: оценки как за первоначальные, так и за повторные курсы учитываются при расчете среднего балла.


Выдача информации

Стенограммы не могут быть переданы третьим лицам без письменного согласия учащегося в соответствии с Законом о правах семьи на образование и неприкосновенность частной жизни от 1974 г. с поправками.


Тестовые кредиты

Тестовые кредиты присуждаются, когда учащийся решает пройти тестирование по данному курсу путем сдачи квалификационного экзамена.Тестовые кредиты не засчитываются для кредита резидента.


Перевод кредита

Переводные кредитные часы добавляются к «заработанным» часам первого эффективного семестра. Если переводная работа была завершена до поступления в Канзасский университет, она будет отражена в течение первого семестра очной формы обучения. Стенограмма Университета Канзаса будет отражать только часы, принятые из других учебных заведений. Семестры, курсы, средний балл и оценки других учебных заведений не будут включены в официальную стенограмму Канзасского университета.Дополнительную информацию о переводных кредитах можно найти на веб-сайте приемной комиссии.


УСМЛЕ

Требования к диплому

для студентов медицинского факультета включают проходной балл по USMLE Step 1 и Step 2.


Нулевые отработанные часы

Если в учетной записи студента отражено нулевое количество заработанных часов, это связано с одной из следующих ситуаций:

  • Курс был пройден в качестве специального студента университета (не стремящегося к получению степени). Курс был пройден, но его нельзя было использовать для получения степени в Канзасском университете.
  • Курс
  • был пройден в рамках непрерывного образования Канзасского университета и, следовательно, не влияет на общий средний балл KU (до осени 2009 г.).
  • Курс был на уровне бакалавриата, пройденным аспирантом.

неполных оценок | L&S Advising

Обзор

Оценка «Незавершенный» (отмеченная «I» в стенограмме) может быть присвоена, когда учащийся с хорошей репутацией в курсе выполнил и сдал большую часть работы, необходимой для курса, но по причинам, не зависящим от учащегося, не может выполнить весь курс.

Неполные оценки могут ставить только преподаватели, и преподаватели не обязаны ставить учащимся неполные оценки.

В тех случаях, когда инструктор соглашается поставить I оценку, важно договориться с инструктором о том, что именно требуется для завершения курса. Просмотрите процедуры Управления регистратора для неполных оценок

Не записывайтесь на тот же курс , по которому вы получили I.Это приведет к тому, что I понизится до F. 

Если в вашей записи есть более 12 единиц активных неполных оценок , вам потребуется разрешение, чтобы продолжить зачисление в следующий семестр (см. Часто задаваемые вопросы ниже).

Руководство

У учащихся есть три возможных варианта устранения неполных оценок: 

1. Заполните и замените неполный класс

Незавершенная или I оценка предназначена для использования в качестве замещающей оценки. Как только вы закончите пропущенную работу, преподаватель может поставить вам итоговую оценку, которая заменит оценку I в вашей записи.Ваша оценка будет соответствовать варианту оценки, выбранному вами в семестре, в котором вы начали курс. Неполные оценки — это возможность выполнить пропущенную работу по курсу, а не переделывать уже выполненные задания. По этой причине важно оценить, сможете ли вы закончить курс с желаемой оценкой, прежде чем принимать решение о неполной оценке.

Вы должны отправить выполненную курсовую работу до крайнего срока замены оценок, чтобы дать преподавателю время для выставления оценок.Если ваш преподаватель не сообщил вам крайний срок подачи, вы должны отправить свою работу своему преподавателю не менее чем за 30 дней до крайнего срока замены оценок преподавателя . Преподаватели должны представить окончательную оценку к крайнему сроку (выше). Просмотрите информацию Офиса регистратора о неполных оценках.

Выпускники старших классов, которые находятся в текущем списке на получение степени и имеют I оценки в классах, необходимых для получения степени, должны выполнить курсовую работу до последнего дня семестра, чтобы получить высшее образование.Если курс не нужен для окончания учебы, I останется в стенограмме на неопределенный срок.

2. Запросить продление для неполной оценки

Запросы на продление крайнего срока завершения I класса подлежат утверждению инструктором и требуют подписи инструктора. Чтобы сделать запрос, распечатайте копию петиции о продлении неполной оценки, заполните часть для учащихся, попросите преподавателя заполнить и подписать форму. Вы должны запланировать это  как минимум за 30 дней до крайнего срока, установленного преподавателем для подачи этой петиции .Затем ваш инструктор должен будет отправить подписанную форму Incomplete Extension на адрес [email protected] до установленного срока. Расширения I классов подлежат утверждению деканом по письмам и наукам. Запросы на продление Incomplete, отправленные после крайнего срока, будут автоматически отклонены.

В своей форме обязательно укажите дату, когда вы должны выполнить свою работу. Если у вас есть какие-либо вопросы, поговорите со своим инструктором, чтобы убедиться, что вы оба согласны друг с другом.

После того, как вы продлили незавершенное, вы можете снова продлить крайний срок, если другой подписанный запрос на неполное продление будет одобрен вашим преподавателем и отправлен по адресу [email protected] к сроку замены класса. Пожалуйста, отправьте запрос на дальнейшее продление незавершенного экзамена своему инструктору до истечения срока завершения студентом.

После того, как вы решили продлить незавершенное, вы не можете решить сохранить/заморозить это незавершенное.

3. Сохранить/заморозить неполную оценку

В записи можно навсегда сохранить до двух неполных оценок (часто это называется «замораживанием неполных оценок»). Это означает, что вместо итоговой оценки или неполной оценки, опускающейся до F, в вашей записи будет стоять оценка «I».Вы не получите ни единиц, ни других кредитов за курс, и не сможете пересдать курс.

Чтобы сохранить I класс на постоянной основе, подайте ходатайство о сохранении неполного класса на постоянной основе в течение крайнего срока завершения курса. Никакого одобрения не требуется, но тщательно подумайте, прежде чем выбрать этот образ действий; это необратимо, и курсы с постоянно сохраненной оценкой I нельзя пройти снова, находясь в Cal.

После того как вы заполнили форму соответствующей информацией, вы можете отправить ее по адресу [email protected] к установленному сроку (см. форму «Петиция о сохранении неполной оценки в отчете», где указан крайний срок подачи запроса).

Каждый из них имеет ограничения и подробно описан в разделе часто задаваемых вопросов ниже. Если вы получили неполную оценку, одно из вышеперечисленных действий должно быть выполнено до крайнего срока, иначе оценка автоматически понизится до F (или NP, если курс был пройден P/NP в исходном семестре).

Сроки

Получена I оценка Срок замены*, продления* или сохранения
Осенний семестр Первый учебный день в следующем осеннем семестре
Весенний семестр Первый учебный день следующего весеннего семестра
Летний семестр Первый учебный день следующего весеннего семестра

* Крайним сроком замены оценки является крайний срок, когда ваш преподаватель должен выставить оценку. Вы должны отправить работу как минимум за 30 дней до крайнего срока, если только вы не договорились об ином со своим преподавателем. Точно так же крайний срок для продления незавершенного — это крайний срок, до которого ваш преподаватель должен отправить подписанную форму неполного продления по адресу [email protected] Вам следует связаться со своим инструктором по поводу продления вашего Incomplete как минимум за 30 дней до крайнего срока.

Сроки завершения курсовой работы для получения неполной оценки распространяются даже на тех, кто в настоящее время не зачислен в Беркли, и на тех, кто участвует в программах Education Abroad и UCDC.

Эти сроки не подлежат обжалованию. Колледж не может делать исключений даже для ситуаций, когда преподаватели не отвечают на сообщения, поэтому тщательно организуйте незавершенные задания.

 Неполные часто задаваемые вопросы

Незавершенные и академический испытательный срок

Следует отметить несколько важных моментов относительно того, как незавершенные задания могут или не могут повлиять на ваш академический статус.

  • Семестр, за который не начисляются баллы, приводит к академическому испытательному сроку.Например, если учащийся проходит все курсы на основе зачета/незачета, получает все неполные оценки, получает все IP или NR, или сочетание вышеперечисленного не сможет получить средний балл и будет помещен на испытательный срок.

  • Если вы попали на академический испытательный срок из-за проблемы с семестровым или совокупным средним баллом и получили неполный балл, итоговая оценка может повлиять на ваш средний балл, но не изменит ваш статус академического испытательного срока. Вам все равно придется пройти академический испытательный срок.

Заблокирована регистрация для 12+ единиц Incomplete

Если в вашем послужном списке есть 12 или более незавершенных экзаменов, вам не разрешат зарегистрироваться в Беркли, если на это не будет получено разрешение от Колледжа литературы и науки. L&S может потребовать, чтобы вы выполнили некоторые или все неполные оценки, прежде чем регистрироваться на следующий семестр. Если у вас большое количество незавершенных единиц, вам, скорее всего, будет отправлено электронное письмо о встрече с консультантом колледжа L&S, чтобы обсудить ваш план, чтобы можно было принять решение о продолжении регистрации.

Должен ли я получить неполную оценку?

Незавершенные занятия полезны, если в течение семестра у вас возникли смягчающие обстоятельства, но в остальном вы планируете завершить курсовую работу. Однако незавершенные задания могут быть сложными, и могут возникнуть проблемы с их завершением. Вот несколько вопросов, которые стоит задать себе:

  1. Над сколькими незавершенными заданиями вы работаете и какие занятия посещаете, пытаясь их завершить? Может быть сложно взять на себя полную нагрузку по курсу в дополнение к выполнению неполных оценок, и попытка выполнить слишком много незавершенных оценок к крайнему сроку может быть сложной задачей.
  2. Как инструктор относился к общению? Если с вашим инструктором часто бывает трудно связаться, совместная работа над договоренностью о том, как выполнить работу и получить оценку вовремя, может быть сложной задачей.
  3. Можете ли вы и инструктор согласовать четкий своевременный план? Чем четче будет ваш план и сроки, тем больше вероятность того, что получение оценки «Незавершенный» пройдет гладко.
  4. Сможете ли вы хорошо справиться с оставшимися заданиями в согласованные сроки? Сдача экзамена по макияжу в течение месяца после окончания курса и сдача итогового экзамена в следующий раз, когда курс предлагается, — это два совершенно разных опыта, когда речь идет о сохранении знаний, которые вам понадобятся для успешной работы.

Вторичные распечатки транскриптов

FLORIDA АВТОМАТИЗИРОВАННАЯ СИСТЕМА ДЛЯ ПЕРЕДАЧИ ОБРАЗОВАТЕЛЬНЫХ ЗАПИСЕЙ
ДЕПАРТАМЕНТ ОБРАЗОВАНИЯ ФЛОРИДЫ
ОФИС РАЗРАБОТКИ И ПОДДЕРЖКИ ПРИЛОЖЕНИЙ (ОАДС)

Дата вступления в силу: 12 декабря 2010 г.
Исправлено:


***** ПРИМЕЧАНИЕ ***** В настоящее время этот документ пересматривается. Новые требования к выпускникам повлияют на печатные стенограммы.Новая версия все еще находится в разработке и будет выпущена как можно скорее. ВТОРИЧНАЯ ТАБЛИЦА ДЛЯ ПЕЧАТИ
ВЫПУСКНОЙ РЕЗЮМЕ


ПРИМЕЧАНИЕ. Первая строка этого образца стенограммы облегчает обработку для оптических сканеров и отображается только если установлен управляющий параметр (см. Приложение W). Содержимое строки — первые девять байты идентификатора номера студента, штат Флорида (где это поле является номером социального страхования), фамилия, Имя, Отчество или Инициал, первые восемь байтов даты сообщения, времени, порядкового номера, если нет номера социального страхования, десятибайтный идентификатор студенческого номера, Флорида (где он присвоенный округом идентификатор студента), 11-значный адрес учебного заведения и 11-значный номер отправляющего учреждения, поскольку эти поля определены в записи заголовка.


 SSN999999ФАМИЛИЯ XXXXXXXПЕРВОЕ ИМЯXXОТЧЕТНОЕ ИМЯ XXXCCYYMMDDFL STU ID48

325530000 ДО - ОКРУГ: 0000037 ШКОЛА ЛЕОНА: 0021 РЕЗЮМЕ ВЫПУСКА: SRTS12CC УРОВЕНЬ КЛАССА: 12 ДАТА ПОДГОТОВКИ: 07.07.96 ТЕКУЩИЙ РАЙОН: 01 АЛАЧУА СТРАНИЦА 01 ИЗ 01 ID СТУДЕНТА FL: 999887771X SSN: 999-88-7771 ТЕКУЩАЯ ШКОЛА: 0431 F. W. BUCHHOLZ HIGH ОФИЦИАЛЬНОЕ ИМЯ: АНДЕРСОН-УЛЬМСФОРД III, ФРИЦВИЛЬГЕЛЬМ АРМБУРСТЕР ****** К У М У Л А Т И В Е С У М А Р Я ****** ДАТА РОЖДЕНИЯ: 04.04.1976 * НА ММ/ДД/ГГГГ * * * СТАТУС ЖИТЕЛЬСТВА, ШТАТ/ОКРУГ: СТУДЕНТ PK-12,

* ВАРИАНТ ВЫПУСКА: X-----------27-----------X * ИНОСТРАННИК, УЧАСТВУЮЩИЙ В ДАННОМ ОКРУГЕ * ГОД ПОСТУПЛЕНИЯ В ДЕВЯТОЙ КЛАСС: Y1Y1Y2Y2 * * - - - - КРЕДИТЫ - - - - * * ТЕМА ВСЕГО ВСЕГО ВСЕГО * $ДИПЛОМ-ДАТА: ММ/ДД/ГГГГ * *НЕОБХОДИМАЯ НА СЕГОДНЯ ОБЛАСТЬ ОСТАЛОСЬ * ТИП: X----------------34--------------X * АНГЛИЙСКИЙ (EN) 0.70* Х-----ДИФФЕРЕНЦИРОВАННЫЙ ДИПЛОМ-----Х * МАТЕМАТИКА (MA) 0.30 * $ДИПЛОМ ГОТОВО К КОЛЛЕДЖУ: X $ВНУТРЕННИЙ БАККАЛАТУРА: X * НАУКА (SC) 0.46 * $РАННИЙ ПОСТУПЛЕНИЕ В КОЛЛЕДЖ: X $ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЙ ГОД: X * AMER HISTORY (AH) 0,09 * $ADV INTL CERTIFICATE: X $TECH PREP PARTICIPIP: X * ВСЕМИРНАЯ ИСТОРИЯ (WH) 0.60* * ЭКОНОМИКА (ЕС) 0,33 * $СЕРТИФИКАТ О ЗАВЕРШЕНИИ- * ПРАВИТЕЛЬСТВО АМЕРИКИ (АГ) 0,39 * ДАТА: ММ/ДД/ГГГГ * ПРОФЕССИОНАЛЬНЫЙ (VO) 0,53 * ТИП: X----------------34--------------X * PERFORM FINE ART (PF) 0,47 * * ЖИЗНЕННЫЕ НАВЫКИ MGMT (LM) 0.62 * $СТАТУС ЗАВЕРШЕНИЯ ПРОФЕССИОНАЛЬНОЙ ПРОГРАММЫ- * ФИЗИЧЕСКИЙ ED (PE) 0,12 * НОМЕР: X--7--X X--------20--------X * ИНОСТРАННЫЙ ЯЗЫК (FL) 0.21 * ЗАВЕРШЕНИЕ: X-----15------X ЗАВЕРШЕНО: ММ/ДД/ГГГГ * ИСКУССТВО ЯЗЫКА (LA) 0.24 * $СТАТУС ЗАВЕРШЕНИЯ ПРОФЕССИОНАЛЬНОЙ ПРОГРАММЫ- * ОБЩЕСТВЕННЫЕ НАУКИ (СС) 0.38 * НОМЕР: X--7--X X--------20--------X * ВЫБОР (EL) 0,18 * ЗАВЕРШЕНИЕ: X-----15------X ЗАВЕРШЕНО: ММ/ДД/ГГГГ * ESE (EX) 0,15 * * КОМПЬЮТЕРНОЕ ОБУЧЕНИЕ (CE) 0.30 * $КУРСЫ ПОДГОТОВКИ К КОЛЛЕДЖУ: * ЗАЧЕТЫ, СУММАРНЫЙ: 6.07 * $DIST ГОД СРОК КУРС № ОЦЕНКА ЗАЧЕТ * * $ xx xxxx Y1Y1Y2Y2 x 1234567 А 0.50 * GPA QTY PTS GPA QTY PTS * $ xx xxxx Y1Y1Y2Y2 x 1234568 B 0,50 * РАЙОН: 2.1275 0.00 ШТАТ: 1.9725 0.00 * $ xx xxxx Y1Y1Y2Y2 x 1234569 C 0.50 ******************************************************* ** $ НАЦИОНАЛЬНЫЙ УЧЕНЫЙ: УЧЕНЫЙ $НАЦИОНАЛЬНЫЙ УЧИТЕЛЬ ДОСТИЖЕНИЙ: ФИНАЛИСТ $ НАЦИОНАЛЬНЫЙ ИСПАНСКИЙ УЧЕНЫЙ: УЧЕНЫЙ #ДАТА ПРОШЕЛ ОЦЕНОЧНЫЙ ТЕСТ ДЛЯ ВЫПУСКНЫХ ЦЕЛЕЙ СВЯЗЬ: ММ/ГГГГ МАТЕМАТИКА: ММ/ГГГГ МИНИМАЛЬНЫЕ ОТЛИЧНЫЕ УСПЕХИ В ОБРАЗОВАНИИ СТУДЕНТОВ СТАНДАРТЫ ДЛЯ ВЫПУСКНЫХ ЦЕЛЕЙ - ДАТА: ММ/ДД/ГГГГ ------------------------------------------ ИНФОРМАЦИЯ О ИСПЫТАНИЯХ ------ -------------------------------------- ТЕСТ УРОВЕНЬ ТЕСТА ОЦЕНКА ПО ТЕМЕ ОЦЕНКА ПО ТЕМЕ ОЦЕНКА ПО ТЕМЕ ОЦЕНКА ПО ТЕМЕ ГРД ДАТА НАЗВАНИЕ ФОРМА ТИП СОДЕРЖАНИЯ ТИП СОДЕРЖАНИЯ ТИП СОДЕРЖАНИЯ ТИП СОДЕРЖАНИЯ ТИП 09 01.01.1988 CEB A 01 WH-INVLD RS 0001 SS 0002 ACH BY NP 0003 NC 0004 ACH CH GE 0005 LS 0006 АЧ ЭН НС 0007 РС 0008 АЧ ЭН СС 0009 НП 0010 АЧ ЭС НЦ 0011 ГЭ 0012 ACH FR LS 0013 NS 0014 ACH GM RS 0015 SS 0016 ACH HB NP 0017 NC 0018 10 02.01.1988 ACS B 02 COMPUTAT GE 0019 LS 0020 PROB/SLV NS 0021 RS 0022 CONCEPTS SS 0023 NP 0024 READ(T) NC 0025 GE 0026 BASICSKL LS 0027 NS 0028 ГРАММАТИКА RS 0029 SS 0030 СТУДИСКЛ NP 0031 NC 0032 WDATTACK GE 0033 LS 0034 11 03.01.1988 PAC C 03 ACT READ NS 0035 RS 0036 ACT SCI SS 0037 NP 0038 ACT ENG NC 0039 GE 0040 ACT MATH LS 0041 NS 0042 ACT SS RS 0043 SS 0044 ACT SCI NP 0045 NC 0046 ACT COMP GE 0047 LS 0048

Кроличий поликлональный биотин ELISA, Flo, IHC, WB

добавить отзыв Гарантия ЛСБио

Антитело:

Семейство носителей растворенного вещества 35, член E2B (SLC35E2B), вариант транскрипта 1 Кроличье античеловеческое поликлональное (aa1-30) (биотин) Антитело

Заявка:

ИГХ, ВБ, Фло, ИФА

Формат:

Биотин, немодифицированный

Другие форматы:

Биотин, немодифицированныйНеконъюгированныйAPAPCFITCHRPPE

Международный 206-374-1102

Только для исследовательских целей

Обзор

Антитело:

Семейство носителей растворенного вещества 35, член E2B (SLC35E2B), вариант транскрипта 1 Кроличье античеловеческое поликлональное (aa1-30) (биотин) Антитело

Заявка:

ИГХ, ВБ, Фло, ИФА

Формат:

Биотин, немодифицированный

Другие форматы:

Биотин, немодифицированныйНеконъюгированныйAPAPCFITCHRPPE

Технические характеристики

Описание

Семейство 35 носителей растворенного вещества, член E2B (SLC35E2B), вариант транскрипта 1 антитела LS-C285204 представляет собой биотин-конъюгированное кроличье поликлональное антитело к семейству 35 переносчиков растворенного вещества человека, член E2B (SLC35E2B), вариант транскрипта 1 (aa1-30).Валидировано для ELISA, Flow, IHC и WB.

Цель

Семейство 35 переносчиков растворенных веществ человека, член E2B (SLC35E2B), вариант транскрипта 1

Реактивность

Человек (проверенная или 100% идентичность последовательности иммуногена)

Спряжения

Биотин.Также доступны неконъюгированные или конъюгированные с AP, APC, FITC, HRP, PE.

Очистка

Affinity очищенный

Специфика

Это антитело S35E2 получено из кроликов, иммунизированных KLH-конъюгированным синтетическим пептидом длиной от 1 до 30 аминокислот из N-концевой области S35E2 человека.

Приложения

  • ВВК
  • Вестерн-блот
  • Проточная цитометрия
  • ИФА
  • Приложения протестированы только для базовой формы этого продукта
Выполнение ИГХ? Ознакомьтесь с полной линейкой реагентов для иммуногистохимии, включая растворы для поиска антигенов, блокирующие агенты. Наборы для обнаружения ABC и полимеры, биотинилированные вторичные антитела, субстраты и многое другое.

Использование

Перечисленные приложения были протестированы для неконъюгированной формы этого продукта. Другие формы не тестировались.

Презентация

PBS, без добавления консервантов

Хранение

Кратковременно: хранить при 4°C.Длительный срок: аликвотировать и хранить при температуре -20°C до 6 месяцев. Избегайте циклов замораживания-оттаивания. Беречь от света.

Ограничения

Только для исследовательских целей. Предназначен для использования специалистами лаборатории.

Гарантия

Это антитело имеет 100% гарантию LSBio.

Гарантия ЛСБио

О семействе носителей растворенных веществ 35, член E2B (SLC35E2B), вариант расшифровки 1

НЦБИ: NM_0012

НП_001277193.1

Публикации (0)

Отправить публикацию для LS-C285204

Отзывы клиентов (0)

Отправить отзыв о LS-C285204

Рекомендуемые товары

Разновидность: Человек

Приложения: ИГХ, вестерн-блоттинг, проточная цитометрия, ИФА

Разновидность: Человек

Приложения: ИГХ, вестерн-блоттинг, проточная цитометрия, ИФА

Разновидность: Человек

Приложения: ИГХ, вестерн-блоттинг, проточная цитометрия, ИФА

Разновидность: Человек

Приложения: ИГХ, вестерн-блоттинг, проточная цитометрия, ИФА

Разновидность: Человек

Приложения: ИГХ, ИГХ-парафин, иммунофлуоресценция, вестерн-блоттинг

Разновидность: Человек, Мышь

Приложения: ИГХ, ИГХ — Парафин, Вестерн-блоттинг


Запросить паспорт безопасности паспорта безопасности

Чтобы запросить форму SDS/MSDS для этого продукта, обратитесь в наш отдел технической поддержки по телефону:

Технический[email protected]

Запрошено от: Российская Федерация
Дата запроса: 13 января 2022 г.

Разделение РНК по длине улучшает реконструкцию транскриптома на основе данных коротких последовательностей РНК

  • 1.

    Zhang, C., Zhang, B., Lin, L.-L. & Zhao, S. Оценка и сравнение вычислительных инструментов для количественного определения изоформ РНК-seq. BMC Genomics 18 , 583 (2017).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 2.

    Тенг М. и др. Эталон для конвейеров количественной оценки RNA-seq. Геном Биол. 17 , 74 (2016).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 3.

    Aguiar, D. et al. Байесовское непараметрическое обнаружение изоформ и индивидуальный количественный анализ. Нац. коммун. 9 , 1681 (2018).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 4.

    Song, L., Sabunciyan, S., Yang, G. & Florea, L. Многовыборочный подход повышает точность сборки стенограммы. Нац. коммун. 10 , 5000 (2019).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 5.

    Li, W. V. et al. AIDE: обнаружение изоформ с помощью аннотаций с высокой точностью. Рез. генома. 29 , 2056–2072 (2019).

  • 6.

    Дерозье, Р.C., Friderici, KH и Rottman, FM. Характеристика метилирования и гетерогенности мРНК гепатомы Новикоффа в метилированном 5′-конце. Биохимия 14 , 4367–4374 (1975).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 7.

    Barbosa-Morais, N.L. et al. Эволюционный ландшафт альтернативного сплайсинга у позвоночных. Наука 338 , 1587–1593 (2012).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 8.

    Джелен, Н., Уле, Дж., Живин, М. и Дарнелл, Р. Б. Эволюция nova-зависимой регуляции сплайсинга в головном мозге. PLoS Genetics 3 , e173 (2007).

    Центральный пабмед Google Scholar

  • 9.

    Меркин Дж., Рассел С., Чен П. и Бердж С. Б. Эволюционная динамика регуляции генов и изоформ в тканях млекопитающих. Наука 338 , 1593–1599 (2012).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 10.

    Тардагила, М. и др. SQANTI: обширная характеристика последовательностей длинных транскриптов для контроля качества при идентификации и количественном определении полноразмерного транскриптома. Рез. генома. 28 , 396–411 (2018).

    КАС ПабМед Центральный Google Scholar

  • 11.

    Chen, K. et al. Полногеномное связывание и механистический анализ Smchd1-опосредованной эпигенетической регуляции. Проц. Натл акад. науч. США 112 , E3535–E3544 (2015 г.).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 12.

    Soneson, C. et al. Всестороннее исследование секвенирования нативной РНК Nanopore для характеристики сложных транскриптомов. Нац. коммун. 10 , 3359 (2019).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 13.

    Hurowitz, E.H. & Brown, P.O. Полногеномный анализ длин мРНК в Saccharomyces cerevisiae . Геном Биол. 5 , R2 (2003).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 14.

    Брей, Н. Л., Пиментел, Х., Мелстед, П. и Пачтер, Л. Почти оптимальная вероятностная количественная оценка секвенирования РНК. Нац. Биотехнолог. 34 , 525 (2016).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 15.

    Хебер С., Алексеев М., Сзе С.-Х., Танг, Х. и Певзнер, П.А. Графы сплайсинга и проблема сборки EST. Биоинформатика 18 , S181–S188 (2002).

    ПабМед Google Scholar

  • 16.

    Pachter, L. Модели для количественного определения транскриптов из РНК-сек. Препринт на https://arxiv.org/abs/1104.3889 (2011 г.).

  • 17.

    Ковака С. и др. Сборка транскриптома из долгосрочных выравниваний РНК-seq с Stringtie2. Геном Биол. 20 , 278 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 18.

    Ebrahim Sahraeian, S.M. et al. Получение всестороннего биологического понимания транскриптома путем выполнения анализа секвенирования РНК широкого спектра. Нац. коммун. 8 , 59 (2017).

  • 19.

    Глинос Д. А. и др. Изменение транскриптома в тканях человека, выявленное с помощью секвенирования с длительным чтением.Препринт на https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2021.01.22.427687v1 (2021).

  • 20.

    Grabherr, M.G. et al. Сборка полноразмерного транскриптома из данных секвенирования РНК без эталонного генома. Нац. Биотехнолог . 29 , 644–652 (2011).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 21.

    Чанг З., Ван З. и Ли Г. Влияние длины чтения и сложности транскриптома на сборку de novo: имитационное исследование. PLoS ONE 9 , 1–8 (2014).

    Google Scholar

  • 22.

    Dong, X. et al. Длинные и короткие: разблокировка данных секвенирования РНК с длинным считыванием нанопор с помощью инструментов анализа дифференциальной экспрессии с коротким считыванием. НАР Геном. Биоинформ. 3 , lqab028 (2021).

  • 23.

    Wang, Y. et al. N 6 -метиладенозин Модификация РНК регулирует самообновление эмбриональных нейральных стволовых клеток посредством модификаций гистонов. Нац. Неврологи. 21 , 195–206 (2018).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 24.

    Канзар, С., Андреотти, С., Виз, Д., Рейнерт, К. и Клау, Г. В. ЦИДАН: всестороннее обнаружение изоформ и оценка распространенности. Геном Биол. 17 , 16 (2016).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 25.

    Алкасем И., Сонталия Ю., Клитцке-Фезер Э., Шим Х. и Канзар С. Максплайсер: вероятностная модель для оценки использования сайта сплайсинга на основе данных секвенирования РНК. Биоинформатика 37 , 2004–2011 (2021).

    КАС ПабМед Центральный Google Scholar

  • 26.

    Batista, P.J. et al. m 6 a Модификация РНК контролирует смену клеточных судеб в эмбриональных стволовых клетках млекопитающих. Cell Stem Cell 15 , 707–719 (2014).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 27.

    Ке, С. и др. Большинство остатков m 6 a находятся в последних экзонах, что делает возможной регуляцию 3′-UTR. Гены Дев. 29 , 2037–2053 (2015).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 28.

    Ямаути Т., Нишияма М., Мороиси Т., Kawamura, A. & Nakayama, K.I. Инактивация FBXL5 в мозге мыши вызывает аберрантную пролиферацию нервных стволовых клеток-предшественников. Мол. Клетка. биол. 37 , e00470-16 (2017).

  • 29.

    Kuboyama, K., Fujikawa, A., Suzuki, R. & Noda, M. Инактивация рецептора протеинтирозинфосфатазы типа Z плейотрофином способствует ремиелинизации посредством активации дифференцировки клеток-предшественников олигодендроцитов. J. Neurosci. 35 , 12162–12171 (2015).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 30.

    Kurosaki, T., Popp, M.W. & Maquat, L.E. Контроль качества и количества экспрессии генов с помощью нонсенс-опосредованного распада мРНК. Нац. Преподобный Мол. Клеточная биол. 20 , 406–420 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 31.

    Лианоглу С., Гарг В., Ян, Дж. Л., Лесли, К. С. и Майр, К. Повсеместно транскрибируемые гены используют альтернативное полиаденилирование для достижения тканеспецифичной экспрессии. Гены Дев. 27 , 2380–2396 (2013).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 32.

    Tang, A.D. et al. Полноразмерная характеристика транскрипта мутации SF3B1 при хроническом лимфоцитарном лейкозе выявляет подавление сохраненных интронов. Нац. коммун. 11 , 1438 (2020).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 33.

    Köster, J. & Rahmann, S. Snakemake — масштабируемая система биоинформатического рабочего процесса. Биоинформатика 28 , 2520–2522 (2012).

    ПабМед Google Scholar

  • 34.

    ДеАнджелис, М. М., Ван, Д. Г. и Хокинс, Т. Л.Твердофазная обратимая иммобилизация для выделения продуктов ПЦР. Рез. нуклеиновых кислот. 23 , 4742–4743 (1995).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 35.

    Собчак, К. и Кржизосяк, В. Дж. Анализ структуры РНК с помощью капиллярного электрофореза. Рез. нуклеиновых кислот. 30 , е124 (2002).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 36.

    Азарани, А. и Хекер, К. Х. Анализ РНК с помощью ионно-парной обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии. Рез. нуклеиновых кислот. 29 , e7 (2001).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 37.

    Wang, Y. et al. Профиль транскриптомов с высоким разрешением показывает роль альтернативного сплайсинга в модулировании реакции кукурузы на азот. BMC Genomics 21 , 353 (2020).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 38.

    Li, R. et al. Прямое полноразмерное секвенирование РНК выявило неожиданную сложность транскриптома во время развития Caenorhabditis elegans . Рез. генома. 30 , 287–298 (2020).

  • 39.

    Haussmann, I.U. et al. m 6 a потенцирует альтернативный сплайсинг пре-мРНК Sxl для надежного определения пола Drosophila . Природа 540 , 301–304 (2016).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 40.

    Бартосович, М. и др. N 6 -метиладенозиндеметилаза FTO нацелена на пре-мРНК и регулирует альтернативный сплайсинг и процессинг 3′-конца. Рез. нуклеиновых кислот. 45 , 11356–11370 (2017).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 41.

    Сяо, В. и др. Nuclear m 6 a ридер YTHDC1 регулирует сплайсинг мРНК. Мол. Cell 61 , 507–519 (2016).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 42.

    Zhou, K.I. et al. Регуляция котранскрипционного сплайсинга пре-мРНК с помощью m 6 a через белок низкой сложности hnRNPG. Мол. Сотовый 76 , 70–81 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 43.

    Jacob, A.G. & Smith, C.W.J. Сохранение интронов как компонент регулируемых программ экспрессии генов. Гул. Жене. 136 , 1043–1057 (2017).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 44.

    Braunschweig, U. et al. Широко распространенное удержание интронов у млекопитающих функционально настраивает транскриптомы. Рез. генома. 24 , 1774–1786 (2014).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 45.

    Юн, К.-Дж. и другие. Временной контроль нейрогенеза коры головного мозга млекопитающих с помощью метилирования m 6 a. Cell 171 , 877–889 (2017).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 46.

    Eckmann, C.R., Rammelt, C. & Wahle, E. Контроль длины хвоста поли(А). Wiley Interdiscip. Rev. RNA 2 , 348–361 (2011).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 47.

    Добин, А. и др. STAR: сверхбыстрый универсальный выравниватель RNA-seq. Биоинформатика 29 , 15–21 (2013).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 48.

    Conforti, L. et al. Изоформа Kif1Bβ обогащена моторными нейронами, но не изменяется в мышиной модели бокового амиотрофического склероза. J. Neurosci. Рез. 71 , 732–739 (2003).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 49.

    Цзян, Л. и др. Синтетические вводные стандарты для экспериментов с секвенированием РНК. Рез. генома. 21 , 1543–1551 (2011).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 50.

    Li, B. & Dewey, C.N. RSEM: точная количественная оценка транскриптов по данным секвенирования РНК с эталонным геномом или без него. BMC Bioinformatics 12 , 323 (2011).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 51.

    Лаппалайнен, Т. и др. Секвенирование транскриптома и генома раскрывает функциональные различия у людей. Природа 501 , 506–511 (2013).

    Центральный пабмед Google Scholar

  • 52.

    Chang, Z. et al. Bridger: новая структура для сборки транскриптома de novo с использованием данных секвенирования РНК. Геном Биол. 16 , 30 (2015).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 53.

    Пертеа, М. и др. StringTie обеспечивает улучшенную реконструкцию транскриптома из чтений РНК-seq. Нац. Биотехнолог. 33 , 290–295 (2015).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 54.

    Шао, М. и Кингсфорд, К. Точная сборка расшифровок с помощью декомпозиции графа с сохранением фазы. Нац. Биотехнолог. 35 , 1167–1169 (2017).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 55.

    Пертеа, М., Ким, Д., Пертеа, Г. М., Лик, Дж. Т. и Зальцберг, С. Л. Анализ экспрессии на уровне транскрипта в экспериментах по секвенированию РНК с помощью HISAT, StringTie и Ballgown. Нац. Протоколы 11 , 1650 (2016).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 56.

    Кент, В. Дж. BLAT — инструмент выравнивания, похожий на BLAST. Рез. генома. 12 , 656–664 (2002).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 57.

    Се, Ю. и др. SOAPdenovo-Trans: сборка транскриптома de novo с короткими считываниями RNA-Seq. Биоинформатика 30 , 1660–1666 (2014).

    КАС Google Scholar

  • 58.

    Liu, J., Yu, T., Mu, Z. & Li, G. TransLiG: сборщик транскриптома de novo, который использует итерацию линейного графа. Геном Биол. 20 , 81 (2019).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 59.

    Робертс, А. и Пачтер, Л. Назначение потокового фрагмента для анализа в реальном времени экспериментов по секвенированию. Нац. Методы 10 , 71–73 (2013).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 60.

    Li, B., Ruotti, V., Stewart, R. M., Thomson, J. A. & Dewey, C. N. Оценка экспрессии генов RNA-Seq с неопределенностью картирования чтения. Биоинформатика 26 , 493–500 (2009).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 61.

    Виттинг-Сируп, К. и Санделин, А. Ландшафт переключений изоформ при раке человека. Мол. Рак рез. 15 , 1206–1220 (2017).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 62.

    Андерс, С., Рейес, А. и Хубер, В. Обнаружение дифференциального использования экзонов по данным секвенирования РНК. Рез. генома. 22 , 2008–2017 (2012).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 63.

    Парк, Х. Дж. и др. CPAT: инструмент оценки кодирующего потенциала с использованием модели логистической регрессии без выравнивания. Рез. нуклеиновых кислот. 41 , е74 (2013).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 64.

    Finn, R.D. et al. Pfam: база данных семейств белков. Рез. нуклеиновых кислот . 42 , Д222–Д230 (2014).

  • 65.

    Zhang, Y. et al. Модельный анализ ChIP-Seq (MACS). Геном Биол. 9 , 1–9 (2008).

    Google Scholar

  • 66.

    Куинлан, А. Р. и Холл, И. М. BEDTools: гибкий набор утилит для сравнения геномных признаков. Биоинформатика 26 , 841–842 (2010).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 67.

    Heinz, S. et al. Простые комбинации транскрипционных факторов, определяющих происхождение, инициируют цис -регуляторные элементы, необходимые для идентичности макрофагов и В-клеток. Мол. Cell 38 , 576–589 (2010).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 68.

    Alexa, A., Rahnenführer, J. & Lengauer, T. Улучшенная оценка функциональных групп по данным экспрессии генов путем декорреляции структуры графа GO. Биоинформатика 22 , 1600–1607 (2006).

    КАС пабмед Google Scholar

  • Ген латерального супрессора (Ls) томата кодирует нового представителя семейства белков VHIID разнообразие форм и особенностей роста высших растений.У мутанта томата

    латерального супрессора предотвращена инициация пазушных меристем, что дает уникальную возможность изучить молекулярные механизмы, лежащие в основе этой важной функции апикальной меристемы побега. Мы сообщаем здесь о выделении гена латерального супрессора путем позиционного клонирования и показываем, что мутантный фенотип вызван полной потерей функции нового члена семейства растительных регуляторных белков VHIID.

    Характер ветвления побегов и особенности роста боковых побегов в значительной степени определяют характер роста растений.У семенных растений ветвление побегов начинается на верхушке побега с образованием пазушных меристем. В пазухах развивающихся зачатков листьев гистологически могут быть идентифицированы отдельные группы меристематических клеток, которые находятся в непосредственной непрерывности с апикальной меристемой побега из-за их плотной цитоплазмы и низкой степени вакуолизации (1). Эта группа клеток разрастается и образует куполообразную пазушную меристему, структура которой очень похожа на структуру апикальной меристемы первичного побега.После образования первых листовых зачатков развитие этих боковых почек часто приостанавливается из-за тормозящего действия верхушки главного побега (2). У некоторых видов растений верхушечная меристема первичного побега остается активной на протяжении всей жизни растения и продолжает инициировать образование боковых органов. У других видов растений первичная апикальная меристема в какой-то момент развития претерпевает переход к развитию цветка или прерывается. В этих случаях развитие продолжают одна или несколько пазушных меристем, образующих симподиальный побег (т.g., Lycopersicon esculentum и Petunia hybrida ).

    Мало что известно о генетическом контроле ветвления побегов. Мутанты, которые обнаруживают либо уменьшенный, либо усиленный отросток пазушных почек, были описаны у различных видов растений (3). В других случаях инициация пазушных меристем блокируется в некоторых или большинстве пазух листьев. Мутант латеральный супрессор (ls) томата характеризуется фенотипическими аномалиями на разных стадиях развития.Во время вегетативного развития клетки в пазухах листовых зачатков не сохраняют свой меристематический характер, что приводит к отсутствию боковых побегов (4). Однако при переходе к репродуктивному развитию пазушные меристемы закладываются в двух пазухах листьев, предшествующих соцветию. В то время как самая верхняя пазушная меристема развивается в симподиальный побег, продолжающий главную ось растения, вторая пазушная меристема развивается в боковой побег (4). Развитие соцветия гомозиготных растений ls характеризуется меньшим числом цветков в соцветии, отсутствием лепестков (5), снижением мужской и женской фертильности (6).Морфологические дефекты мутанта ls сопровождаются резкими изменениями уровня ряда фитогормонов. По сравнению с диким типом верхушки гомозиготных растений ls содержат гораздо более высокие уровни ауксинов и гибберелловой кислоты, тогда как уровни цитокининов снижены (7). Изучая молекулярные процессы, лежащие в основе этого сложного фенотипа, мы надеемся получить представление о важных аспектах развития растений. Основываясь на ранее опубликованном генетическом и физическом картировании (8), мы выделили ген ls путем позиционного клонирования.Анализ последовательности мутантных аллелей показывает, что фенотип ls вызван полной потерей функции члена нового семейства регуляторных белков VHIID.

    МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

    Растительные материалы.

    Семенной материал томата L. esculentum cv. Antimold B, Antimold B- ls 1 и Moneymaker были получены в Фондовом центре генетики томатов, Дэвис, Калифорния. Семена томата L. esculentum cv.Primabel и Primabel- ls 2 были получены от J. Philouze (Национальный институт агрономических исследований, Монфаве, Франция). Растения выращивали в стандартных тепличных условиях с дополнительным искусственным освещением (16-часовой фотопериод) в зимний период.

    Выделение ДНК и Саузерн-блоттинг.

    ДНК растений для ПЦР и Саузерн-блоттинга готовили, как описано (9). Для Саузерн-блоттинга примерно 5 мкг геномной ДНК подвергали электрофорезу через 0.8% агарозы, блотирование на мембранах HybondN + (Amersham Buchler, Брауншвейг, Германия) и гибридизация с радиоактивно мечеными зондами. Все стандартные методики выполняли согласно Sambrook et al. (10), если не указано иное.

    Выделение РНК и ПЦР-анализ с обратной транскрипцией (ОТ).

    Тотальную РНК выделяли с помощью системы RNeasy (Qiagen, Hilden, Germany) в соответствии с инструкциями производителя. Для анализа ОТ-ПЦР 1 мкг тотальной РНК расщепляли ДНКазой I и подвергали обратной транскрипции с использованием полимеразы Superscript II (Life Technologies, Eggenstein, Germany) в соответствии с инструкциями производителя.Продукт реакции синтеза кДНК первой цепи амплифицировали с помощью ПЦР с использованием Ls -специфических праймеров CD61-6 (5′-GGTGGCAATGTAGCTTCCAG-3′) и CD61-23 (5′-CCAGCTATTCAAATACGCCAG-3′). Амплификацию кДНК актина с использованием праймеров, специфичных для гена картофеля PoAc101 (11), проводили в качестве контроля, чтобы гарантировать, что к каждой ПЦР добавлялось одинаковое количество кДНК.

    Эксперименты по выделению кДНК и быстрой амплификации концов кДНК (RACE).

    Библиотеку кДНК кончиков побегов томата (сорт VFNT Cherry) (12) подвергали скринингу с использованием либо дрожжевой искусственной хромосомы (YAC) 61–5, либо целого контига космид (рис. A ) или вставку космиды G в качестве зонда. В каждом эксперименте подвергали скринингу не менее 1 × 10 6 бляшек.

    Физическая карта региона Ls . ( A ) Схематическое изображение космидного контига вокруг локуса Ls . Клоны YAC и космиды показаны горизонтальными линиями. Штриховые вертикальные линии указывают приблизительное положение рекомбинационных изломов. Незакрашенные прямоугольники представляют кДНК, а маркеры полиморфизма длины фланкирующих рестрикционных фрагментов показаны в виде заштрихованных прямоугольников.Концевые космидные зонды, используемые для ориентации космидного контига, обозначены открытым (C-for) или замкнутым треугольником (A-rev). ( B ) Фрагменты ДНК, используемые для экспериментов по комплементации. Незакрашенные столбцы представляют космидные клоны G и L. Заштрихованные столбцы обозначают различные фрагменты ДНК космиды G, используемые для комплементации. Положение кДНК ET1 показано заштрихованным прямоугольником.

    Для экспериментов RACE (13) синтез кДНК первой цепи выполняли, как описано выше для анализа ОТ-ПЦР.Эксперименты RACE проводились с использованием системы RACE компании Life Technologies в соответствии с инструкциями производителя. Для 5′-RACE стандартный адаптерный праймер BRL-UAP и Ls -специфические праймеры CD61-30 (5′-TGATGGACTAACCGTTCAG-3′), CD61-11 (5′-AGCTAATGAGTAGCTGGCGG-3′) и CD61-31. (5′-TTGGAGTTGTTTCAACAGG-3′). Амплифицированные фрагменты клонировали в плазмидный вектор pGEM-T (Promega).

    Изоляция клонов YAC.

    Праймеры ПЦР CD61-F, CD61-R, CD65-F и CD65-R, выведенные из маркеров полиморфизма длин рестрикционных фрагментов CD61 и CD65 соответственно (8), использовали для скрининга объединенной библиотеки томатов YAC (14) .Чтобы идентифицировать клон YAC, охватывающий интервал CD61-CD65 (8), CD61-позитивные клоны также анализировали с помощью праймеров CD65, и наоборот. После разделения хромосом дрожжей, заключенных в агарозу, с помощью гель-электрофореза в пульсирующем поле ДНК YAC экстрагировали расщеплением гелазой (Biozym, Hess. Oldendorf, Germany), радиоактивно метили с использованием стандартных процедур и использовали для скрининга библиотеки кДНК.

    Создание бинарной векторной космидной библиотеки.

    Геномная ДНК L. esculentum cv.Moneymaker частично расщепляли Mbo I, а фракцию размером от 17 до 23 т.п.о. лигировали в сайт Bam HI бинарного космидного вектора pCLD04541 (15), упакованного с использованием коммерческих экстрактов (Gigapack II, Stratagene). , и трансфицировали в штамм Escherichia coli SURE (Stratagene). Приблизительно 250 000 рекомбинантных клонов со средним размером вставки 20 т.п.н., представляющих более пяти эквивалентов генома, были разделены на 100 пулов. Скрининг библиотеки проводили с помощью ПЦР-анализа ДНК из каждого пула с последующей обычной гибридизацией колоний на фильтре.

    Трансформация помидора. Фрагменты ДНК

    были клонированы в бинарные векторы pCLD04541 (15) или pGPTV-Kan (16) и перенесены в штаммы Agrobacterium tumefaciens GV3101 (17) или LBA4404 (18). Трансформацию эксплантатов листьев томата проводили, как описано (19).

    Секвенирование и анализ ДНК.

    Секвенирование ДНК проводили с использованием системы секвенирования PRISM Ready Reaction Terminator Cycle Sequencing (Applied Biosystems). Реакции проводили на секвенаторе ДНК Applied Biosystems 373A или 377XL.Компьютерный анализ проводили с использованием следующего программного обеспечения: wisconsin package, Version 9.1, Genetics Computer Group, Мэдисон, Висконсин.

    РЕЗУЛЬТАТЫ

    Создание космидного контига из региона
    ls .

    В предыдущей работе локус Ls был картирован с интервалом с максимальным размером 375 т.п.н. в верхней части хромосомы 7, определяемым маркерами полиморфизма длин рестрикционных фрагментов CD61 и CD65 (8). Впоследствии CD61-специфические праймеры использовали для скрининга объединенной библиотеки томатов YAC (14).Саузерн-анализ показал, что среди пяти выделенных клонов YAC CD61-5 гибридизуется как с CD61, так и с CD65, и, следовательно, его вставка длиной 320 т.п.н. должна охватывать весь интервал CD61-CD65, включая локус Ls .

    ДНК YAC CD61–5 выделяли с помощью гель-электрофореза в пульсирующем поле и использовали в качестве зонда для скрининга библиотеки кДНК кончиков побегов томата (12). Среди изолированных клонов кДНК, представляющих по крайней мере 29 транскриптов, только один, y25, показал косегрегацию с локусом Ls и поэтому был использован в качестве якоря для установления космидного контига Ls области на хромосоме 7.Скрининг геномной космидной библиотеки с y25 привел к первоначальному набору из четырех перекрывающихся космидных клонов. Чтобы сориентировать этот набор перекрывающихся космидных клонов относительно генетической карты, концевые зонды контигов были картированы в популяции рекомбинантов, несущих точки разрыва рекомбинации вокруг локуса Ls (8). В то время как зонд C-for обнаружил три рекомбинанта в интервале между Ls и CD65, концевой зонд A-rev космиды A сегрегировался с локусом Ls (рис. A ), указывая на то, что мы должны были расширить контиг. в направлении CD61.После двух последовательных циклов выделения перекрывающихся космидных клонов был создан контиг, покрывающий ≈60 т.п.н. геномной ДНК (рис. A ).

    Функциональное дополнение
    ls 1 — Мутант.

    Для испытания на дополнение, космиды (рис. A ) были введены в листовые диски бокового супрессора Mutant ( LS 1 / LS 1 ) с использованием штамма Agrobacterium LBA4404 .Трансгенные растения проверяли на развитие боковых побегов и лепестков. В общей сложности 50 трансгенных растений, содержащих космиды A, B, C, D, E и F или векторную плазмиду pCLD04541, не давали ни боковых побегов, ни лепестков (таблица). Однако восемь из 16 независимых трансгенных растений, трансформированных либо космидой G, либо космидой L, дополняли мутантный фенотип. Саузерн-блоттинг показал, что только те растения, у которых наблюдается комплементация, содержат полную копию Т-ДНК. Три трансгенных растения, несущих интактную копию космиды G, развили боковые побеги почти в каждой пазухе листа и дали мутовку лепестков на всех цветках (рис.). Напротив, мы обнаружили, что пять трансгенных линий, несущих полную копию космиды L, развили боковые побеги только в части пазух листьев (69% в одной трансгенной линии), а также показали неполное восстановление фенотипа цветка. Поскольку это открытие может указывать на то, что ген Ls космиды L содержит мутацию или что отсутствует регуляторный элемент, последующие эксперименты проводились с использованием космиды G. Нет.трансгенных растений Количество растений, показывающий комплементации pCLD04541 8 0 космидной 5 0 космидной Б 15 0 космидной С 5 0 космидной D 7 0 космидной Е 2 0 космидной F 8 0 космидной G 5 3 космидной л 11 5 GSET4 2 2 GSET6 13 13 Cla Я 5 0

    Функциональное дополнение ls 1 .Сравнение фенотипов антимольдового B ( A , D , и г ), антимольдовый B- LS 1 ( B , E , а также ч ) и антимольдовый B- ls 1 , трансформированные космидой G ( C , F и I ). На рисунках показаны рост ( A C ), крупный план пазух листьев ( D F ) и крупный план цветка ( G I ).

    Для более точного определения положения гена Ls мы протестировали субфрагменты космиды G на комплементацию мутанта ls 1 . В то время как введение фрагмента Cla I размером 10,3 т.п.н. (фиг. B ) не комплементировало мутанту ls 1 , субфрагменты GSET 4 (8,4 т.п.о.) и GSET 6 (5,6 т.п.н.) восстанавливали дикую тип фенотипа (табл. ). Этот результат показал, что ген Ls расположен в пределах 5.6-kb Sna BI– Xho I фрагмент космиды G.

    Наследование комплементарного фенотипа проанализировано в трансгенной линии 9620, несущей единственную копию космиды G. Среди 28 растений самоопыленного потомства 9620 , мы обнаружили 20 растений, демонстрирующих комплементацию, и восемь растений с фенотипом ls . Устойчивость к канамицину наблюдалась только у тех растений, у которых проявлялась комплементарность. Этот результат согласуется с предположением, что однокопийная вставка Т-ДНК, сегрегирующая по менделевскому типу, сохраняет фенотип ls .

    Идентификация и характеристика
    гена Ls .

    Субфрагменты, охватывающие почти всю космиду G, использовали в качестве зондов для скрининга библиотеки кДНК кончиков побегов, полученной из РНК кончиков вегетативных и цветочных побегов. Среди протестированных 10 6 клонов мы идентифицировали два клона кДНК, из которых только один, ET1, оказался производным фрагмента Sna BI– Xho I размером 5,6 т.п.н., демонстрирующего комплементацию фрагмента ls 1 мутант.Анализ последовательности ДНК показал, что ET1 содержит ORF, начинающуюся с первого нуклеотида кДНК и заканчивающуюся стоп-кодоном в положении 1415 (инвентарный номер GenBank {«type»:»entrez-нуклеотид»,»attrs»:{«text» :»AF098674″,»term_id»:»4160440″}}AF098674), за которым следует нетранслируемая 3′-область длиной 271 п.н. и поли(А)-хвост.

    Для определения 5′-конца транскрипта были секвенированы три независимых продукта, полученных в экспериментах с 5′-RACE. Все три продукта начинаются с одной и той же пары оснований (положение 1), что позволяет предположить, что это положение соответствует 5′-концу транскрипта.ATG, инициирующему ORF (положение 131), предшествует несколько стоп-кодонов во всех трех фреймах, что убедительно свидетельствует о том, что этот ATG соответствует сайту начала трансляции. Из этих экспериментов мы делаем вывод, что транскрипт Ls имеет длину ≈1,7 т.п.н. и содержит ORF с кодирующей способностью 428 а.о. Сравнение кДНК и соответствующей последовательности геномной ДНК не выявило отклонений в последовательности между кДНК и ее геномным аналогом, что свидетельствует о том, что ген Ls не содержит интрона.

    Чтобы доказать, что идентифицированная ORF соответствует гену Ls , мы провели поиск изменений последовательности в мутантных аллелях ls . С этой целью были секвенированы продукты ПЦР, полученные из геномной ДНК мутанта ls 1 и ls 2 . Делеция ≈1,5 т.п.н. была обнаружена в мс 1 , удаляя первые 185 а.о. предсказанного белка и 995 п.н. лидерной и предполагаемой промоторной области.В аллеле ls 2 нуклеотидная последовательность CAACAGCG (позиция 203–210) заменена на TAAAAACGGAA. Предполагается, что переход C в T в положении 203, который изменяет Q на стоп-кодон, вызывает преждевременное прекращение трансляции через 24 а.о. Результаты экспериментов по комплементации вместе с анализом последовательности аллелей дикого типа и двух мутантных аллелей ls показывают, что мы выделили ген Ls .

    Ls Новый член семьи VHIID.

    Сравнение последовательности белка Ls с базами данных привело к списку белков со значительным сходством последовательностей. Помимо нескольких последовательностей с неизвестной функцией, идентифицированных в проектах по секвенированию, этот список включает три гена, идентифицированные недавно в Arabidopsis thaliana , которые принадлежат к семейству регуляторных белков VHIID: Scarecrow (SCR; ссылка 20), нечувствительный к гиббереллину (GAI; ссылка. 21) и репрессор гал-3 (RGA; ссылка 22). За исключением N-конца (аминокислоты 1–47), сходство между Ls и другими членами этого семейства распространяется на всю длину ORF (≈35% идентичности последовательности при использовании компьютерной программы fasta).Поскольку мы недавно выделили клон из A. thaliana со значительно более высоким сходством последовательностей с Ls , чем с SCR, GAI, или RGA (неопубликованные результаты), мы можем исключить возможность того, что Ls представляет собой томатный гомолог одного из этих генов.

    Мотив VHIID с неизвестной функцией, в честь которого было названо это семейство белков, включен в модифицированную версию (IHIVD) в область (аминокислоты 152–191 в Ls), демонстрирующую наибольшую консервативность между различными членами семейства (Инжир.). Только два дополнительных мотива последовательности, описанные для одного или нескольких из трех родственных белков, консервативны в Ls: второй лейциновый гептадный повтор, обнаруженный во всех четырех родственных генах, и мотив LXXLL ( 267 LHRLL 271 ), обнаруженный в GAI и RGA. недавно было показано, что он опосредует взаимодействие коактиваторов транскрипции с ядерными рецепторами (23). Все другие мотивы последовательности, описанные для одного или нескольких родственных белков, такие как сигнал ядерной локализации, первый гептадный повтор лейцина или bZIP-подобный домен, не обнаружены в Ls, что делает функциональную консервацию маловероятной.

    Анализ последовательности гена Ls . Выравнивание аминокислотных последовательностей белка Ls с белками Arabidopsis thaliana SCR (19), RGA (21) и GAI (20). Идентичные остатки отображаются обратным шрифтом, а похожие остатки — в серых прямоугольниках. Домен VHIID подчеркнут, остатки лейцина, определяющие консервативный гептадный повтор лейцина, обозначены звездочками, а мотив LXXLL треугольниками.

    N-конец белка Ls значительно короче, чем N-концы трех родственных белков (47 а.о. у Ls, 288 а.о. у SCR, 166 а.о. у GAI и 219 а.о. консервативность последовательности, но она имеет общие с другими последовательностями кластеры остатков серина и треонина (аминокислоты 7–46).Вторая область со сгруппированными остатками серина и треонина находится в Ls между аминокислотами 106 и 128.

    RT-PCR Обнаружение
    Ls мРНК.

    Идентификация только одного гибридизующегося клона кДНК из библиотеки кДНК кончиков побегов среди ≈10 6 протестированных бляшек позволяет предположить, что стационарные уровни транскрипта Ls очень низки. Это первоначальное наблюдение было подтверждено обнаружением того, что мРНК Ls не обнаруживалась в экспериментах по Нозерн-блот-гибридизации.Поэтому анализ ОТ-ПЦР проводили с тотальной РНК из разных органов растений. Транскрипт Ls был обнаружен в верхушках побегов, цветках, корнях и молодых листьях, но не в междоузлиях (рис. A ). Из-за присущих методу ОТ-ПЦР характеристик наблюдаемые количественные различия в уровнях мРНК следует рассматривать с осторожностью.

    ОТ-ПЦР обнаружение Ls мРНК в различных органах растений. ( A ) Тотальную РНК из различных органов растений анализировали с помощью ОТ-ПЦР, и продукты ПЦР гибридизовали с кДНК Ls в качестве зонда.Амплификацию кДНК актина использовали для обеспечения того, чтобы в каждую реакцию ПЦР добавляли равные количества кДНК. ( B ) Тотальную РНК экстрагировали из листьев растений, гомозиготных по Antimold B- Ls (Wt), Antimold B- ls 1 и Primabel- ls RT 2 -, и затем анализировали с помощью ПЦР.

    Для проверки наличия транскрипта двух мутантных аллелей суммарная РНК, выделенная из молодых листьев растений, гомозиготных по аллелю Ls дикого типа, ls 1 или ls 2 , соответственно, анализировали с помощью ОТ-ПЦР.В LS 1 / LS 1 1 1 Растения, без мРНК, тогда как LS 2 / LS 2 и растения дикого типа содержат транскрипты равного размера (рис. b ). Этот результат согласуется с выводом о том, что аллель ls 1 содержит удаляющую делецию часть ORF, а также предполагаемую промоторную область, и демонстрирует, что ls 1 явно является нулевым аллелем.

    ОБСУЖДЕНИЕ

    Мы выделили локус Ls путем позиционного клонирования и продемонстрировали идентичность гена Ls путем комплементации и анализа последовательности двух существующих мутантных аллелей. Идентичные фенотипические дефекты мутантных аллелей в обоих случаях обусловлены полной потерей функции белка Ls, вызванной делецией в ls 1 и введением стоп-кодона всего через 24 а.о. в ls 2 .

    Белок, кодируемый геном Ls , имеет значительное сходство последовательностей с членами нового семейства растительных белков VHIID. В дополнение к характерному домену VHIID с неизвестной функцией ранее описанные члены этого семейства, SCR (20), GAI (21) и RGA (22), демонстрируют ряд особенностей, указывающих на потенциальную роль регуляторов транскрипции. В хорошо консервативной С-концевой части между Ls и другими членами семейства сохраняются только лейциновый гептадный повтор (аминокислоты 206–226) и LXXLL (аминокислоты 267–271).Было показано, что мотив LXXLL участвует в связывании коактиваторов стероидных рецепторов с соответствующими стероидными рецепторами (23). Однако значение этого мотива для растений сомнительно, потому что он часто встречается, а присутствие белков, подобных ядерным рецепторам, у растений еще предстоит показать. Хотя N-концевые домены членов этого семейства имеют различную длину и непохожи по последовательности, присутствие коротких гомополимерных участков остатков серина и треонина является признаком, общим для белка Ls с RGA и SCR и, в меньшей степени, с ГАИ.Такие гомополимерные участки были обнаружены в доменах активации факторов транскрипции, и было показано, что участки, богатые серином или треонином, могут служить мишенями для модификации остатками N -ацетилглюкозамина, приводящей к изменению активности соответствующих белков. (24). Такие модификации могут быть введены белками, подобными белку SPINDLY A. thaliana , который участвует в регуляции передачи сигнала GA и имеет сходную последовательность с N -ацетилглюкозаминтрансферазами животных (25).Поскольку у предсказанного белка Ls отсутствует предполагаемый сигнал NLS, у нас нет веских указаний на его роль в качестве регулятора транскрипции. Однако наличие консервативного лейцинового гептадного повтора позволяет предположить, что он взаимодействует с родственными белками, которые сами действуют как регуляторы транскрипции.

    Тот факт, что белок, кодируемый геном Ls , связан с двумя белками, участвующими в негативной регуляции передачи сигнала GA (GAI, RGA), поддерживает модель, которая постулирует роль белка Ls в механизме локализованного регуляция реактивности ГА.Эта точка зрения подтверждается открытием, что мутант ls характеризуется тяжелым дисбалансом основных растительных гормонов (7). Среди гормонов, уровень которых изменяется, ГА представляет особый интерес, поскольку известно, что некоторые аспекты фенотипа ls , такие как снижение прорастания семян и развитие лепестков, зависят от ГА (26, 27). Чтобы поддерживать свое недифференцированное состояние, меристематические клетки должны быть защищены от гормональных сигналов, индуцирующих дифференцировку в окружающих клетках.Одним из способов достижения этого является локальная негативная регуляция пути передачи сигнала GA. Низкое содержание мРНК Ls до сих пор не позволяло нам подтвердить эту модель, анализируя экспрессию на уровне in situ , но анализ ОТ-ПЦР показывает экспрессию Ls в тканях, которые включают зачатки, пораженные в ls мутантные растения. Резкое увеличение уровней ГА, обнаруженное в различных органах мутанта ls (7), может быть связано с нарушением обратной связи ингибирования синтеза ГА, как это предполагается в случаях нечувствительных к ГА мутантов, которые содержат повышенные уровни ГА. (28, 29).Дисбаланс в уровнях других основных растительных гормонов может быть либо результатом взаимосвязи метаболизма различных растительных гормонов, либо может указывать на то, что белок Ls участвует в различных путях передачи сигнала.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *